《自噬對卵巢癌細胞耐藥及失巢凋亡抵抗的調控作用》是依託上海交通大學，由狄文擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：自噬對卵巢癌細胞耐藥及失巢凋亡抵抗的調控作用
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：狄文
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
死亡率居婦科惡性腫瘤之首的上皮性卵巢癌極易發生遠處轉移和多藥耐藥，探討闡明卵巢癌化療耐藥及侵襲轉移機制是亟待解決的關鍵問題。自噬-溶酶體途徑通過降解胞質細胞器及錯誤摺疊和聚集蛋白，在細胞新陳代謝中發揮至關重要的作用。目前發現自噬作為一個全新的細胞死亡調節通路在人類腫瘤的發生髮展中起重要調控作用。我們前期工作表明：自噬在某藥（FYY720）介導的抗卵巢癌效應中發揮保護作用；卵巢癌耐藥細胞株的自噬水平明顯高于敏感細胞株；失巢凋亡的強力抑制劑TrkB促使卵巢癌侵襲轉移。本課題首次將自噬和卵巢癌耐藥及失巢凋亡抵抗有機的結合在一起，通過檢測自噬調控分子在卵巢癌各期標本、原發灶及腹膜轉移灶標本、敏感及耐藥復發標本中的表達差異，繼而深入研究自噬在卵巢癌耐藥及失巢凋亡抵抗中發揮的效應及調控機制，以明確具有雙重作用的自噬在卵巢癌體系中發揮的作用，揭示卵巢癌耐藥轉移機制新視角，為開展新的靶向治療提供理論依據。
結題摘要
研究目的與方法： 1.採用免疫組化及蛋白印跡法分析自噬效應分子在組織及細胞株中的表達情況，明確自噬與卵巢癌發生、耐藥及轉移的相關性； 2.採用凋亡和自噬相關分子生物學技術，探索具有雙刃劍效應的自噬在卵巢癌細胞耐藥及轉移中發揮的具體調控作用，為卵巢癌細胞的耐藥轉移機制提供研究新視角； 3.構建失巢凋亡的模型研究細胞間（ECM）信號通路在調控細胞自噬，進而導致卵巢癌細胞失巢凋亡抵抗中的作用，為開發卵巢靶向治療的新方法提供理論依據。 研究結果 1．卵巢癌化療敏感臨床標本與耐藥標本相比，PP2Ac的表達明顯增高，而LC3的表達明顯降低，兩者之間存在相關性。 2．在卵巢癌耐藥細胞中，自噬的表達水平明顯增高，而且有明顯的CDDP濃度依賴性，而且3-MA或者siRNA抑制自噬表達可以增加細胞對CDDP藥物的敏感性。 3．PP2Ac在卵巢耐藥細胞中的表達降低。PP2Ac對LC3的表達有明顯的負調控作用。通過PP2Ac質粒過表達或者小劑量FTY720增加PP2A活性，CDDP誘導耐藥細胞自噬明顯降低，增加了細胞對藥物的敏感性。而干擾PP2Ac可以增強耐藥細胞自噬表達，增強其對CDDP藥物的耐受性。 4．卵巢癌敏感和耐藥細胞株裸鼠原位成瘤模型顯示：鉑類耐藥細胞成瘤其自噬表達明顯高于敏感細胞成瘤。 5．卵巢癌上皮細胞模擬失巢凋亡的懸浮培養、Matrigel鋪膠培養、常規培養中，失巢凋亡培養細胞自噬表達明顯增強，其次為鋪膠培養。而且整合素表達在失巢凋亡中明顯降低。 研究結論 本課題主要針對臨床上出現的大量卵巢癌化療耐藥，以期探尋新的靶向治療克服耐藥為目的。通過臨床病理標本、細胞分子生物學實驗和動物模型研究自噬在卵巢癌耐藥及失巢凋亡抵抗中所起到的重要作用及其調控機制。 1.在卵巢癌耐藥細胞中自噬起到保護性作用，是造成腫瘤耐藥的重要原因之一，抑制自噬可以促進耐藥細胞對腫瘤的敏感性。 2.PP2Ac負調控卵巢癌耐藥細胞自噬作用，小劑量FTY720可以提高PP2A活性，降低細胞自噬的分子的表達，而且作為化療增敏劑促進腫瘤對化療藥物的敏感性。 3.自噬是造成卵巢癌失巢凋亡抵抗的重要原因，其主要通過整合素途徑調控腫瘤細胞的自噬作用。兩者之間存在負調控關係。
