《miR-34a調控人牙髓幹細胞牙向分化的機制研究》是依託四川大學，由高波擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-34a調控人牙髓幹細胞牙向分化的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：高波
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
牙髓幹細胞是牙髓組織中具有自我更新能力和多向分化潛能的幹細胞，被認為是理想的牙髓修復再生的種子細胞，講乘但是目前對其牙向分化的機制研究尚未完全清楚。近年來研究發現miRNAs是一類具有基因轉錄後水平調控作用的非編碼小分子RNA，在間充質幹細胞分化過程中起到了重要的作用。本課敬記仔題組前期研究中發現miR-34a在牙胚發育過程中特異性表達上調，提示其對牙向分化具有促進作用。本研究以此為基礎，擬用腺相關病毒過表達或抑制牙髓幹細胞內miR-34a表達水平，利用高通量qPCR array晶片及生物信息學篩選所涉及的牙向分化信號分子和關鍵的信號通路，並結合雙螢光素酶報告基因系統以及qPCR和Western bloting進行驗證；通過裸鼠腎囊膜下移植實驗觀察miR-34a對牙髓幹細胞牙向分化的作用，進一步探索miR-34a在牙髓幹細胞牙向分化中的分子調控機制，為實現組織工程牙髓再生目的罪地葛記提供基礎。
結題摘要
牙髓幹細胞是牙髓組織中具有自我更新能力和多向分化潛能的幹細胞，被認為是理想的牙髓修復再生的種子細胞，但是目前對其牙向分化的機制研究尚未完全清楚。近年來研究發現miRNAs是一類具有基因轉錄後水平調控作用的非編碼小分子RNA，在間充質幹細胞分化過程中起到了重要的作用。明確牙向分化的分子調控機制，有助於實現組織工程牙髓再生，為現有的口腔臨床治療提供新思路。 本課題在前期研究的基礎上，進一步建立紙祖辨笑穩定的轉染體系，對牙髓幹細胞內的miR-34a的表達進行調控。研究表明通過慢病毒轉染，miR-34a表達上調3.7倍，miR-34a敲低效率接近50%。進一步研究發現miR-34a的靶基因BMP7在成牙過程中，上皮和間充質細胞的相互作用中起到了關鍵性作用，在牙髓端市局細胞內高表達BMP7和EREG可以促進其誘導上皮分化成釉向的能力。因此，我們推斷miR-34a-BMP7-Dspp軸在成牙向分化中具有重要的作用。 同時，通過晶片發現miR-132在牙髓根尖周疾病骨破壞的過程中特精葛敬異性表達，並通過qPCR驗證，發現miR-132在破骨細胞中具有特異性表達，為下一步研究奠定基礎。 本研究表明，miR-34a在牙髓幹細胞分化中具有重要調控作用，明確其機制煮歡槓有助於實現組織工程牙髓再生，探索新的臨床治療方式。
