胰腺癌細胞對吉西他濱產生抗藥性的分子機制研究

《胰腺癌細胞對吉西他濱產生抗藥性的分子機制研究》是依託西南大學，由楊曉明擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：胰腺癌細胞對吉西他濱產生抗藥性的分子機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：楊曉明
• 依託單位：西南大學

項目摘要

吉西他濱作為胰腺癌的一線化療藥物在臨床上廣泛套用，但是胰腺癌細胞對吉西他濱的抗藥性極大地降低了治療效果。Plk1被發現在吉西他濱抗藥性產生中發揮關鍵調控作用，但相關分子機制尚不清楚。本項目針對這一問題，首先將比較Plk1活性對於具有不同程度吉西他濱抗藥性的胰腺癌細胞進行DNA複製的影響，進而闡明Plk1對於胰腺癌細胞的DNA複製不可或缺。其次申請者前期研究表明Plk1能夠磷酸化DNA複製機制的關鍵因子Hbo1，且該磷酸化與DNA複製有關，故將檢測這一磷酸化是否影響胰腺癌細胞中DNA預複製複合物的形成，以及表達磷酸化缺失形式的Hbo1是否激活DNA複製期間檢測點信號，進而闡明在胰腺癌細胞中，Plk1是如何通過磷酸化Hbo1來調控DNA複製，從而導致胰腺癌細胞對吉西他濱產生抗藥性。本項目的研究成果將會解釋胰腺癌細胞抗藥性產生的精細分子機理，最終促成更有效的胰腺癌治療方案的研發。

結題摘要

本計畫自2012年1月開始實施，2014年12月結束。根據原計畫安排，在三年的項目執行期內，我們計畫完成以下兩方面的研究內容：（1）驗證是否吉西他濱抗藥性的產生源於胰腺癌細胞依賴Plk1蛋白激酶活性來進行DNA複製；（2）闡明Plk1介導的磷酸化Hbo1是如何在吉西他濱抗藥性胰腺癌細胞中調控DNA複製的。 目前為止，已按原計畫完成所有研究內容，並已取得部分研究成果。研究計畫中的第一項研究內容已完成了以下工作：①闡明在子宮頸瘤細胞中，Plk1磷酸化Hbo1對於DNA預複製複合物（pre-RC）的形成起關鍵調控作用；②闡明過表達Hbo1-S57A會降低癌細胞的DNA複製，同時會降低HAT的活性；③闡明Plk1能夠在體外和體內磷酸化DNA預複製複合物形成的重要成員之一（Orc2）；④闡明Plk1磷酸化Orc2並不僅僅發生在胰腺癌細胞和其他癌細胞中，在正常細胞中同樣會發生。第二項研究內容已完成以下工作：①闡明在胰腺癌的組織中，Plk1是過表達的；②闡明Plk1的表達情況與吉西他濱在體內、體外產生的耐藥性是相關的；③闡明在體內抑制Plk1的表達，能夠更有效的發揮吉西他濱對胰腺癌的藥性；④闡明抑制Plk1，能夠調和胰腺癌細胞對吉西他濱的耐藥性；⑤闡明在吉西他濱存在的情況下，Plk1磷酸化Orc2能夠促進DNA的複製；⑥闡明Plk1磷酸化Hbo1能夠增加cFos的表達量，從而進一步導致cFos目標物MDR1表達量的增加。