《交配活動對三疣梭子蟹卵巢發育的影響》是依託寧波大學，由母昌考擔任負責人的國家自然科學基金資助青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：交配活動對三疣梭子蟹卵巢發育的影響
- 依託單位：寧波大學
- 項目負責人：母昌考
- 項目類別：青年科學基金項目
項目簡介,結題摘要,
項目簡介
採用單個體筐養模式養殖三疣梭子蟹以控制個體間的接觸，在相同養殖條件下進行養殖，通過全人工定向交配以獲得三疣梭子蟹雌性交配與未交配個體。分別在解剖學水平、組織學水平、基因轉錄水平和蛋白表達水平進行研究，以明確三疣梭子蟹卵巢的發育是否受交配的影響。通過解剖學觀察梭子蟹卵巢發育程度，確定卵巢發育分期，測定三疣梭子蟹卵巢重與體重，計算卵巢指數，在組織學水平解析交配對三疣梭子蟹卵巢發育的影響；採用常規組織切片技術研究卵巢變化，在組織學水平解析交配對卵巢發育的影響；套用基因表達譜技術研究三疣梭子蟹卵巢基因表達的差異，在轉錄水平解析交配對三疣梭子蟹卵巢發育影響；通過差異蛋白組學研究受交配影響相關蛋白，從蛋白表達水平明確交配對三疣梭子蟹卵巢發育的影響。從不同水平研究交配對卵巢發育的影響，不僅有助於闡明交配是否是三疣梭子蟹卵巢正常發育的必需環節，還能豐富甲殼動物繁育生物學基本理論。
結題摘要
本項目從個體和解剖學水平上比較了交配與未交配三疣梭子蟹的差異，觀察記錄試驗組和對照組卵巢顏色及形態，確定卵巢發育程度及分期；測量三疣梭子蟹卵巢重及體重，計算了卵巢指數，比較實驗組與對照組卵巢指數的差異。利用卵巢為研究材料，構建了三疣梭子蟹卵巢差減文庫，獲得176條差異EST,交配卵巢中檢測到100條表達下調，76條表達上調，測序檢測後經NCBI Blast分析獲得51個unigene，其中27個上調，24個下調；同時進行了表達譜測序，並根據測序結果，定製了表達譜晶片，獲得差異基因2072條，其中表達上調基因715條，表達下調基因1357條，從轉錄水平揭示了交配對三疣梭子蟹卵巢發育的影響。以卵巢為研究材料，利用雙向電泳技術獲得差異蛋白並對所得差異蛋白進行質譜分析，獲得106個差異蛋白點，在交配卵巢中有44個蛋白表達升高，73個蛋白表達下調。106個蛋白點中，96個人成功進行了質譜分析，獲得28個從unique蛋白，其中20個表達下調，8個表達上調。從蛋白表達水平解析了交配對三疣梭子蟹卵巢發育的影響。項目發表研究論文7篇，其中4篇SCI收錄；申請發明專利3項，其中2項獲得授權。
