《CUL4A在小細胞肺癌發生髮展中的作用及其調控機制》是依託天津醫科大學，由任秀寶擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CUL4A在小細胞肺癌發生髮展中的作用及其調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：任秀寶
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
小細胞肺癌（SCLC）占肺癌總數的10-20%，早期易發生轉移，約67%的SCLC發現時即診斷為進展期肺癌，且癌細胞生長速度快，易發生化療耐藥，治療效果不佳。因此探索在SCLC發生髮展過程中發揮關鍵作用的分子，對於提高SCLC的防治效果具有重要意義。課題組在前期工作中發現腫瘤細胞中CUL4A表達升高，並且與腫瘤發生、細胞生長、凋亡及藥物敏感性相關。本項目在此基礎上，深入探討CUL4A在SCLC發生髮展中的作用。首先，分析SCLC中CUL4A泛素連線酶及其底物的表達，及其與患者臨床指標、DNA損傷及修復情況的關係，評價CUL4A在SCLC發生當中的作用及機制；其次，觀察以蛋白敲除聯合shRNA方法下調CUL4A，評價對SCLC細胞生長、凋亡及藥物敏感性的影響及其作用途徑。總之，通過本項目研究，評價CUL4A在SCLC發生、發展中的作用及機制，為研發靶向CUL4A 的個體化防治策略奠定基礎。
結題摘要
泛素化作為一類重要的體內蛋白質翻譯後修飾，能夠導致靶蛋白的降解。泛素連線酶（E3, Ubiquitin ligase）是泛素化過程中的關鍵酶之一，負責介導經泛素激活酶（E1, Ubiquitin-activiting enzyme）活化的泛素從泛素結合酶（E2, Ubiquitin-conjugating enzyme）轉移至底物蛋白的過程。不同的E3連線酶能夠識別不同的底物蛋白，從而決定了泛素化修飾的底物特異性。CUL4A和CUL4B是E3家族的重要成員，它們參與在翻譯後水平精確調節細胞周期、DNA修復以及細胞凋亡等過程中關鍵蛋白的降解及活性，參與多種惡性腫瘤的發生、發展過程。 課題組收集天津醫科大學腫瘤醫院2000年1月-2011年6月期間手術的352例肺癌患者的腫瘤組織標本，以及62例肺癌患者的術後非腫瘤上皮組織標本,套用免疫組織化學染色（IHC）方法檢測肺癌組織和非腫瘤上皮組織的CUL4A和CUL4B表達情況，分析CUL4A和CUL4B的表達與患者的臨床病理學資料以及預後之間的關係。並通過穩定沉默CUL4A、CUL4B的肺癌細胞株模型的建立，探討肺癌組織中高水平表達的CUL4A和CUL4B對肺癌細胞生長和凋亡的影響及其機制。 實驗結果表明：肺癌組織中CUL4A和CUL4B的表達水平顯著高於62例非腫瘤上皮組織（P＜0.001）。CUL4A/CUL4B高表達組中，其DNA含量顯著高於低表達組（P＜0.001）。③CUL4A高表達組患者吸菸人數顯著高於CUL4A低表達組。CUL4A和CUL4B表達與患者臨床分期、腫瘤體積、遠處轉移和淋巴結轉移，以及總生存（Overall Survival, OS）和無病生存（Disease-free Survival, DFS）顯著相關。 CUL4A在肺癌細胞生長中的作用及機制：穩定沉默肺鱗癌細胞系NCI-H520和小細胞肺癌細胞系NCI-H446的CUL4A後，出現細胞周期S期縮短，G0/G1期阻滯現象，與此同時XPC和p21蛋白表達量升高；在沉默CUL4A的基礎上沉默p21後，上述細胞周期變化得到逆轉；並且在肺癌組織中CUL4A和XPC及p21的表達呈負相關。提示CUL4A可能通過p21調節肺癌細胞系的細胞周期。 通過小鼠模型驗證CUL4A/B對肺癌生長的調節作用.
