銅綠假單胞菌多粘菌素異質性耐藥機制研究

《銅綠假單胞菌多粘菌素異質性耐藥機制研究》是依託浙江大學，由季京淑擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：銅綠假單胞菌多粘菌素異質性耐藥機制研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：季京淑
• 項目類別：青年科學基金項目

項目摘要

銅綠假單胞菌是重要條件致病菌及院內感染病原菌之一，其多重耐藥現狀十分嚴峻。多粘菌素是目前治療多重耐藥革蘭陰性菌感染的最後防線。現有研究表明：雖然銅綠假單胞菌對多粘菌素的敏感性較高，但其異質性耐藥問題十分嚴重。本課題組前期研究發現：碳青黴烯類耐藥銅綠假單胞菌對多粘菌素的異質性耐藥率高達35%，但其機制及對耐藥發展的影響仍不明確。本課題組擬以多粘菌素異質性耐藥銅綠假單胞菌及其耐藥亞群為研究對象，研究LPS和脂質A成分的變化及雙組分調控系統的基因突變和表達量改變與異質性耐藥的關係，明確異質性耐藥機制；通過分析異質性耐藥亞群的表型穩定性和均一性，同時分析異質性耐藥菌株在體內外經藥物作用前後的耐藥性是否轉變，闡明異質性耐藥與耐藥的相關性；通過突變體庫和全基因組等方法對未明機制的異質性耐藥亞群進行分析，以期發現新的機制。本研究結果將為多粘菌素的臨床合理套用和多粘菌素耐藥性的防控提供科學基礎。

結題摘要

銅綠假單胞菌是重要條件致病菌及院內感染病原菌之一，其多重耐藥現狀十分嚴峻。多粘菌素是目前治療多重耐藥革蘭陰性菌感染的最後防線。前期研究發現銅綠假單胞菌對多粘菌素存在異質性耐藥現象，故本研究以碳青黴烯類耐藥的銅綠假單胞菌為研究對象，通過群體譜分析獲得多粘菌素異質性耐藥菌株，運用PCR、RT-qPCR、SDS-PAGE、MALDI-TOF-MS及基因組測序等技術方法，研究雙組分調控系統及脂質A修飾等在銅綠假單胞菌多粘菌素異質性耐藥中的作用。本研究闡明了雙組分調控系統PmrAB、PhoPQ、ParRS、CprRS及基因arnB在多粘菌素異質性耐藥銅綠假單胞菌菌株中存在差異表達，提示雙組分調控系統和arnB基因在部分亞群里參與了多粘菌素的耐藥調控；LPS在異質性耐藥菌株中沒有缺失；脂質A存在L-Ara4N修飾，是導致異質性耐藥的主要機制；pmrB和phoQ的SNP突變，可能導致雙組分調控系統表達改變，也是多粘菌素異質性耐藥的重要原因。本研究將為臨床治療銅綠假單胞菌感染多粘菌素的合理使用和多粘菌素耐藥菌的院內感染防控提供實踐指導。