大豆多肽

大豆多肽即"肽基大豆蛋白水解物"的簡稱,是大豆蛋白質經蛋白酶作用,再經特殊處理而得到的蛋白質水解產物.大豆多肽的必需胺基酸組成與大豆蛋白質完全一樣,含量豐富而平衡,且多肽化合物易被人體消化吸收,並具有防病,治病,調節人體生理機能的作用,大豆多肽是極具潛力的一種功能性食品基料,已逐漸成為21世紀的健康食品. 大豆多肽的研製成功，是2004年，我國科學研究領域的重大事件，中國保健協會將其列為“2004年中國保健業50件大事”之一。

大豆多肽即"肽基大豆蛋白水解物"的簡稱,是大豆蛋白質經蛋白酶作用,再經特殊處理而得到的蛋白質水解產物.大豆多肽的必需胺基酸組成與大豆蛋白質完全一樣,含量豐富而平衡,且多肽化合物易被人體消化吸收,並具有防病,治病,調節人體生理機能的作用,大豆多肽是極具潛力的一種功能性食品基料,已逐漸成為21世紀的健康食品。

基本介紹

• 中文名：大豆多肽
• 亦稱：肽基大豆蛋白水解物
• 消化吸收能力：強
• 作用：有效的降低高血脂
• 評價：21世界健康產業的一項偉大發現
• 優點：降低血中總膽固醇和膽固醇的含量

理化性質

據資料報導, 小分子大豆多肽不僅具有很好的溶解性、低黏度、抗凝膠形成性, 而且在體內消化吸收快,蛋白質利用率高; 大豆肽具有低抗原性, 不會產生過敏反映; 能促進發酵產生有益分泌物; 能增強運動員體能和肌肉, 促進肌紅細胞復原、幫助恢復疲勞; 另外大豆肽具有生理活性。

組成

大豆多肽是平均肽鏈長度為2~ 10 的短肽( 以2~3 的低分子肽為主) , 還含有少量的游離胺基酸、糖類和無機鹽成分 , 相對分子質量以低於1 000的為主體, 主要溶出峰位置在相對分子質量300~ 700 範圍內。大豆肽的相對分子質量大小、肽鏈長短以及各種理化性質由所選用的酶類、水解條件和分離方法而定。大豆肽的蛋白質含量為85 %左右, 其胺基酸組成幾乎完全與大豆蛋白質相同, 通常是由3~ 6 個胺基酸組成,必需胺基酸的平衡良好且含量豐富。

溶解性

大豆多肽在不同pH、溫度、離子強度、氮濃度條件下都是可溶的。其比未經水解的大豆分離蛋白溶解度有極大的提高, 超過90 %, 這主要是因為酶解引起蛋白質相對分子質量的減少, 端基極性基團增加使溶解度增加。尤其在pH 4. 2 等電點處水解液中溶解度的測定表明大豆多肽不僅提高了一般pH 下蛋白質的溶解度, 更重要的是大大改善了在等電點時蛋白溶解度。

黏度

大豆蛋白質黏度隨濃度的增加而顯著增加, 在等電點pH 4. 3 左右幾乎完全沉澱。而大豆肽蛋白由於其相對分子質量較低, 黏度隨濃度增高時變化不大, 並且隨pH 變化, 即在酸性或中性條件下大豆多肽蛋白的流動性無極大差異, 不易凝固。選用毛細管黏度計不能測定大豆分離蛋白黏度, 故而大豆分離蛋白黏度明顯要高於大豆多肽蛋白, 黏度並不因pH 變化而急劇變化。

吸水性

大豆多肽的吸水性明顯高於大豆分離蛋白的吸水性。這主要是蛋白質被水解後, 大量親水基團外露的緣故。從pH 對大豆蛋白和大豆多肽吸水性的影響看,大豆分離蛋白吸水性隨pH 增大而增大, 這是因為pH的改變影響到蛋白質分子的淨電荷數, 從而改變了蛋白質- 蛋白質和蛋白質- 水的相互作用力, 導致吸水性的改變。而pH 變化所導致的淨電荷變化不足以改變大豆肽分子與水的作用力, 因此大豆多肽的吸水性受pH 改變的影響不大。大豆分離蛋白吸水性隨溫度升高而下降, 這可能是溫度升高后, 氫鍵減少而導致吸水性下降, 也可能由於蛋白質發生變性或聚集作用引起吸水性下降。然而大豆多肽在30~ 90 􀀂 範圍內卻隨溫度升高而增大, 而且2 種肽在不同的溫度和pH 的吸水性基本相同。

