基因診斷方法

基因診斷方法

基因診斷方法就是利用現代分子生物學和分子遺傳學的技術方法,直接檢測基因結構及其表達水平是否正常,從而對疾病作出診斷的方法。

基因診斷的特點:①以基因作為檢查材料和探查目標,屬於“病因診斷”,針對性強。②分子雜交技術選用特定基因序列作為探針,具有很高的特異性。③分子雜交和聚合酶鏈反應都具有放大效應,診斷靈敏度很高。

基本介紹

  • 中文名:基因診斷方法
  • 外文名:Genetic diagnosis
  • 基本原理:核酸分子雜交
  • 分類:基因直接診斷,基因間接診斷
  • 別名:DNA診斷或分子診斷
概念以及特點,技術方法,

概念以及特點

所謂基因診斷就是利用現代分子生物學和分子遺傳學的技術方法,直接檢測基因結構及其表達水平是否正常,從而對疾病作出診斷的方法。
基因診斷的特點:①以基因作為檢查材料和探查目標,屬於“病因診斷”,針對性強。②分子雜交技術選用特定基因序列作為探針,具有很高的特異性。③分子雜交和聚合酶鏈反應都具有放大效應,診斷靈敏度很高。④適用性強,診斷範圍廣,檢測目標可為內源基因也可為外源基因。

技術方法

1核酸分子雜交技術
以檢測樣本中是否存在與探針序列互補的同源核酸序列。常用有以下方法。
(1)限制性內切酶分析法。此方法是利用限制性內切酶和特異性DNA探針來檢測是否存在基因變異。當待測DNA序列中發生突變時會導致某些限制性內切酶位點的改變,其特異的限制性酶切片段的狀態在電泳遷移率上也會隨之改變,藉此可作出分析診斷。
(2)DNA限制性片斷長度多態性分析。在人類基因組中,平均約200對鹼基可發生一對變異(稱為中性突變),中性突變導致個體間核苷酸序列的差異,稱為DNA多態性。不少DNA多態性發生在限制性內切酶識別位點上,酶解該DNA片段就會產生長度不同的片斷,稱為限制性片段長度多態性(RFLP)。RFLR按孟德爾方式遺傳,在某一特定家族中,如果某一致病基因與特異的多態性片斷緊密連鎖,就可用這一多態性片段為一種“遺傳標誌”,來判斷家庭成員或胎兒是否為致病基因的攜帶者。甲型血友病、囊性纖維病變和苯丙酮尿症等均可藉助這一方法得到診斷。
(3)等位基因特異寡核苷酸探針雜交法。遺傳疾病的遺傳基礎是基因序列中發生一種或多種突變。根據已知基因突變位點的核苷酸序列,人工合成兩種寡核苷酸探針:一是相應於突變基因鹼基序列的寡核苷酸;二是相應於正常基因鹼基序的寡核苷酸,用它們分別與受檢者DNA進行分子雜交。從而檢測受檢者基因是否發生突變,以及是否有新的突變類型。

相關詞條

熱門詞條

聯絡我們