《MiR-124a調控SPHK1及NFκB抑制胃癌轉移的分子機制》是依託中山大學，由李雯擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MiR-124a調控SPHK1及NFκB抑制胃癌轉移的分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李雯
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
我們前期研究發現miR-124a在胃癌組織中表達下降，與胃癌分期負相關。過表達癌基因鞘胺醇激酶1(SPHK1)促進胃癌細胞侵襲和轉移，而過表達miR-124a可下調SPHK1表達，腫瘤細胞侵襲能力也下降；進一步研究發現過表達miR-124a還下調Snail表達，抑制NFκB轉錄活性及上皮細胞間質轉化(EMT),但機制尚待闡明。本項目將以高表達或沉默miR-124a的細胞為模型，通過microRNA晶片、定量RT-PCR、原位雜交及螢光素酶報告基因分析等方法,探討miR-124a下調SPHK1，降低NFκB轉錄活性及下調Snail的信號通路，並通過體外三維細胞培養、定量活細胞遷移及在體胃癌動物模型確定miR-124a阻斷EMT、抑制腫瘤細胞轉移和浸潤的功能，為探討miR-124a調節SPHK1表達的分子機理以及通過NFκB信號通路抑制EMT的假設提供證據,並為胃癌治療提供新的途徑。
結題摘要
microRNAs具有轉錄後調控基因表達的功能，某些microRNAs可作為癌基因或抑癌基因，可作為腫瘤預後和診斷分子標記物，近年來成為腫瘤研究領域的熱點。 鞘胺醇激酶 1(SPHK1)參與多種人類腫瘤的發生和進展，其作用的分子機制尚待闡明。我們先前的研究發現，SPHK1上調與miR-124表達呈負相關。本項研究證明了SPHK1是miR-124的靶基因,miR-124直接與SPHK1的3’-UTR結合下調其表達。體內外實驗證明，與RNA干擾敲除SPHK1基因結果相似, 上調miR-124抑制胃癌細胞增殖和裸鼠皮下腫瘤形成。進一步機制探討表明，miR-124激活FOXO1轉錄因子,抑制AKT信號通路,上調細胞周期蛋白抑制分子P21、P27。研究結果為揭示SPHK1 的生物學功能及其在胃癌發生髮展中的作用機制提供了科學依據，為胃癌治療提供新的分子靶點。miR-124 抑制SPHK1參與胃癌的發生和進展的研究已經發表在2012年JP。 我們根據腫瘤相關microRNA 表達晶片公共資料庫，發現胃癌患者腫瘤組織中miR-362表達上調。在本項目的資助下，我們發現 miR-362過表達激活炎症相關的NF-κB 通路，促進細胞增殖和化療藥物抵抗，進一步研究發現MiR-362 是通過與3‘-UTR結合的轉錄後調控機制下調抑癌基因CYLD 的表達從而使NF-κB通路活化。這部分研究內容已經發表在JTM(2013)。 miR-139可能作為抑癌基因在多種腫瘤中下調，我們發現磷酸二脂酶家族成員PDE4D是miR-139新的靶基因。文獻報導PDE4D可作為癌基因。本項目的部分資助下，研究初步研究發現胃癌組織中MiR-139與癌基因PDE4D表達負相關，進一步的機制研究實驗在進行中。 在本項目的資助下，我們關於MIF和CyclinD1的關係及在HCC發生髮展中的重要作用的研究進一步研究，論文發表在Oncotarget（2014）。關於EGFR表達和腫瘤幹細胞標誌分子CD44/CD24 與乳腺浸潤性導管癌預後的關係研究發表於Med Oncol.( 2015).
