磷脂對三疣梭子蟹卵黃髮生的營養調控機制研究

《磷脂對三疣梭子蟹卵黃髮生的營養調控機制研究》是周歧存為項目負責人，寧波大學為依託單位的面上項目。

基本介紹

• 中文名：磷脂對三疣梭子蟹卵黃髮生的營養調控機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：周歧存
• 依託單位：寧波大學

項目摘要

迄今為止，有關磷脂對三疣梭子蟹卵巢發育與卵黃髮生的營養調控機制研究尚未見報導。本項目運用現代營養學、生物化學、生理學和分子生物學等方法，研究三疣梭子蟹雌蟹卵巢發育及卵黃髮生過程中磷脂的消化、吸收、轉運、合成和代謝過程。具體的研究內容如下：（1）研究不同磷脂源及水平對三疣梭子蟹生長、肝胰腺及卵巢磷脂代謝關鍵酶活力及基因表達的影響，闡明三疣梭子蟹卵巢發育不同階段磷脂合成、轉運及代謝的差異；（2）研究磷脂對三疣梭子蟹血淋巴、肝胰腺及卵巢內分泌激素的影響，揭示磷脂對三疣梭子蟹內分泌激素調控的生理和分子機制；（3）通過關閉或開放某些特定關鍵控制點，探明三疣梭子蟹卵黃髮生與卵黃蛋白源形成的營養調控機制；（4）通過營養干預，探討磷脂通過內分泌系統和相關分子調控卵黃的合成。預期研究成果不僅可以豐富三疣梭子蟹生殖調控和分子營養學的基礎理論，而且對於三疣梭子蟹的資源增殖和保護具有重要意義。

結題摘要

三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）肉肥細嫩，膏紅肥滿，為人們所喜食，是我國沿海地區重要水產品種之一。本項目運用現代營養學、生物化學、生理學和分子生物學等方法，研究三疣梭子蟹雌蟹卵巢發育及卵黃髮生過程中磷脂的消化、吸收、轉運、合成和代謝過程。主要研究內容如下：（1）確定了三疣梭子蟹幼蟹階段（3.68±0.02g）磷脂需要量為4.19%；養成期（25.46 ± 0.40 g）雌性三疣梭子蟹大豆卵磷脂的適宜需要量為3.6 %。（2）飼料磷脂對已交配的三疣梭子蟹的性腺指數(GSI)和肝胰腺指數(HSI) 的影響顯著，投餵4%磷脂水平的三疣梭子蟹GSI顯著高於未添加組(P<0.05)，而HSI呈現和GSI相反的趨勢；飼料磷脂對未交配的三疣梭子蟹的性腺指數(GSI)和肝胰腺指數(HSI)沒有產生顯著影響(P>0.05)，交配之後的三疣梭子蟹其GSI極顯著的高於未交配的各組(P＜0.01)。（3）飼料中的大豆磷脂和交配處理均能促進雌性三疣梭子蟹的卵巢發育，交配處理對卵母細胞成熟的促進作用更為明顯。（4）飼料中添加4%的大豆卵磷脂可顯著促進卵巢組織中高不飽和脂肪酸的合成和沉積，交配後的三疣梭子蟹需要利用大量的ARA、EPA和DHA供其生長和性腺發育；飼料中添加4%的大豆卵磷脂可顯著促進卵質中卵黃顆粒的合成，卵質中數量眾多的粗面內質網是形成內源性卵黃顆粒最主要的細胞器。（5）磷脂對三疣梭子蟹脂肪酸代謝和卵黃髮生的營養調控主要源於對肝胰腺組織的直接影響，由肝胰腺組織積累並輸送營養物質，進而影響卵黃髮生和性腺發育。三疣梭子蟹4%大豆卵磷脂添加組和未添加組肝胰腺表達譜比對後共篩選出146條顯著性差異表達基因（上調103，下調43），卵巢表達譜比對後共篩選出257條顯著性差異表達基因（上調112，下調145），這些差異基因大部分與脂肪代謝、能量平衡、磷脂代謝、免疫應激以及氧化還原有關。（6）高磷脂飼料組(8%)顯著促進了三疣梭子蟹肝胰腺Pt-FABP基因的表達(P＜0.05)，不同大豆卵磷脂水平的飼料對卵黃髮生期Pt-FABP基因表達呈現先增後降再升高的趨勢。本研究結果表明Pt-FABP基因在三疣梭子蟹卵巢快速發育期內起到脂類營養物質轉運的作用。