物大分子的液相色譜分離和製備

《物大分子的液相色譜分離和製備》是1999年3月科學出版社出版日期1999年03月出版的圖書，作者是師治賢王俊德。共362頁。

基本介紹

• 書名：物大分子的液相色譜分離和製備
• 作者： 師治賢 王俊德
• ISBN： 7-03-005034-7/O.834
• 出版時間：1999年03月

基本信息

大分子的液相色譜分離和製備 第二版

作者： 師治賢 王俊德 定價： ¥ 25.00 元

出版社： 科學出版社 出版日期： 1999年03月

ISBN： 7-03-005034-7/O.834 開本： 32 開

類別： 分析化學及儀器,生物化學化工,醫藥農化 頁數： 362 頁

圖書簡介

本書較為系統而詳細地論述了生物大分子的液相色譜分離和製備。內容包括液相色譜的基本原理和參數，頂替色譜、離子交換色譜、體積排阻色譜、反相色譜、疏水作用色譜、親合色譜、中低壓製備色譜、灌注色譜、蛋白質製備色譜的分離和設計，糖蛋白的分離和純化及其典型套用。本書既包括了近年來生物大分子的液相色譜分離和製備的發展，也包括了作者在這一領域內的研究成果。

圖書目錄

第二版前言

第一版前言

第一章緒論

1.1生物大分子液相色譜分離和製備的發展動向

1.2分離介質的發展

1.3分離模式的考慮

1.3.1體積排阻色譜

1.3.2離子交換色譜

1.3.3反相色譜

1.3.4疏水作用色譜

1.3.5親合色譜

1.4分離規模的擴大

第二章液相色譜的基本原理和參數

2.1保留值

2.1.1保留時間(tR)和保留體積(VR)

2.1.2調整保留時間(t′R)和調整保留體積(V′R)

2.1.3容量因子(k′)

2.1.4死時間(t°R)的測定

2.1.5選擇性(α′)和相對保留值(α)

2.2柱效率

2.2.1塔板理論的提出

2.2.2塔板數和塔板高度的計算

2.3分離效能總指標K1和分離度R

2.3.1定義

2.3.2K1(或R)與α′(或α)和N之間的關係

2.4譜帶擴張

2.4.1柱內譜帶擴張

2.4.2柱外譜帶擴張

2.5滲透性

第三章高效液相製備色譜的分離選擇

3.1製備色譜分離的一般考慮

3.1.1製備色譜運行的模式

3.1.2切割收集技術

3.1.3微量組分的製備

3.1.4實驗條件的一般選擇

3.2製備色譜模型的討論

3.3實驗條件的選擇與產量

3.3.1柱體積與填料

3.3.2流動相

3.3.3樣品的溶解度

3.3.4樣品量

3.3.5樣品純度的確定

3.3.6最佳製備量

3.4製備色譜儀

3.4.1泵系統

3.4.2檢測系統

3.4.3進樣系統

3.4.4樣品的收集

3.4.5循環系統

3.5中低壓液相製備色譜

3.5.1低壓液相色譜

3.5.2中壓液相色譜

第四章製備柱及相關技術

4.1製備規模

4.1.1在分析柱上的製備

4.1.2小規模的製備

4.1.3大規模的製備

4.2色譜柱和裝填技術

4.2.1色譜柱

4.2.2色譜柱的裝填技術

4.3徑向流動色譜

4.3.1徑向流動色譜設計的原理

4.3.2徑向流動和軸向流動的比較

4.4灌注色譜

4.4.1灌注色譜概念的提出

4.4.2灌注色譜的基本特徵

4.5柱容量及其影響因素

4.6蛋白質定量與純度標準

4.6.1蛋白質定量

4.6.2蛋白質純度標準

第五章頂替色譜

5.1頂替色譜的原理

5.2頂替色譜的特性

5.2.1操作線

5.2.2溶質的流速

5.2.3總效率

5.3頂替色譜實驗條件

5.3.1頂替劑及其選擇

5.3.2流動相的選擇及影響

5.3.3填料及其影響

5.3.4柱直徑及其影響

5.4溶質?溶質頂替色譜

5.4.1實驗設計

5.4.2操作參數

5.4.3多次頂替

第六章體積排阻色譜

6.1體積排阻色譜理論

6.1.1保留模型

6.1.2保留機理

6.2體積排阻色譜理論模型

6.2.1硬球體溶質模型

6.2.2剛性分子溶質模型

6.2.3任意平面孔模型?剛性溶質

6.2.4任意彎曲溶質模型

6.3體積排阻色譜填料

6.3.1有機填料

6.3.2無機填料

6.3.3適合生物大分子分離的填料

6.4體積排阻色譜參數的討論

6.4.1峰容量

6.4.2聚合物在何積排阻色譜上的分離

6.4.3分子量的準確測定

6.5體積排阻色譜操作條件

6.5.1填料

6.5.2柱長

6.5.3洗脫液

6.5.4流速

6.5.5樣品容量

6.5.6蛋白質在變性洗脫條件下的分離

6.6蛋白質在體積排阻色譜上的保留行為

6.6.1蛋白質的分離

6.6.2蛋白質的分子量與容量因子(k′)

6.6.3分配係數(Kd)

