《HIF-1a/LOX-自噬對卵巢癌細胞耐藥及轉移的調控作用》是依託上海交通大學，由張寧擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：HIF-1a/LOX-自噬對卵巢癌細胞耐藥及轉移的調控作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張寧
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
死亡率居婦科惡性腫瘤之首的上皮性卵巢癌(EOC)極易發生遠處轉移和多藥耐藥，探討闡明卵巢癌耐藥轉移機制是亟待解決的關鍵問題。缺氧微環境與腫瘤發生進展、預後和轉移密切相關；缺血缺氧誘導的自噬-溶酶體信號通過降解胞質細胞器及錯誤摺疊蛋白，在細胞新陳代謝中發揮重要作用。我們前期工作：EOC耐藥株自噬水平明顯高于敏紙祖膠戰感株，自噬在藥物抗卵巢癌效應中起保護作用；HIF-1a/LOX信號軸調節EOC耐藥轉移，HIF-1a抑制劑NSC606985在納摩爾濃度即顯示抗卵巢癌作用。本葛轎鑽課題將首次聚焦關注缺氧環境下HIF-1a/LOX信號軸對EOC自噬的調控：檢測缺氧和自噬相關分子在EOC原發灶及腹膜轉移灶、敏感及耐藥復發標本中的表達差異，繼而深入研究HIF-1a/LOX-自噬對EOC耐藥轉移的調節效應，最後聚焦於HIF-1a抑制劑NSC606985通過調控自噬而發揮的抗癌效應，元主料為開展卵巢癌靶向治療提供理論依據。
結題摘要
死亡率居婦科惡性腫瘤之首的上皮性卵巢癌極易發生遠處轉移和多藥耐藥，探討闡明卵巢癌耐藥轉移機制是亟待解決的關鍵問題。缺氧微環境與腫瘤發生進展，預後和轉移密切相關挨境遷，缺氧通過減少DNA修復和增加突變率，促進腫瘤活細胞遺傳不穩定，賦予更惡性表型，導致侵略性腫瘤的生長，區域和遠處轉移。自噬是廣泛存在於真核細胞內的一種溶酶體依賴性的降解途徑，主要負責長壽命蛋白質和胞質細胞器的批量降解，通過單層或雙層膜包裹待降解物（特徵性自噬體），然後運送到溶酶體形成自噬溶酶體進行消化降解，其與泛素依賴性的蛋白酶體系統（降解短壽命蛋白質作用）一起在細胞的新陳代謝中行使著至關重要的作用本課題聚焦靶向缺氧微環境下自噬對卵巢癌耐藥轉移的調控機制。本課題基本按照研究計畫逐步進行，如期完成，對雙刃劍自噬在卵巢癌耐燥翻葛記藥轉移中發揮的作用有更深一步的理解。研究結騙蘭果如下： （1）低喇朵講氧可誘導上皮性卵巢癌細胞發生自噬，HIF-1α和自噬相關基因呈現出低氧濃度依賴型表達：本實驗建立“常氧+轉染HIF-1α質粒”，“缺氧+轉染siRNA-HIF-1α”兩個培養模式體系，在常氧狀態下，轉染HIF-1α質粒後Beclin 1、LC3蛋白水平相應增加。在低氧狀態下，敲除HIF-1α後，Beclin 1、LC3表達相應減少，提示HIF-1α可以調控自噬水平。新型喜樹鹼類藥物NSC606985在納摩爾濃度即可發揮對HIF-1α的調控作用，呈現劑量依賴效應，但在兩種卵巢癌細胞株中效應截然相反。隨著NSC606985濃度的增加，逐漸下調HO8910PM細胞中低氧誘導的HIF-1α水平，自噬相關分子Beclin 1、LC3表達相應減少；而在HO8910細胞中則隨藥物劑量增加上調了HIF-1α蛋白水平，相應Beclin 1、LC3分子表達增加。(2) RhoA/ROCK 信號通路介導的細胞骨架蛋白的變化在低氧自噬環境中卵巢癌的耐藥轉移特性發揮調控作用：在上皮性卵巢癌細胞株中用3-MA或siRNA抑制LC3表達後，RhoA及其活性形式和下游的ROCK1表達相應抑制，並伴隨著細胞骨架F-Actin的形態學變化。（3）自噬在卵巢癌細胞耐藥中發揮促進作用：耐藥細胞株中的自噬水平明顯高于敏感細胞株，自噬抑制劑可以提高卵巢癌細胞對化療藥物的敏感性。（4）動物試驗，通過巨觀層面和微觀分子學檢測證實自噬抑制劑可抑制卵巢癌細胞的生長及轉移。
