遺傳性疾病實驗診斷是指通過生化檢查、細胞遺傳學檢查、基因診斷等實驗室檢查方法為遺傳性疾病的臨床診斷提供依據。
基本介紹
- 中文名：遺傳性疾病實驗診斷
- 臨床套用：染色體、單基因等遺傳性疾病
檢查項目,臨床套用,
檢查項目
1．生化檢查
生化檢查是遺傳性疾病診斷的重要輔助手段。
（1）蛋白質和酶的檢測：蛋白質的檢測方法主要有電泳技術、肽鏈和胺基酸順序分析等；酶的檢測方法主要有電泳速率法、免疫反應技術、酶動力學技術、指紋分析法等。檢測標本包括患者血液和特定的組織、細胞，如成纖維細胞、腸黏膜細胞等。
（2）底物或代謝產物檢測：酶的異常可導致一系列的代謝紊亂，表現為代謝中間產物、底物、終產物等發生質和量的變化。因此檢測底物、代謝產物等質和量的變化，可以間接反映酶的變化。
2．細胞遺傳學檢查
（1）染色體核型檢查：通過染色體檢查進行染色體核型分析，是確診遺傳性疾病的主要方法。染色體檢查多取外周血做淋巴細胞培養，產前診斷時取絨毛、羊水中胎兒脫落細胞、臍帶血等。如患者出現以下情況應考慮行染色體核型分析檢查：①患有遺傳性疾病者；②有多種先天性畸形；③有明顯生長發育障礙或智慧型發育障礙；④性發育異常或不全；⑤孕婦年齡過大，不孕或多次自然流產史；⑥有染色體畸變家族史。
（2）性染色體檢查：主要用作性發育異常疾病、真假兩性畸形及性染色體數目異常疾病的輔助診斷。檢查樣本取自口腔黏膜上皮細胞、皮膚、女性陰道上皮細胞及絨毛細胞和羊水中胎兒脫落細胞等。標本塗片染色後進行觀察。
3．分子遺傳學檢查
利用DNA重組技術檢測人類遺傳性疾病的基因缺陷，具有針對性強、特異性強、靈敏度高、診斷範圍廣等特點。由於大多數基因突變難以直接檢測，因此基因診斷主要是以先證者為線索進行產前診斷。
（1）聚合酶鏈反應技術：聚合酶鏈反應技術是一種模擬體內DNA半保留複製過程，在體外酶促合成特異性DNA片段的方法。許多單基因遺傳性疾病可通過聚合酶鏈反應技術診斷。
（2）短串聯重複多態連鎖分析法：短串聯重複因在人群中重複次數不同而呈多態性，可通過聚合酶鏈反應技術檢測短串聯重複的多態性，再通過連鎖分析進行基因診斷。
（3）限制性片段長度多態性連鎖分析法：通過聚合酶鏈反應擴增出可能包含突變的基因組片段，然後利用限制性內切酶對這些聚合酶鏈反應片段進行酶切，電泳檢測後根據酶切片段的長度差異來判斷是否存在突變位點。該法一般用於檢測已知的突變位點。
（4）寡核苷酸探針分析法：當基因突變的部位和性質明確時，可套用同位素標記的等位基因特異的寡核苷酸探針進行診斷。寡核苷酸探針分析法還可以和聚合酶鏈反應技術結合，以減少雜交時的非特異性信號。
生化檢查是遺傳性疾病診斷的重要輔助手段。
（1）蛋白質和酶的檢測：蛋白質的檢測方法主要有電泳技術、肽鏈和胺基酸順序分析等；酶的檢測方法主要有電泳速率法、免疫反應技術、酶動力學技術、指紋分析法等。檢測標本包括患者血液和特定的組織、細胞，如成纖維細胞、腸黏膜細胞等。
（2）底物或代謝產物檢測：酶的異常可導致一系列的代謝紊亂，表現為代謝中間產物、底物、終產物等發生質和量的變化。因此檢測底物、代謝產物等質和量的變化，可以間接反映酶的變化。
2．細胞遺傳學檢查
（1）染色體核型檢查：通過染色體檢查進行染色體核型分析，是確診遺傳性疾病的主要方法。染色體檢查多取外周血做淋巴細胞培養，產前診斷時取絨毛、羊水中胎兒脫落細胞、臍帶血等。如患者出現以下情況應考慮行染色體核型分析檢查：①患有遺傳性疾病者；②有多種先天性畸形；③有明顯生長發育障礙或智慧型發育障礙；④性發育異常或不全；⑤孕婦年齡過大，不孕或多次自然流產史；⑥有染色體畸變家族史。
