《心肌高表達mi-99a改善心肌梗死後心室重構及其機制研究》是依託南京大學，由顧蓉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：心肌高表達mi-99a改善心肌梗死後心室重構及其機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：顧蓉
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
心肌梗死是危及人民健康的致死性疾病之一,減少病理性心室重構是心肌梗死後治療的關鍵。MEK1-ERK1/2、mTOR在心肌缺氧、肥大刺激時均激活。MEK1-ERK1/2激活利於心肌細胞增厚（thickness），抑制心肌細胞延長，減少左心室擴大，改善心功能；mTOR激活增加心肌梗死後病理性肥厚、心肌炎症，減少自噬，促進心功能惡化。最近在腫瘤細胞中的研究發現MEK1-ERK1/2通過下調mir-99a表達間接引起mTOR蛋白表達增加，提示MEK1-ERK1/2、mTOR之間相互作用，相互平衡。申請者計畫在小鼠心肌梗死模型中通過心肌內直接注射高表達mir-99a的質粒，抑制mTOR而不減少MEK1/2的表達，使心肌梗死後心肌向有利於減少病理性重構方向發展。研究結果將為臨床改善心肌梗死預後提供新的理論與方法。
結題摘要
項目背景：MicroRNAs（miRNAs） 在正常細胞功能的維持中有很多重要的作用，其中包括細胞的凋亡和自噬。該實驗的目的是探索microRNA-99a (miR-99a)在心肌梗死後心室重構中的作用及其相關機制。主要研究內容：運用實時螢光定量逆轉錄聚合酶鏈反應Taqman探針的方法，我們檢測了體外培養的乳鼠心室肌細胞在缺氧狀態下miR-99a的表達，發現miR-99a在心肌細胞缺氧時表達水平明顯下降。因此，我們在在體和離體水平促進心肌細胞高表達miR-99a，觀察miR-99a對心肌細胞凋亡和自噬, 心肌梗死後心臟結構和功能的影響。發現在體外培養的乳鼠心室肌細胞中高表達miR-99a能夠減少心肌細胞缺氧時的凋亡發生。成年的雄性C57/BL6小鼠行心肌梗死造模時在心肌內直接注射高表達miR-99a（lenti-99a-GFP）和僅含有陰性對照序列（lenti-GFP）的慢病毒，發現術後4周lenti-99a-GFP組的小鼠左心室功能、生存率等較陰性對照組（僅注射陰性病毒lenti-GFP）明顯改善。進一步研究表明，miR-99a高表達組心肌mTOR蛋白表達降低,心肌細胞的凋亡減少,自噬增加。重要結果：心肌梗死後心肌高表達miR-99a改善心肌梗死動物的生存率和心室重構的進程。這些作用通過減少心肌細胞的凋亡，增加自噬發生等發揮, 由抑制mTOR/P70/S6K信號通路介導。關鍵數據：術後4周lenti-99a-GFP組的小鼠左心室功能、生存率等較陰性對照組（僅注射陰性病毒lenti-GFP）明顯改善。科學意義：本研究提示在心臟中高表達miR-99a可能成為缺血性心臟病的新的治療手段。
