共表達質粒就是指那些可以同核DNA一起表達的質粒DNA。質粒(Plasmid)是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區DNA原有的能夠自主複製的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質粒雖然都是環狀構型,它存在於許多細菌以及酵母菌等生物(多為原核生物)中,乃至於植物的線粒體等胞器中。
基本介紹
- 中文名:共表達質粒
- 釋義:那些可以同核DNA一起表達的質粒DNA
共表達質粒就是指那些可以同核DNA一起表達的質粒DNA。質粒(Plasmid)是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區DNA原有的能夠自主複製的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質粒雖然都是環狀構型,它存在於許多細菌以及酵母菌等生物(多為原核生物)中,乃至於植物的線粒體等胞器中。
共表達質粒就是指那些可以同核DNA一起表達的質粒DNA。質粒(Plasmid)是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區DNA原有的能夠自主複製的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質粒雖然都是環狀構型,它存...
共表達 共表達質粒就是指那些可以同核DNA一起表達的質粒DNA。不是所有的質粒DNA都可以表達,
質粒是細菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體(或擬核)以外的DNA分子,存在於細胞質中(但酵母除外,酵母的2μm質粒存在於細胞核中),具有自主複製能力,使其在子代細胞中也能保持恆定的拷貝數,並表達所攜帶的遺傳信息,是閉合環狀的...
選擇質粒載體的要素是要了解可用到的載體的特徵和預測重組克隆所用於的實驗。所有的質粒載體都有三個共同的特徵:一個複製子、一個選擇性標誌和一個克隆位點。複製子是含有DNA複製起始位點的一段DNA(ori),也包括表達由質粒編碼的複製...
pSV2是在DNA腫瘤病毒SV40的基礎上發展出來的一種新型的質粒載體家族。它是由從SV40早期轉錄單位派生出來的一種表達盒(expression cassette),插入在pBR322質粒DNA上重組形成的。這個表達盒共有三個組件。第一個組件是Pvu Ⅱ—Hind Ⅲ區...
用NdeⅠ酶切實施例2中製得的質粒PT₇-SecB,並用T4DNA連線酶將編碼aFGF的核苷酸序列連同其5’端分泌信號序列連線到pT₇-SecB中SecB基因序列的下游,從而得到該發明的重組表達質粒pUCSec-T₇-aFGF。實施例4:aFGF蛋白的分泌表達與...
有些YRp質粒在二倍體細胞中比在單倍體細胞中更為穩定,但其拷貝數比在單倍體細胞中減少5~10倍。酵母質粒載體 酵母質粒載體是基因表達載體的一種,既可以在大腸桿菌中、又可以在酵母系統中進行複製與擴增,所以也稱為穿梭載體。它分...
右圖1為攜帶綠色螢光的shRNA真核表達載體pYr-1.1-hU6-EGFP質粒圖譜 (attL1和attL2為腺病毒重組位點)。只需事先了解需要干擾的目的基因,我們就會為您從資料庫中調取相應的shRNA序列信息,然後,您可以選擇合適的shRNA表達系統來...
常用的人工質粒運載體有pBR322、pSC101。pBR322含有抗四環素基因(Tcr)和抗氨苄青黴素基因(Apr),並含有5種內切酶的單一切點。如果將DNA片段插入EcoRI切點,不會影響兩個抗生素基因的表達。但是如果將DNA片段插入到HindIII、BamHI或SalI...
1.1 表達載體 為了獲得高水平的基因表達產物,人們通過綜合考慮控制轉錄、翻譯、蛋白質穩定性及向胞外分泌等諸多方面的因素,設計出了許多具有不同特點的表達載體,以滿足表達不同性質、不同要求的目的基因的需要。通常關心的表達載體質粒...
真核細胞表達載體,生物學術語,真核細胞表達載體之一為pEGFP-N1載體,具有多方面的優點。pEGFP-N1載體上攜帶有EGFP蛋白表達基因。pEGFP-N1載體具有以下幾方面特點:①從結構上看,該質粒具有很強的複製能力,可以滿足隨宿主細胞分裂時跟隨...
微小隱孢子蟲表達質粒pET41b-Cp41轉化菌是隱孢子蟲科、隱孢子蟲屬生物。形態特徵 卵囊呈圓形或橢圓形,大小3-5um,囊有一縫隙,卵囊內含有4個子孢子,無孢子囊,子孢子呈月芽狀,排列在殘體周圍,殘體一個。生態習性 寄生在腸道上...
微小隱孢子蟲表達質粒pET28a-CP15/60轉化菌是隱孢子蟲科、隱孢子蟲屬生物。形態特徵 卵囊呈圓形或橢圓形,大小3-5um,囊有一縫隙,卵囊內含有4個子孢子,無孢子囊,子孢子呈月芽狀,排列在殘體周圍,殘體一個。生態習性 寄生在腸道...