（2）性染色體檢查：主要用作性發育異常疾病、真假兩性畸形及性染色體數目異常疾病的輔助診斷。檢查樣本取自口腔黏膜上皮細胞、皮膚、女性陰道上皮細胞及絨毛細胞和羊水中胎兒脫落細胞等。標本塗片染色後進行觀察。
3．分子遺傳學檢查
利用DNA重組技術檢測人類遺傳性疾病的基因缺陷，具有針對性強、特異性強、靈敏度高、診斷範圍廣等特點。由於大多數基因突變難以直接檢測，因此基因診斷主要是以先證者為線索進行產前診斷。
（1）聚合酶鏈反應技術：聚合酶鏈反應技術是一種模擬體內DNA半保留複製過程，在體外酶促合成特異性DNA片段的方法。許多單基因遺傳性疾病可通過聚合酶鏈反應技術診斷。
（2）短串聯重複多態連鎖分析法：短串聯重複因在人群中重複次數不同而呈多態性，可通過聚合酶鏈反應技術檢測短串聯重複的多態性，再通過連鎖分析進行基因診斷。
（3）限制性片段長度多態性連鎖分析法：通過聚合酶鏈反應擴增出可能包含突變的基因組片段，然後利用限制性內切酶對這些聚合酶鏈反應片段進行酶切，電泳檢測後根據酶切片段的長度差異來判斷是否存在突變位點。該法一般用於檢測已知的突變位點。
（4）寡核苷酸探針分析法：當基因突變的部位和性質明確時，可套用同位素標記的等位基因特異的寡核苷酸探針進行診斷。寡核苷酸探針分析法還可以和聚合酶鏈反應技術結合，以減少雜交時的非特異性信號。
臨床套用
1．染色體遺傳性疾病
通過細胞遺傳學檢查即可確診。
2．單基因遺傳性疾病
（1）直接診斷：用聚合酶鏈反應基因擴增法結合限制性片段長度多態性分析、單鏈構型多態性分析、等位基因特異性寡核苷酸探針分析或直接DNA測序，可直接檢測出單基因突變。
（2）間接診斷：若致病基因已被定位，可利用基因連鎖分析對疾病進行間接診斷。間接診斷時需有較完整的患者家族資料和先證者。此外，由於單基因遺傳性疾病的病變基礎是蛋白質或酶分子結構或功能異常，因此可通過生化檢查來間接診斷單基因遺傳性疾病。
3．多基因遺傳性疾病
由於涉及基因數量多，情況複雜，目前尚在研究之中。
4．線粒體遺傳性疾病
線粒體DNA突變可引起多種線粒體遺傳性疾病，通過分子遺傳學檢查可獲得診斷。
5．體細胞遺傳性疾病
體細胞遺傳性疾病包括大部分腫瘤和某些先天畸形，須通過細胞遺傳學、分子遺傳學檢查方法結合其他多種檢查才可確診。
通過細胞遺傳學檢查即可確診。
2．單基因遺傳性疾病
（1）直接診斷：用聚合酶鏈反應基因擴增法結合限制性片段長度多態性分析、單鏈構型多態性分析、等位基因特異性寡核苷酸探針分析或直接DNA測序，可直接檢測出單基因突變。
（2）間接診斷：若致病基因已被定位，可利用基因連鎖分析對疾病進行間接診斷。間接診斷時需有較完整的患者家族資料和先證者。此外，由於單基因遺傳性疾病的病變基礎是蛋白質或酶分子結構或功能異常，因此可通過生化檢查來間接診斷單基因遺傳性疾病。
3．多基因遺傳性疾病
由於涉及基因數量多，情況複雜，目前尚在研究之中。
4．線粒體遺傳性疾病
線粒體DNA突變可引起多種線粒體遺傳性疾病，通過分子遺傳學檢查可獲得診斷。
5．體細胞遺傳性疾病
體細胞遺傳性疾病包括大部分腫瘤和某些先天畸形，須通過細胞遺傳學、分子遺傳學檢查方法結合其他多種檢查才可確診。