分離提純方法

凝膠過濾色譜

利用凝膠網狀結構， 根據分子大小和形狀差異進行分離的一種方法。當樣品進入凝膠柱後，較大分子不能通過孔道進入凝膠柱體內， 而與流動相一起流出層析柱，而小分子則滲入凝膠內。它具有分離條件溫和，產品收率高，生物活性好，分離面寬等優點，廣泛用於大豆多肽物質的分離純化中。採用凝膠過濾色譜法分離分子量<1 200 Da 的小肽。鄒存媛等用SepHadexG15 進行分離收集分子量<1 200 Da 的肽段，根據最後蛋白含量數據，SepHadexG15 分離得到的小肽居多，分離效果較好。通過柱層析分離出的分子量<1 200 Da 的大豆肽可以進一步採用高效液相製備色譜分離以獲得更高純度的大豆肽產品。

HPLC

高效液相色譜法已廣泛用來分離、分析和製備大豆肽等生物樣品， 尤其是反向高效液相色譜法已成為許多研究肽類的實驗室的主要分離手段。反相高效液相色譜利用非極性的反相介質為固定相，極性有機溶劑-甲醇、乙腈等或水溶液作流動相，根據流動相中被分離溶質極性-疏水性的差別發生強弱不同作用，使其在兩相中分配不同，進行分離純化的色譜洗脫法。疏水性較弱的大豆多肽分子和固定相間的相互作用較弱，因此較快流出；反之，疏水性相對較強的大豆多肽分子較後流出。由於使用揮發性沖洗劑(三氟乙酸-乙腈)作為流動相，純化產品不必脫鹽， 所以大大簡化了操作步驟， 尤其對1 000Da 以下小分子大豆肽類物質分離純化更為重要。盧鶴等採用反向高效液相色譜(RP-HPLC)，建立了大豆肽的RP-HPLC 的分離方法。具體實驗條件為：流動相從水TFA=100∶011；乙腈∶TFA=100∶011；梯度方式為凸形梯度；時間為80 min；進樣量為5 μL；檢測波長為220 nm；流速為1 mL/min。與其他方法相比，該法分辯率高， 操作簡便， 有著廣泛的套用前景。Chen 等[5]結合離子交換、凝膠過濾和RP-HLPC 用反相色譜梯度洗脫法分離了6 種標準肽。低pH 值流動相、室溫或較高溫度及使用乙腈或異丙醇作為有機部分、添加劑三氟乙酸作為RPHLPC離子對， 是大豆肽較好的分離條件。目前RPLC 分離柱為矽膠基質的鍵合相填料為主體，對鍵合C18、C8烷基和苯基填料的研究， 進一步提高了柱效和選擇性， 因而高分子基質的RP-HLPC 填料的改性是當今研究的熱點。白泉等 利用德國的Nucleosil4000-7C18反相色譜填料，成功地對兩種化學合成多肽32 肽、21 肽進行了分離，並製備純肽各100 g。

毛細管電泳法

毛細管電泳是繼高效液相色譜之後， 將電泳技術和色譜技術相結合的一種新的分離技術。它是以高壓電場為驅動力，以毛細管為分離通道，依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現分離的一類液相分離技術。在高壓作用下，帶電粒子在毛細管內的溶液中遷移， 遷移速度等於電泳和電滲流的矢量和，具有分離率高、快速、用量少等優點，是分離大豆多肽物質的有效工具。隨著電泳技術的發展，以毛細管區帶電泳、膠束電場毛細管電泳、毛細管等速電泳、毛細管凝膠電泳、毛細管等點聚焦等為代表的HPCE 分離模式大大拓展了大豆多肽分離純化的運用範圍，加之與紫外吸收、雷射誘導螢光電化學及質譜等檢測手段相結合， 更加確定了其在多肽研究領域的重要地位。

生理機制

它可以有效的降低高血脂.大家知道冠心病主要的病因學之一是脂蛋白代謝的紊亂——高脂血症，尤其是氧化的ox－ldl(低密度脂蛋白)膽固醇的含量升高。英國前瞻糖尿病研究所報告說，在冠心病主要危險因素影響中，ldl－c降低1mmol/l，能使危險性降低57%；而hdl(高密度脂蛋白)－c升高0．01mmol/l，危險性降低15%。這表明，冠心病防治的主要措施之一是降低血液低密度脂蛋白的膽固醇的含量。大豆蛋白（肽）過多次人和動物實驗以及陳棟樑博士等學者的動物實驗均證實，大豆蛋白（肽）能降低血中總膽固醇和ldl膽固醇的含量。

