《組蛋白乙醯化修飾在ITP發病中的作用及機制研究》是依託天津醫科大學，由趙海豐擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：組蛋白乙醯化修飾在ITP發病中的作用及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：趙海豐
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
免疫性血小板減少症（ITP）是一種器官特異性的自身免疫性疾病，至今發病機制尚未闡明。前期研究發現：ITP患者外周血CD4+T細胞整體組蛋白H3/H4處於低乙醯化狀態和脾臟調節性T細胞（Treg）Foxp3啟動子區域組蛋白H3呈低乙醯化水平，表明組蛋白乙醯化修飾的異常參與了ITP的發病，為後期研究提供重要思路。首先，篩選和鎖定導致ITP整體組蛋白處於低乙醯化狀態的關鍵基因和乙醯化修飾酶（HATs和HDACs）；其次，研究Foxp3乙醯化修飾變化的分子機制以揭示ITP患者 Treg細胞數量降低和功能缺陷的原因；最後，從調節Th1/Th2和Th17/Treg平衡的角度探討組蛋白去乙醯化抑制劑（SAHA/TSA）治療ITP的作用及機制。本課題將從組蛋白乙醯化修飾的全新角度，闡明表觀遺傳學在ITP發病機制中的作用，為探索新的可能有效治療ITP的藥物SAHA/TSA提供重要的理論依據。
結題摘要
免疫性血小板減少症（ITP）是一種器官特異性的自身免疫性疾病，至今發病機制尚未闡明。本項目進一步證實ITP患者整體組蛋白H3/H4的乙醯化水平均顯著降低，ITP患者脾臟Treg細胞Foxp3啟動子區域組蛋白H3乙醯化水平，結果顯示：與對照組比較，ITP患者Foxp3啟動子區域(-504/-416)組蛋白H3乙醯化水平顯著降低，表明組蛋白乙醯化修飾的異常在ITP發病中起重要的作用。ITP患者中HDAC9表達高於健康對照（p＜0.05），SIRT1、p300、TIP60在ITP患者及健康對照者中表達無顯著差異。HDAC的活性在ITP患者Treg細胞中高於健康對照（p＜0.01），Foxp3基因在TSA處理的Treg細胞中表達高於DMSO處理組（p＜0.01）；CHIP 技術檢測ITP患者Treg細胞Foxp3啟動子區域組蛋白H3乙醯化水平，結果顯示：與DMSO組比較比較，TSA組Foxp3啟動子區域(-504/-416)組蛋白H3乙醯化水平顯著升高（p＜0.05）。Treg抑制實驗表明 Treg細胞在ITP患者中抑制功能受損（p＜0.01），TSA處理組Treg細胞抑制功能增強（p＜0.01）。ITP患者外周血CD4+ T細胞整體組蛋白H3K9和H3K4甲基化水平進行初步研究，結果發現：活動性ITP患者CD4+ T細胞整體組蛋白H3K9處於低甲基化狀態，表明組蛋白甲基化修飾的異常參與了ITP的發病。EZH2作為重要的表觀遺傳修飾物，主要對組蛋白H3K27進行甲基化，從而沉默下游基因。近年來的研究表明EZH2和Th細胞分化密切相關，推測EZH2同樣在ITP發病中發揮重要的作用。通過免疫印跡法檢測ITP患者CD4+T細胞EZH2表達，發現：與正常對照比較，ITP患者的EZH2明顯高表達，表明EZH2參與了ITP的發病。ITP患者CD4+T細胞定向造血幹細胞激酶1 (Hematopoietic progenitor kinase 1，HPK1)啟動子區H3K27me3水平顯著高於正常對照, 並通過染色質免疫沉澱(CHIP) 結合實時定量PCR進一步證實。本課題目前主要從組蛋白乙醯化和組蛋白甲基化的表觀遺傳學角度，對ITP發病機制從新的角度進行闡述，其結果可以作為下一個課題的前期工作基礎，開展對ITP發病機制的深入研究。
