《癌基因SPHK1促進胃癌生長的分子機制及功能研究》是依託中山大學，由李雯擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：癌基因SPHK1促進胃癌生長的分子機制及功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李雯
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
鞘胺醇激酶1(SPHK1)參與多種人類腫瘤的發生和進展，其作用的分子機制尚待闡明。我們前期研究證明SPHK1在胃癌細胞及胃癌組織中表達顯著增高，與胃癌病理分級、分期及患者預後密切相關；我們進一步發現高表達SPHK1可上調Cyclin D1，c-Myc表達，促進胃癌細胞生長，並明顯誘導β-catenin細胞漿/核轉位。本課題將以SPHK1高表達及SPHK1 RNAi腫瘤細胞為模型，通過免疫共沉澱、免疫螢光染色，螢光素酶雙報告基因等方法，探討SPHK1激活Wnt/β-catenin信號通路的分子機制，SPHK1上調β-catenin、促進其核轉位導致下游基因表達從而促進胃癌細胞增殖的可能途徑；在體內體外模型中驗證SPHK1對腫瘤生長的影響，分析SPHK1與多個相關基因在胃癌組織中表達的意義，最終為揭示SPHK1的生物學功能及其在胃癌發生髮展中的作用機制提供科學依據，為胃癌治療提供新的分子靶點。
結題摘要
鞘胺醇激酶 1(SPHK1)參與多種人類腫瘤的發生和進展，其作用的分子機制尚待闡明。研究以SPHK1 高表達及SPHK1 RNAi 穩定表達的腫瘤細胞為模型，探討SPHK1促進胃癌細胞增殖的可能途徑及信號通路的分子機制。結果如下:SPHK1-RNAi穩定表達的胃癌細胞中SPHK1表達顯著下調，SPHK1-RNAi胃癌細胞增殖能力較對照組顯著減弱。SPHK1-RNAi胃癌細胞的磷酸化AKT及磷酸化Rb蛋白表達明顯降低，而P21、P27的蛋白表達水平明顯上調。本研究還發現，SPHK1上調與miR-124表達呈負相關。SPHK1是miR-124的靶基因,miR-124直接與SPHK1的3’-UTR結合下調其表達。體內外實驗證明，與RNA干擾敲除SPHK1基因結果相似, 上調miR-124抑制胃癌細胞增殖和裸鼠皮下腫瘤形成。進一步機制探討表明，miR-124激活FOXO1轉錄因子,抑制AKT信號通路,上調細胞周期蛋白抑制分子P21、P27。本研究為揭示SPHK1 的生物學功能及其在胃癌發生髮展中的作用機制提供了科學依據，為胃癌治療提供新的分子靶點。
