《DBC-1上調TNF-α信號促進心梗/再灌後心室重構的作用和機制》是依託同濟大學，由范慧敏擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：DBC-1上調TNF-α信號促進心梗/再灌後心室重構的作用和機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：范慧敏
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
心力衰竭是心肌梗死後患者主要致死原因。最新研究表明，心梗後即使血流動力學正常，心肌細胞凋亡仍持續發生並與心室重構嚴重程度密切相關，而TNF-α信號激活和上調是凋亡關鍵。本團隊研究發現，乳腺癌缺失基因-1（DBC-1）通過增強TNF-α信號，激活下游p38-casepase8通路促進凋亡,因此推測DBC-1通過TNF-α-p38-casepase8通路促進心梗後心肌細胞持續凋亡及心室重構。本課題擬使用DBC-1基因敲除小鼠，不同條件下培養原代心肌細胞，體外評價DBC-1在細胞凋亡中作用；建立DBC-1基因敲除小鼠心梗/再灌注模型，使用p38及casepase8抑制劑，組織學和影像學評價心室重構程度，免疫組化及western blot檢測DBC-1及TNF-α下游通路各蛋白表達水平，探討DBC-1影響TNF-α-p38-casepase8通路參與心室重構作用和機制，為心衰防治提供新策略。
結題摘要
持續發生的凋亡是缺血再灌注後心室重構的主要原因之一。TNF-α信號的激活和上調是導致心肌細胞凋亡的關鍵，然而針對TNF-α的治療並不能有效的抑制心室重構的進程。在本研究中，我們發現，缺血再灌注後心臟功能進行性降低，伴隨高水平的細胞凋亡，同時心肌組織中TNF-a及DBC1表達水平顯著上調，而且p38及caspase8信號通路被激活。進一步的研究結果顯示，使用Caspase8及p38抑制劑來抑制Caspase8及p38信號通路的激活可以顯著改善MI/R後小鼠的心功能，減輕心肌局部炎症反應，降低MI/R後心肌細胞的凋亡。而且，Caspase8及p38抑制劑還可顯著降低MI/R後心肌組織中DBC1，TNF-a和TNFR1的表達。體外細胞實驗結果顯示，過氧化氫誘導心肌細胞損傷模型中DBC-1的表達顯著升高，敲低DBC-1顯著降低過氧化氫誘導的H9C2細胞的凋亡，及TNF-a和TNFR1的表達，DBC1-siRNA轉染H9C2細胞後過氧化氫誘導的p38MAPK及caspase8 表達水平也顯著降低。使用TNF-a-siRNA轉染細胞敲低TNF-ɑ可以逆轉過氧化氫誘導的DBC1高表達，而Caspase8及p38抑制劑也可顯著降低過氧化氫誘導的細胞凋亡。因此，DBC-1 通過與TNF-α相互作用並促進 p38 和 casepase8信號通路的激活參與缺血再灌注後心肌凋亡，並最終導致心室重構。該研究結果初步揭示了 DBC1與 TNF-α相互作用促進心梗/再灌注後心肌細胞凋亡和心室重構的機制，為合理進行心梗後心室重構的治療和預防提供依據。