微小隱孢子蟲表達質粒pET28b-CP15/60轉化菌是隱孢子蟲科、隱孢子蟲屬生物。形態特徵 卵囊呈圓形或橢圓形,大小3-5um,囊有一縫隙,卵囊內含有4個子孢子,無孢子囊,子孢子呈月芽狀,排列在殘體周圍,殘體一個。生態習性 寄生在腸道...
構建重組表達載體 (1)載體酶切:將表達質粒用限制性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳後,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。(2)PCR產物雙酶切後回收,在T4DNA連線酶作用下連線入載體。獲得含重組...
雙元表達載體系統,是一種分子生物學用語,用於缺失了T-DNA 區域。兩部分 雙元表達載體系統主要包括兩個部分:一部分為卸甲Ti質粒,這類Ti質粒由於缺失了T-DNA 區域,完全喪失了致瘤作用,主要是提供Vir基因編碼表達Vir蛋白的功能,...
第三代質粒表達載體是嵌合質粒。對於一些外源蛋白的表達,為了提高表達效率,可對表達載體進行改造,就是在克隆載體基本骨架的基礎上增加表達元件,使目的基因能夠表達的載體,在表達載體中引入嚴格調控的強啟動子,通過不同的誘導方式,如...
電激條件:2200V,1000歐,25微克F,100微克感受態細胞,1微克質粒DNA。30℃溫浴2小時,100轉每分;以25微克/毫升Ery(紅黴素)平板篩選陽性轉化子。經過提取質粒、酶切分析、PCR擴增等分子檢測,獲得了含有pSXY422-1Ah表達質粒的Bt...
我們構建了IL-24和IP-10雙基因共表達質粒,在體外MTT增殖試驗和克隆形成試驗中,我們觀察到IL-24/IP-10雙基因聯合治療較各單基因治療可以更明顯抑制腫瘤細胞增殖活性和克隆形成。通過小管生成試驗,發現IL-24/IP-10雙基因聯合治療較各...
每步反應所需酶均由共表達質粒共表達並一體純化,糖活性供體Sugar-nucleotide均原位生成。β干擾素作為改造對象由具備N-糖基化系統的酵母表達,由Endo-A水解,得到GlcNAc-IFNβ,並由Endo-M完成其N-glycan的均一、人源化改造。整個改造過程...
pEGFP-N1載體上攜帶有EGFP蛋白表達基因,如上圖質粒圖譜所示。特點介紹 ①從結構上看,該質粒具有很強的複製能力,可以滿足隨宿主細胞分裂時跟隨胞質遺傳給新生的子細胞,這是保證目的基因穩定表達的因素之一;②含有高效的功能強大的啟動子...
共整合載體系統是指科技開發機構和科技人員因為他們是科技知識的載體。是微型Ti質粒(Mini-Tiplasmid),它在T-DNA左右邊界序列之間提供植株選擇標記如NPTII基因以及LacZ基因等。系統簡介 共整合載體系統是指科技開發機構和科技人員因為他們是...
Meng(2000)將GP5基因克隆入巨細胞病毒(CMV)早期啟動子的控制之下構建成真核表達質粒而製備出DNA疫苗,用其免疫仔豬後可誘導抗體的產生,實驗室攻毒後顯示出良好的保護效果。4口蹄疫病毒FMDV 將FMDV全長基因組的cDNA克隆到質粒,並去除...
可以分別構建表達核蛋白基因的原核表達系統和真核表達系統。表達核蛋白基因的原核表達系統以原核表達質粒pET30a系列質粒為載體,設計酶切位點,將目的基因通過常規的PCR方法擴增後,克隆到pET30a系列質粒中,以大腸桿菌BL21為宿主菌,0.1-1...
將pCI-NP、pCI-P和pCI-L三個真核表達質粒與轉錄載體pNDV-VII共轉染BSR-T7/5細胞,60小時後將轉染細胞輕輕刮下,與細胞上清充分混合後接種9~11日齡SPF雞胚,每個樣品接種3枚,0.4毫升/枚,37℃孵育,即獲得重組病毒NDV-VII。4...
前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用於啟動子和其它調控元件的分析。一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染後24-72小時內(依賴於各種不同的...
1.4tip30與人IFN-γ共表達質粒的構建質粒pCI-IFN、pCI-IFN以NheI、EcoRI酶切後,與經NheI、EcoRI酶切的tip30基因連線,得到質粒pCI-tip30-IFN。以EcoRI、SmaI酶切質粒pIRES-neo,切出的IRES基因插入用相同酶切的質粒pCI-tip30-...