《遺傳性卵巢早衰基因定位及突變鑑定研究》是依託浙江大學，由張丹擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：遺傳性卵巢早衰基因定位及突變鑑定研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：張丹
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
卵巢早衰定義為女性在40歲前發生卵巢功能衰竭，嚴重影響了患者的生活質量及生殖健康。卵巢早衰的病因複雜，目前尚不明確，極有可能與遺傳基因有關。本課題組前期已收集一組珍貴的遺傳性卵巢早衰家系患者的臨床資料與血樣，以此為突破口，研究卵巢早衰的遺傳學機制。通過全基因連鎖分析技術，微衛星遺傳分子標記篩查基因，全基因組外顯子捕獲及深度測序技術鑑定突變位點，目前已初步篩選出某些基因突變位點與該遺傳性卵巢早衰密切相關。以這些初篩突變位點為基礎，繼續深化利用以上技術，進一步明確與卵巢早衰相關基因突變。並在家系其他成員及特發性卵巢早衰患者中驗證該突變。通過體外細胞定點突變、相關蛋白活性檢測及在體靶向突變動物模型實驗，進行突變基因功能驗證，從而闡明卵巢早衰的分子遺傳機制。本原創性研究有助解析卵巢早衰的發病機理，為早期干預卵巢早衰和遺傳阻斷提供理論基礎，促進生殖健康，提高女性生活質量，兼具重大科研價值和社會意義。
結題摘要
卵巢早衰是由於各種因素導致的女性在40 歲前發生卵巢功能衰竭，原發性或繼發性閉經（至少4個月以上），同時伴有促性腺激素水平上升(＞40IU/L)和雌激素水平下降(＜50pg/ml)，嚴重影響患者的生活質量及生殖健康，大大加重社會公共醫療負擔。卵巢早衰病因複雜，目前尚不明確，極有可能與遺傳基因有關。 本課題組收集到一組珍貴的遺傳性卵巢早衰家系患者的臨床資料與血樣，通過全基因連鎖分析、微衛星檢測技術、全基因組外顯子捕獲技術和二代測序技術，鑑定出致病突變為Basonuclin1（BNC1）基因。該家系卵巢早衰患病成員均為BNC1基因5個鹼基缺失導致移碼突變後提前遇上終止子形成截短型突變、並缺失了BNC1基因上的核定位信號和三對鋅指結構，家系中正常成員則不帶有BNC1基因突變。隨後在82例散發性卵巢早衰患者中亦發現3例BNC1點突變，但在332例正常對照中則沒有發現BNC1基因突變。此外，我們確認了BNC1蛋白在人及小鼠卵巢、睪丸、卵子中的表達，並通過構建BNC1靶向缺失突變或點突變的細胞模型，發現BNC1突變將導致BNC1蛋白入核功能障礙。通過小RNA干擾技術降調人卵子BNC1表達後，我們發現BNC1的缺失將導致卵子退化比例顯著升高，第一極體排出率和成熟為MII期卵子率顯著降低（P＜0.01）。BNC1缺失的小鼠卵子中BMP15和p-AKT表達亦顯著降低。通過構建BNC1靶向突變的小鼠動物模型，我們發現突變小鼠生育力顯著降低、FSH顯著升高，卵巢明顯萎縮、卵泡提前耗竭，確證了BNC1突變將導致卵巢早衰的發生。本課題組在國內外首次發現並證實BNC1基因突變為卵巢早衰致病基因，相關研究成果有助解析卵巢早衰的發病機制，為卵巢早衰早期干預和遺傳阻斷提供理論基礎，有助提高女性生殖健康和生活質量，降低相關醫療損耗。