大豆多肽降脂的生理機制：

1．在動物實驗中，精氨酸的增加可以影響血中膽固醇的濃度，其機制可能是增加了膽汁酸的排泄和減少了膽固醇的吸收。

2．攝入大豆蛋白（肽）時，血液中胰島素和高血糖素比例發生了改變，影響了肝臟膽固醇的合成（胰島素增強肝hhg－coa還原酶的活性，胰高血糖素降低hhg－coa還原酶的活性）

3．影響機體載脂蛋白（apob）的合成和ldl受體活性。huff報告，用大豆蛋白（肽）代替動物蛋白時，極低密度脂蛋白apob轉換率增加。

4．lovati等報導，食入大豆蛋白（肽）單核細胞ldl受體活性比對照組要高8倍，ldl受體又稱apob，e受體，當ldl同受體結合後被細胞膜凹陷繼續內陷而形成被胞膜小囊泡，在ph=5時融合成酸性入胞小體。進入溶酶體的ldl在蛋白酶的作用下，將載脂蛋白apob－100分解成胺基酸，膽固醇脂被醯酶分解成游離的膽固醇及脂酸。細胞從ldl得到游離的膽固醇後，通過降低hhg－coa還原酶的活性，抑制細胞自身膽固醇的合成，從而降低了血中膽固醇的濃度。

5．sctchell提出，由於大豆蛋白中含有少量的雌激素或植物雌激素在一定的環境下，它們表現出類似雌激素作用，可以降低血清中che和ldl－che的濃度。

可見大豆多肽能夠降低血脂，它具有預防肥胖、降低血膽固醇、降血壓作用、低抗原、增加骨密度，預防骨質疏鬆抗氧化作用。

套用

在食品上

與傳統大豆蛋白相比較, 大豆多肽具有易消化吸收、能迅速給肌體提供能量、無蛋白變性、無豆腥味、無殘渣、分子量小、易溶於水、在酸性條件下不產生沉澱、溶液黏度低、受熱不凝固等特性, 可以廣泛套用到食品加工業。

在醫藥行業中

大豆多肽含有降壓肽、降膽固醇肽、抗腫瘤肽、CPPS 等肽段, 所以可以用於醫藥行業中, 生產出相應功效的藥品, 如標本兼治的降壓靈、強力補鈣劑、腫瘤抑制劑等。不過, 在醫藥行業中, 經酶解法或微生物分解法所得到的大豆混合多肽, 必須經過分離提純, 方能在較小劑量的情況下達到理想功效, 雖然提高了加工成本, 但藥品的附加值也將大幅度提高。

在畜牧業生產

大豆多肽包含一些寡肽, 這些寡肽在動物胃腸道中不水解, 不受抗營養因子( 如植酸) 的干擾而直接被吸收, 且比單個胺基酸的吸收速度快。這些寡肽能刺激瘤胃內纖維分解菌的生長及在動物體內發揮激素功能, 故以寡肽作為飼料添加劑正引起人們的興趣。

肽在仔豬生產

早期斷奶仔豬消化系統和免疫系統都未發育成熟, 應選擇胺基酸平衡性好、消化率高、低抗原的優質蛋白質源。大豆是一種優質的蛋白質源, 但因大豆抗原蛋白會引起斷奶仔豬的過敏反映, 而使大豆在早期斷奶仔豬中的套用受到限制。與其他的大豆蛋白產品相比, 大豆多肽因為具有易消化吸收性、低抗原性以及促進發酵作用而在斷奶仔豬的套用中具有很大的優越性。飼餵大豆多肽可預防早期斷奶仔豬的腹瀉, 還可以在仔豬發生腹瀉後, 減輕腹瀉症狀和改善營養不良狀態, 並可減少對早期斷奶仔豬的應激, 保證多種胺基酸的攝取, 促進生長發育。同時, 大豆多肽對雙歧桿菌的增殖作用, 對斷奶仔豬也非常有益, 其可通過維持腸內菌群平衡, 提高仔豬免疫力, 抑制腸腐敗菌, 減少幼齡仔豬的斷奶應激。綜上所述, 大豆多肽作為斷奶仔豬日糧中蛋白質源具有良好的套用前景。