殺菌率檢測

產品介紹

做殺菌率檢測，首先要備齊以下物品

1.儀器設備

1.2壓力滅菌鍋

1.3低溫培養箱

1.4試管20×20mm（做鹽水管用）

2.試劑和溶液

2.1氯化鈉（GB1266）

2.2牛肉膏（生物試劑）

2.3蛋白腖（生物試劑）

2.4瓊脂（市售）

2.5生理鹽水（市售）

2.6氫氧化鈉（GB629）

然後就跟著步驟一步一步來吧

3.1培養基的製備稱取5.0g氯化鈉,3.0g牛肉膏,10.0g蛋白腖,15.0g瓊脂置於燒杯中,加入1000ml水,加熱溶解後用氫氧化鈉溶液調PH值至7.2～7.4,趁熱用6～8層紗布過濾，然後分裝於四個250ml錐形瓶中,放入壓力滅菌鍋內,在0.1～0.14Mpa蒸汽壓力下滅菌30min。

3.2玻璃儀器滅菌將實驗用的培養皿、鹽水管、移液管、錐形瓶及量筒等均用紙包好，在0.1～0.14Mpa蒸汽壓力下滅菌30min，取出後放入烘箱烤乾備用。

3.3試樣的製備以工業現場循環水水樣為試樣，要求是未加殺菌劑的循環水。取1000ml循環水水樣，加入100ppmTM－809充分搖勻，備用。

3.4菌種的製備

取未加殺菌劑的循環水水樣,接入到5～10ml不含瓊脂已滅過菌的液體培養基內,在28～32℃培養48～72h,再放入冰櫃(4℃)內,作為菌種保存備用。在試驗的前一天需要再接種培養24h,作為配製菌懸液用。

3.5測定（平板計數法）測定的整個過程都需要在無菌室或超淨工作檯內進行。

3.5.1懸菌液的配製首先取預先放置兩天的自來水300ml～500ml於1000ml的圓底燒瓶內，再吸取上述培養24h的菌懸液0.3～0.5ml加到圓底燒瓶內,搖勻後放入30℃的培養箱內30min。

3.5.2先將被測試樣在分析天平上準確稱取一定的毫克數，用蒸餾水稀釋成1～5ml，然後各取99ml菌懸液分裝於三個250ml錐形瓶內，其中兩個各加入1ml被測試樣，一個做空白，搖勻後放入28～30℃的培養箱內，放置4h，等接種稀釋用。

3.5.3取上述培養4h的空白對照樣1ml，加到9ml無菌生理鹽水中，按十進位稀釋梯度逐級稀釋（如從10-1～10-4），直至需要的稀釋度為止。分別取最後兩個稀釋梯度的稀釋液1ml分別接到無菌培養皿內，每個稀釋度做三個平行皿，被測試樣的操作相同，最後兩個稀釋度可以比空白樣少1～2次方。

3.5.4將滅菌後的培養基冷至45～50℃倒入培養皿內，每皿應灌15～20ml，搖勻，冷卻凝固後倒置於28～30℃培養箱內培養48～72h。

3.6分析結果的表述：

3.6.1用平板統計法得出每毫升樣中的總菌數

3.6.2各選擇一組每皿菌落數在30～300個範圍內進行計數，計算出三個皿的平均菌落數再乘以稀釋倍數。