6.6.4pH不同時的分配系統與離子強度

6.6.5在一定pH條件下蛋白質的分離度和離子強度

6.6.6離子強度恆定時pH對分配系統的影響

第七章離子交換色譜

7.1填料

7.1.1有機樹脂填料

7.1.2無機?有機複合填料

7.1.3表面改性的無機填料及合成方法

7.2參數討論

7.2.1孔徑的影響

7.2.2柱長的影響

7.2.3流速的影響

7.2.4pH的影響

7.2.5離子強度的影響

7.3保留模型

7.4離子交換色譜分離和純化蛋白質

7.4.1大豆中混合蛋白質的分離和純化

7.4.2細胞色素C553的分離和純化

7.4.3β?半乳糖苷酶和磷酸酶的分離和純化

7.4.4卵清蛋白(OVA)和大豆蛋白(STI)混合物的純化

7.4.5TGF?α?β半乳糖苷酶的分離

7.4.6腫瘤壞死因子(TNF)的分離

第八章反相液相色譜

8.1溶質保留機理與收斂性

8.1.1保留機理

8.1.2保留值收斂性

8.2填料及一般合成方法

8.2.1填料概述

8.2.2填料合成的一般方法

8.3分離和製備色譜的選擇

8.3.1柱容量與分離度

8.3.2色譜柱的柱效率與蛋白質的分離度

8.3.3流動相的選擇

8.3.4柱溫的影響

8.3.5流速的影響

8.4蛋白質在柱上的回收主

8.4.1上柱量與回收率的關係

8.4.2洗脫系統與回收率的關係

第九章離效疏水作用色譜

9.1離效流水作用色譜的原理

9.2高效疏水作用色譜填料

9.2.1基質

9.2.2配基

9.3實驗條件

9.3.1鹽的影響

9.3.2離子強度的影響

9.3.3pH值的影響

9.3.4柱溫的影響

9.4疏水作用色譜與反相色譜的區別

第十章親合色譜

10.1親合色譜的概念及其理論模型

10.1.1概念

10.1.2解離常數和分配係數

10.2親合色譜的基質及控制因素

10.2.1理想基質的性質

10.2.2基質的控制因素

10.2.3具有實用價值的基質

10.3親合色譜填料的合成

10.3.1配位體的選擇

10.3.2基質的活化和功能化

10.3.3間隔臂分子

10.3.4間隔分子與配位體偶聯

10.4親合色譜的洗脫

10.4.1平衡和平衡緩衝液

10.4.2蛋白質的濃度和溫度效應

10.4.3流速和樣品體積

10.4.4洗脫方法

10.5蛋白質及其它生物大分子的分離和純化

10.5.1純化調節細胞功能的大分子和複雜的生物結構

10.5.2親合色譜在分析化學中的套用

第十一章蛋白質的製備色譜設計

11.1蛋白質分析色譜和蛋白質製備色譜

11.2吸附?解附的理論

11.2.1疏水作用色譜中的吸附/解附

11.2.2親合色譜中的吸附/解附

11.3製備規模的擴大

11.3.1樣品的來源

11.3.2循環系統

11.3.3色譜柱超載

11.3.4柱體積的增大

11.3.5蛋白質的產量與產率

11.4混合蛋白質在反相色譜上的製備

11.4.1實驗方法運行設計

11.4.2實驗條件

第十二章高效液相色譜的套用

12.1核苷和核苷酸的分離

12.1.1pH對保留行為的影響

12.1.2流速對核苷分離的影響

12.1.3甲醇含量的變化對容量因子k′的影響

12.1.4核苷和核苷酸的分離

12.2糖蛋白的分離和純化

12.2.1基因重組人體白細胞IL?2的分離和純化

12.2.2立體排阻色譜純化膜糖蛋白抗原

12.2.3親合色譜分離純化多糖人體免疫球蛋白的亞類

12.2.4基因重組人體白細胞干擾素的反相色譜分離和純化

12.3灌注快速蛋白質色譜

12.3.1灌注反相色譜分離血管擴張素異構體

12.3.2灌注離子交換色譜快速分離蛋白質

12.3.3灌註疏水作用色譜快速分離免疫球蛋白

12.3.4灌注免疫生物金屬絡合物親合色譜

12.3.5灌注生物特異性的親合色譜

12.4單克隆抗體的分離和純化

12.4.1分析分離系統

12.4.2分離純化系統

12.4.3腹水和組織培養中單克隆抗體的分離和純化

12.5人體血清中脫脂蛋白質的分離和純化

12.5.1樣品的製備

12.5.2色譜分離純化系統

12.6α?澱粉酶的分離和純經

12.6.1親合色譜分離純化α?澱粉酶

12.6.2疏水作用色譜分離純化α?澱粉酶

12.6.3離子交換色譜快速純化α?澱粉酶

第十三章生物樣品的製備

13.1材料選擇及預處理

13.2細胞的破碎

13.2.1物理化

13.2.2生物化學法

13.2.3化學處理法

13.3提取

13.3.1蛋白質和酶的提取

13.3.2核酸的提取

13.4蛋白質和酶的初步提純

13.4.1核酸沉澱法

13.4.2蛋白質沉澱法

13.4.3改變pH值

13.4.4選擇變性法

13.4.5鹽析法

13.5核酸的水解

13.6生物多糖的分離提取

附錄一國外常用的適於生物大分子分離分析的高效液相色譜填料

表1高效體積排阻色譜(SEC)填料

表2反相色譜(RPC)填料(大孔)

表3疏水作用色譜(HIC)填料

表4離子交換色譜(IEC)填料

表5親合色譜(AFC)填料

1.親合色譜常用的底物(基體)

2.一些代表性的親合色譜填料舉例

附錄二典型蛋白質性質

表1一些蛋白質的分子量

表2幾種蛋白質的等電點

表3不同類型的蛋白質的溶解度