《胃癌中DIXDC1與Wnt/β-catenin通路的關係及其生物學功能的研究》是依託復旦大學，由王磊擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：胃癌中DIXDC1與Wnt/β-catenin通路的關係及其生物學功能的研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王磊
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
DIXDC1是人類Wnt通路的新基因，參與調節神經系統發育、細胞運動，促進大腸癌細胞增殖。但該基因是否通過Wnt通路參與胃癌的發生髮展目前尚不清楚。我們預實驗結果顯示與瀰漫型胃癌相比，DIXDC1在Wnt通路相關的腸型胃癌中高表達，且能上調β-catenin表達，下調其磷酸化水平，因此我們推測DIXDC1通過調節β-catenin激活Wnt通路進而影響胃癌發生髮展。本課題將通過檢測胃癌組織中DIXDC1表達及其與β-catenin的關係，分析其通過Wnt通路影響胃癌發生的可能性；於細胞水平探討DIXDC1對β-catenin磷酸化水平和入核過程的調控及機制，闡明DIXDC1通過Wnt/β-catenin通路對胃癌生物學特性的影響；最後通過動物實驗驗證DIXDC1可通過Wnt通路影響胃癌生物學特性。本研究為深入揭示胃癌的發生機制奠定基礎，為胃癌的診斷及分子靶向治療提供更有針對性的靶點和依據。
結題摘要
DIXDC1是人類Wnt通路的新基因，目前對於該基因的生物學功能的研究較少，為數不多的研究顯示，該基因參與調解神經系統發育、細胞運動、促進大腸癌細胞增殖。但DIXIDC1是否通過Wnt通路參與胃癌的發生髮展目前尚不清楚。本課題根據課題計畫檢測了259例胃癌組織標本中DIXDC1的表達，結果顯示DIXDC1的表達與胃癌最常用的組織學分型-Lauren分型相關，即腸型胃癌中DIXDC1的表達較高。腸型胃癌中DIXDC1的表達與β-catenin細胞核內表達相關。DIXDC1與腸型胃癌的患者年齡(≥60歲, P=0.018)、腫瘤體積(≥5cm, P=0.036)、腫瘤分化(P=0.003)、浸潤深度(P＜0.001)、淋巴結轉移(P＜0.001)和臨床分期(P=0.003)均具有相關性。多因素分析結果顯示，DIXDC1是腸型胃癌的獨立預後因素。為了更好地證明胃癌中DIXDC1與Wnt通路的關係，我們在細胞水平研究了DIXDC1對胃癌生物學特性的影響及其機制。實驗結果顯示，DIXDC1能通過上調MMPs的表達，下調E-Cadherin的表達進而促進胃癌細胞的侵襲遷移能力。因為人體組織水平提示，DIXDC1與β-catenin 的細胞漿及細胞核的堆積相關，因此，我們在細胞水平深入研究該通路。Luciferase實驗證實DIXDC1可以增加TCF/LEF結合位點啟動子轉錄活性，提示DIXDC1基因參與了Wnt/β-catenin/TCF/LEF的調控。通過Western blot和免疫螢光實驗均證實了DIXDC1能促進β-catenin，並深入研究其機制，結果提示，DIXDC1通過影響GSK-3β激酶活性，繼而影響β-catenin的磷酸化，造成胃癌細胞中β-catenin的堆積。當通過siRNA技術干擾β-catenin蛋白的表達，胃癌細胞的侵襲轉移能力則受到了抑制，以上實驗結果說明了，DIXDC1通過影響β-catenin蛋白進而影響胃癌的侵襲轉移能力。本課題首次發現了DIXDC1與腸型胃癌的發生髮展密切相關，能通過影響經典Wnt通路進而影響胃癌的侵襲轉移能力。通過本課題的研究，進一步完善了DIXDC1的生物學功能，明確了胃癌中DIXDC1與經典Wnt通路的關係，為胃癌的分子靶向治療提供了更有針對性的靶點和依據。
