《脂肪細胞分化過程中的DNA甲基化調控研究》是依託北京師範大學，由翟永功擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：脂肪細胞分化過程中的DNA甲基化調控研究
- 依託單位：北京師範大學
- 項目負責人：翟永功
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
脂肪細胞的分化機制和調控對於探討生命和疾病過程具有重要意義。表觀遺傳調控在人類代謝綜合症發展中起著重要作用，甲基化是基因組DNA的一種主要表觀遺傳修飾形式，其在細胞分化過程中具有重要作用。在脂肪細胞分化過程中，C/EBPα 和 PPARγ 被認為是脂肪細胞分化過程中必不可少的因子。本項目針對在脂肪細胞分化過程中起關鍵作用的C/EBPα的甲基化調控這一關鍵問題，集中研究DNA甲基化對脂肪細胞分化的機制和調控，闡釋脂肪細胞分化過程中的DNA甲基化調控模式。通過細胞和整體動物水平DNA甲基化特徵分析，明確脂肪細胞分化關鍵基因C/EBPα的DNA甲基化特徵；通過篩選脂肪細胞分化前後DNA甲基化敏感基因並對其功能進行研究，進一步明確脂肪細胞分化和脂質合成調控的分子基礎；證實DNA甲基化在脂肪細胞分化和調控中發揮著重要作用，為機體脂肪細胞分化和脂質合成的表觀遺傳調控奠定基礎。
結題摘要
摘要：脂肪細胞的分化機制和調控對於探討生命和疾病過程具有重要意義。表觀遺傳調控的甲基化是基因組DNA的一種主要表觀遺傳修飾形式，其在細胞分化過程中具有重要作用。在脂肪細胞分化過程中，C/EBPα 和 PPARγ 被認為是脂肪細胞分化過程中必不可少的因子。本項目針對在脂肪細胞分化過程中起關鍵作用的C/EBPα的甲基化調控這一關鍵問題，集中研究DNA甲基化對脂肪細胞分化的機制和調控，闡釋脂肪細胞分化過程中的DNA甲基化調控模式。解決的主要問題是：脂肪細胞誘導分化模型的確立和誘導過程中的基因表達分析。在目前的有關脂肪細胞分化和脂滴研究中，大多都採用持續加胰島素的模式，即“2-4-8天”持續加胰島素。這種方法雖然能看到明顯的細胞分化和脂滴效果，但可以說完全是胰島素誘導的結果。為了還原脂肪細胞分化過程和脂滴產生的真實情況，我們採用了“4-8天“不加胰島素的模式。其獲得的基因表達譜、miRNA 檢測結果及其脂肪細胞培養液中脂質分子LPA、LPC等的含量與“2-4-8天”持續加胰島素模式有較大的區別。本實驗結果的獲得為後續實驗研究奠定了方法學基礎。 通過細胞和整體動物水平DNA甲基化特徵分析，明確脂肪細胞分化關鍵基因C/EBPα的DNA甲基化特徵；通過篩選脂肪細胞分化前後DNA甲基化敏感基因並對其功能進行研究，進一步明確了脂肪細胞分化和脂質合成調控的分子基礎；證實DNA甲基化在脂肪細胞分化和調控中發揮著重要作用，為機體脂肪細胞分化和脂質合成的表觀遺傳調控奠定基礎。此外，在我們利用前體脂肪細胞3T3-L1進行抗脂肪細胞分化和脂質合成新藥物配體的研究中，發現新藥物配體SAW對於C/EBPα十分敏感，具有明顯的抑制前體脂肪細胞分化的作用。同時，SAW也可影響有關基因的甲基化調控敏感性。還有，在進行脂肪細胞分化的甲基化調控過程中，利用已建立的細胞水平的甲基化分析系統，對有關核受體配體進行了一些檢測，意外的發現DBZ（一全新化合物）具有明顯抑制脂肪細胞中脂質的合成和泡沫細胞的形成的作用，其抗炎作用的研究結果發表在CPB（2011）。在實驗用的候選藥物中，發現APAP具有一定肝細胞毒性，但在用LXR激動劑處理細胞時，這種毒性作用減弱。這一細胞學上的表型，後來在轉基因小鼠上得到證實。此結果我們與美國匹茲堡大學謝文教授合作，論文在Hepatology(2011) 發表。
