隨機擴增多態性DNA

隨機擴增多態 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD)，是美國學者Williams和Welsh於1990年首先提出的該技術是通過分析DNA的PCR產物的多態性來推測生物體內基因排布與外在性狀表現的規律的技術。RAPD技術是以8-lObp的隨機寡核苷酸片段作為引物，對基因組進行PCR擴增，擴增產物通過瓊脂糖凝膠電泳或PAGE電泳檢測，研究DNA的多態性。

基本介紹

• 中文名：隨機擴增多態性DNA
• 領域：生物學
• 國家：美國
• 簡稱：RAPD

簡介

RAPD標記（Random amplifiedpolymorphim DNA , RAPD）是由美國人Williams和Welsh等於1990年利用PCR技術發展起來的一種DNA多態性標記。它是利用隨機引物對目的基因組DNA進行PCR擴增，產物經電泳分離後顯色，分析擴增產物DNA片段的多態性，此即反應了基因組相應片段由於鹼基發生缺失、插入、突變、重排等所引發的DNA多態性。

研究

由於隨機引物在較低的復性溫下能與基因組DM非特異性的結合，當相鄰兩個引物間的DNA小於2 000bp時，就能夠得到擴增產物。與RFLP相比，RAPD具有很多優點。（1)不需要了解研究對象基因組的任何序列，只需很少純度不高的模板，就可以檢測出大量的信息。（2)無需專門設計RAW)反應引物，隨機設計長度為8-10個鹼基的核苷酸序列就可套用。（3)操作簡便，不涉及分子雜交、放射自顯影等技術。（4)需要很少的DNA樣本。(5)不受環境、發育、數量性狀遺傳等的影響，能夠客觀地提示供試材料之間DNA的差異。可以檢測出RFLP標記不能檢測的重複順序區。當然RAPD技術有一定的局限性，它呈顯性遺傳標記（極少數共顯性），不能有效區分雜合子和純合子。易受反應條件的影響，某些情況下，重複性較差，可靠性較低，對反應的微小變化十分敏感。如聚合酶的來源，DNA不同提取方法，Mg2+離子濃度等都需要嚴格控制_。