《MexS調控銅綠假單胞菌III型分泌系統分子機制的研究》是依託南開大學，由靳永新擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MexS調控銅綠假單胞菌III型分泌系統分子機制的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：靳永新
- 依託單位：南開大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
銅綠假單胞菌是一種重要的人類條件致病菌，能夠引起嚴重的急性與慢性感染。該菌的III型蛋白分泌系統是其感染宿主的重要機制，直接影響其感染能力及致病性，因此該系統及其調控因子是潛在的治療靶點。該菌的耐藥性也極其嚴重，限制著有效的治療方案。MexS是銅綠假單胞菌耐藥的重要調節因子，本實驗室的前期工作首次發現MexS可負調控III型分泌系統，然而，該調控的分子機制尚不清楚。通過系列前期工作推測，MexS調控III型分泌系統的途徑可能為：通過激活III型分泌系統的抑制因子，或抑制III型分泌系統的激活因子，或兩種途徑同時存在。本申請擬通過構建轉座子突變文庫，全基因組文庫的方法確定該抑制因子，通過細菌雙雜交、Pull down等技術尋找該激活因子，闡明MexS調控III型分泌系統的分子機制。該研究將為干預銅綠假單胞菌的致病性及耐藥性提供新的切入點，並為新型有效防治該菌感染策略的開發提供線索和理論基礎。
結題摘要
銅綠假單胞菌是一種重要的人類條件致病菌，III型分泌系統（T3SS）是其一個重要的毒力因子，在其引起宿主急性感染過程中發揮著至關重要的作用。該菌具有天然地和可獲得地多種耐藥機制，為該菌感染的臨床治療帶來了巨大困難。本項目旨在研究MexS調控銅綠假單胞菌III型分泌系統的分子機制。在項目執行期間，我們進行了以下研究並取得如下成果：1、NrtR通過cAMP-Vfr信號通路調控銅綠假單胞菌T3SS；2、毒素蛋白HigB通過影響細胞內c-di-GMP水平，反向調節銅綠假單胞菌的T3SS和生物被膜形成能力；3、Fis通過影響exsA的轉錄調控銅綠假單胞菌的T3SS；4、細菌介導的轉錄因子遞送能夠增強人多能幹細胞向心肌細胞的分化；5、通過研究銅綠假單胞菌感染過程中外膜蛋白表達譜的變化確定對異源脂多糖均具有保護作用的備選疫苗；6、銅綠假單胞菌小RNA P27直接影響群體密度感應系統合成酶基因rhlI的翻譯；7、阿奇黴素與慶大黴素聯用能夠有效治療銅綠假單胞菌引起的感染；8、功能未知基因PA2285和PA2287通過抑制細菌轉錄和細胞分裂減緩細菌的生長，進而促進銅綠假單胞菌持留菌的形成；9、銅綠假單胞菌PNPase通過PrtR調控該菌對環丙沙星的抗性；10、RsaL介導的銅綠假單胞菌對環丙沙星和羧苄青黴素的耐受機制；11、宿主體內環境影響了銅綠假單胞菌對氨基糖苷類抗生素的敏感性；12、銅綠假單胞菌PA5470能夠通過釋放停頓的核糖體，中和阿奇黴素的抗菌效果；13、寡核苷酸酶（Orn）通過調節KatA來賦予銅綠假單胞菌對氨基糖苷和β-內醯胺類抗生素的耐受性；14、 向難轉染細胞系遞送蛋白質的高效蛋白遞送系統的開發。這些發現能夠增加人們對銅綠假單胞菌致病性機理及耐藥機制的認識，希望能夠為銅綠假單胞菌感染的治療提供新的靶點和新的思路。
