基本內容
培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。
在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做
細胞活力,由組織中分離細胞一般也要檢查活力,以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用。復甦後的細胞也要檢查活力,了解凍存和復甦的效果。
用台盼蘭染細胞,死細胞著色,活細胞不著色,從而可以區分死細胞與活細胞。利用細胞內某些酶與特定的試劑發生顯色反應,也可測定細胞相對數和相對活力
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活細胞計數法
常用的有
平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然後將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測污染活菌
數的方法,也是目前國際上許多國家所採用的方法。使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入0.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用於形成菌落的微生物。
廣泛套用於水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是最常用的
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創傷性急性腎功能衰竭(TARF)早期尿中脫落的腎小管上皮活細胞作為預警診斷指標的套用價值.方法休克加高滲甘油注射法所致紐西蘭大白兔TARF發生過程中,用台盼藍拒染法對尿中腎小管上皮活細胞進行檢測,分析其與腎功能變化的關係.結果TARF發生過程中,尿中排出腎小管上皮活細胞數量增加達0.4×106/h,其出現較血清尿素氮(BUN)升高早3小時,較血清肌酐(Cr)升高早2小時.結論尿中腎小管上皮活細胞在TARF發生過程的早期明顯升高,可作為
TARF早期預警診斷指標.
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Cytorecon在整個測定中無需專門的緩衝液稀釋和流路清洗步驟,使得研究進程大為加快,而且成本明顯降低,也避免了儀器的日常維護帶來的煩惱。通過特別研製的20孔便攜樣品盤,儀器可連續對20個樣品進行拍攝和計數。對於每個樣品,儀器最多支持拍攝6個視野,並自動計算細胞總數和細胞濃度。樣品盤的每個孔均為可重複多次使用,避免了傳統細胞計數儀的進樣模式需要用昂貴的試劑進行管路清洗,實際分析成本大大降低。樣品盤易於長時間保存,在樣品較少時可以分多次使用,最大程度提高分析的
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