反轉錄(或叫逆轉錄) 合成DNA 是人工模擬自然界某些生物的反轉錄過程。自然界核糖核酸RNA 病毒不含脫氧核糖核酸(DNA),它們的繁殖方式有兩類,一種是直接以核糖核酸(RNA) 為複製模板以及轉錄模板; 另一種是先將病毒核核酸(RNA) 的遺傳信息反轉錄給脫氧核糖核酸(DNA),即在病毒的反轉錄酶(RNA 指導的DNA 聚合酶) 作用下,使宿主細胞以病毒的核糖核酸(RNA) 為模板合成脫氧核糖核酸(DNA),然後再以脫氧核糖核酸(DNA)為模板轉錄生成核糖核酸(RNA)。
反轉錄(或叫逆轉錄) 合成DNA 是人工模擬自然界某些生物的反轉錄過程。自然界核糖核酸RNA 病毒不含脫氧核糖核酸(DNA),它們的繁殖方式有兩類,一種是直接以核糖核酸(RNA) 為複製模板以及轉錄模板; 另一種是先將病毒核核酸(RNA) 的遺傳信息反轉錄給脫氧核糖核酸(DNA),即在病毒的反轉錄酶(RNA 指導的DNA 聚合酶) 作用下,使宿主細胞以病毒的核糖核酸(RNA) 為模板合成脫氧核糖核酸(DNA),然後再以脫氧核糖核酸(DNA)為模板轉錄生成核糖核酸(RNA)。
反轉錄(或叫逆轉錄) 合成DNA 是人工模擬自然界某些生物的反轉錄過程。自然界核糖核酸RNA 病毒不含脫氧核糖核酸(DNA),它們的繁殖方式有兩類,一種是直接以核糖核酸...
反轉錄是以RNA為模板,通過反轉錄酶,合成DNA的過程。是DNA生物合成的一種特殊方式。反轉錄是進行基因工程過程中,以RNA為模板提取出DNA遺傳信息的過程。...
以RNA為模板複製DNA,由此得到的DNA稱cDNA(complementary DNA,互補DNA,反轉錄DNA)。是在人工條件下,借用逆轉錄酶,根據逆轉錄原理,實現用細胞生物mRNA為模板,合成目的...
這種方法主要用於分子量較大而又不知其序列的基因,它以目的基因的mRNA為模板,設計上下游引物,藉助反轉錄酶合成鹼基互補的DNA片段,即cDNA,再在DNA聚合酶的作用下...
2.原核基因採取直接分離獲得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法和化學合成法。3.PCR技術擴增目的基因(1)原理:DNA雙鏈複製...
反轉錄PCR (reverse transcription PCR,RT-PCR),是指以mRNA為模板 在反轉錄酶作用下合成的cDNA 第一鏈的PCR。該反應分為兩步,第一步在單引物的介導和反轉錄...
cDNA合成系統採用M-MLV反轉錄酶的RNase H缺失突變株取代AMV反轉錄酶,使合成的cDNA更長。該系統的第一鏈合成使用M-MLV反轉錄酶,cDNA第二鏈合成採用置換合成法,...
反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶,該酶以RNA 為...
逆轉錄病毒(Retrovirus),又稱反轉錄病毒,屬於RNA病毒中的一類,它們的遺傳信息不是儲存在脫氧核糖核酸(DNA),而是儲存在核糖核酸(RNA)上,此類病毒是目前已知的唯一...
反轉錄作用是在反轉錄酶的作用下,以dNTP為底物,以RNA為模板,tRNA(主要是色氨酸tRNA)為引物,在tRNA3′桹H末端上,按5′→3′方向,合成一條與RNA模板互補的DNA...
反轉錄RNA(Reverse Transcription,RT-PCR)又稱為逆轉錄RNA。其原理是:提取組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,採用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄...
以mRNA為模板,利用反轉錄酶合成與mRNA互補的DNA(complementary DNA,cDNA),再複製成雙鏈cDNA片段,與適當載體連線後轉入受菌體,擴增為cDNA文庫(cDNA library),然後再...
通過RNA提取、反轉錄等流程做出來cDNA片段是比較傳統經典的方式。但缺點是流程較長,且耗時耗力。 現在國外比較流行的是直接合成基因。其實原理是通過先合成長DNA單...
概念以目的基因轉錄成的信使RNA為模板,反轉錄成互補的單鏈DNA(cDNA),然後在酶的作用下合成雙鏈DNA,從而獲取所需的基因。是基因工程中提取目的基因的重要方法之一...
轉錄( transcription)是指以DNA為模板,以ATP、UTP、GTP和CTP為原料,按照鹼基互補原則,在RNA聚合酶的作用下合成RNA的過程,是基因c表達的第一步。原核細胞只有一種...
逆轉錄(reverse transcription)是以RNA為模板合成DNA的過程,即RNA指導下的DNA合成。此過程中,核酸合成與轉錄(DNA到RNA)過程與遺傳信息的流動方向(RNA到DNA)相反,故...
構成基因的雙鏈DNA分子用一條單鏈作為模板,轉錄產生與其序列互補的信使RNA分子,然後在反轉錄酶的作用下,以mRNA分子為模板,合成一條與mRNA序列互補的單鏈DNA,最後...
反轉錄病毒科(Retrovirus)的病毒特徵為其基因組是雙股(+)RNA,病毒含有RNA-DNA聚合脢(RNA-directed DNA polymerase)亦即反轉錄脢(retrotranscriptase)做為複製之用,...
cDNA是指具有與某RNA鏈呈互補鹼基序列的DNA。與RNA鏈互補的單鏈DNA,以其RNA為模板,在適當引物的存在下,由依賴RNA的DNA聚合酶(反轉錄酶)作用而合成,並且在合成...
簡短的目的基因可在了解DNA一級結構或多肽鏈一級結構胺基酸編碼的核苷酸序列的基礎上人工合成。目的基因用逆轉錄酶製備cDNA 大多數的目的基因是由mRNA合成cDNA(反轉錄...
oligo(dT)引導的DNA合成法:利用真核mRNA分子所具有的poly(A)尾巴的特性,加入12-20個脫氧胸腺嘧啶核苷組成的oligo(dT)短片段,由反轉錄酶合成cDNA的第一鏈....
tRNA還具有其他一些特異功能,例如,在沒有核糖體或其他核酸分子參與下,攜帶胺基酸轉移至專一的受體分子,以合成細胞膜或細胞壁組分;作為反轉錄酶引物參與DNA合成;作為...
病毒的核酸包括雙鏈DNA(dsDNA)、單鏈DNA(ssDNA)、雙鏈RNA(dsRNA)、單鏈RNA(...(RNP)至細胞漿,在轉錄過程中每一mRNA得以合成,而通過複製產生全長反義基因組...
浙江大學孔德華博士介紹,端粒酶(Telomerase)是使端粒延伸的反轉錄DNA合成酶。是個由RNA和蛋白質組成的核糖核酸-蛋白複合物。其RNA組分為模板,蛋白組分具有催化活性,...
RT—PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用,從RNA合成cDNA,...
反義RNA(antisenseRNA,asRNA),是一類能夠與mRNA互補配對的單鏈RNA分子。細胞中...mRNA是依據DNA序列轉錄而成的蛋白質合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識別者和...
(1) 以biotinylated oligo(dT)為引物反轉錄合成cDNA,以一種限制性內切酶(錨定...點序列(標籤酶是一種Ⅱ類限制酶,它能在距識別位點約20鹼基的位置切割DNA雙鏈...