牙冠發育相關miRNAs調控關鍵基因的機制研究

《牙冠發育相關miRNAs調控關鍵基因的機制研究》是依託四川大學，由周學東擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：牙冠發育相關miRNAs調控關鍵基因的機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：周學東
• 依託單位：四川大學

項目摘要

miRNA在胚胎髮育領域的研究對闡明細胞增殖、分化和凋亡等生物學過程和機理具有重要意義。為研究牙冠發育過程中miRNA在上皮及間充質中的時空表達及調控發育關鍵基因的機制，擬藉助生物信息學分析，分別克隆小鼠牙胚發育不同階段牙胚上皮及間充質組織miRNA序列，發現未知的組織特異表達miRNA，利用miRNA晶片技術及聚類分析方法，經qRT-PCR的驗證，建立各個發育時期、組織特異的牙胚發育miRNA的表達譜。運用TargetScan 等軟體預測特異miRNA 靶基因，通過小鼠體內miRNA基因活性抑制及腺病毒載體轉染體外培養的細胞過表達特異miRNA基因兩種方法，研究其調控靶基因的機制，通過評價兩種方案的靈敏度與可信度，以期建立客觀驗證牙胚發育過程中特異miRNA靶基因的方法。本研究結果將豐富牙胚發育過程中信號調控機制，從信號通路調控層面認識牙齒髮育生物進程，完善牙齒髮育生物學理論。

結題摘要

牙冠發育過程有賴於牙源性上皮與神經嵴來源的間充質成分之間時空性互動性的誘導作用。這種互動信號誘導貫穿於牙冠發育始終，並通過多種信號通路進行調控。發育相關主要信號通路的微調可能對牙發育過程起到重要的影響。microRNAs作為信號通路微調中的重要調控因子，近年來受到了廣泛關注。然而，microRNAs對發育相關信號通路的調控作用機制尚無深入研究。本課題通過研究牙冠發育過程中miRNA在上皮及間充質中的時空表達，利用miRNA晶片技術，藉助生物信息學分析，經qRT-PCR的驗證，建立了發育早晚期，尤其是細胞分化階段組織特異的牙胚發育miRNA的表達譜。運用TargetScan 等軟體預測特異miRNA 靶基因，構建了牙冠發育過程中microRNAs及靶基因表達譜，並深入研究了差異性表達microRNA與發育相關信號通路的調控及反饋機制，並對牙釉質礦化過程中microRNA的表達及其對釉質基質礦化的調控進行了一定研究。本研究結果豐富了牙胚發育過程中信號調控機制，完善牙齒髮育生物學理論，並對今後基於microRNAs干預的牙再生研究提供了理論基礎。