《一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物》是江西天施康中藥股份有限公司於2011年6月1日申請的專利，該專利的申請號為2011101461124，公布號為CN102204975A，授權公布日為2011年10月5日，發明人是袁桂平、周國平、何楊虎、吳安明、艾樣開、吳孔松。
《一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物》的藥物組合物是由地錦草、金毛耳草、樟莖枝、香薷、楓樹葉等五味藥材製備得到，其特徵在於：樟莖枝為8年及8年以上樹齡的樟Cinnamomum camphora（L.）Presl的莖枝，並且直徑在3厘米以上。
2016年12月7日，《一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物》獲得第十八屆中國專利優秀獎。
基本介紹
- 中文名：一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物
- 公布號：CN102204975A
- 授權日：2011年10月5日
- 申請號：2011101461124
- 申請日：2011年6月1日
- 申請人：江西天施康中藥股份有限公司
- 地址：江西省鷹潭市工業園區工業五路
- 發明人：袁桂平、周國平、何楊虎、吳安明、艾樣開、吳孔松
- Int.Cl.：A61K36/74(2006.01)I；A61P1/00(2006.01)I
- 類別：發明專利
專利背景,發明內容,專利目的,技術方案,改善效果,技術領域,權利要求,實施方式,實驗案例,實施案例,榮譽表彰,
專利背景
樟科植物樟Cinnamomum camphora（L.）Presl是亞熱帶經濟樹種，其木材、根及枝葉是提取樟腦和樟油的重要原料，供醫藥和香料工業用。截至2011年6月，樟只有根作為法定藥材收載於1996年版《江西省中藥材標準》，可用於中成藥的生產。
樟壽命很長，樹齡可達1000年以上，為常綠大喬木，而且莖枝可再生，因此樟莖枝來源相當廣泛。2011年6月前，樟莖枝主要以提取樟腦供醫藥行業使用，沒有作為藥材直接供藥用。該發明申請人在對樟莖枝進行基礎研究過程中發現，樟莖枝與樟樹根在化學成分和某些藥效方面存在較大差異，但是，該發明申請人在對複方進行研究過程中卻發現，採用樟的部分莖枝替代樟樹根製備得到的腸炎寧糖漿對腸炎療效確切，甚至在某些方面還優於原製劑，具有較好的藥用開發價值。
發明內容
專利目的
《一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物》的目的在於提供一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物。
技術方案
《一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物》提供的藥物組合物是由下列重量份原料組成：地錦草500-1300份、金毛耳草650-1700份、樟莖枝500-1300份、香薷250-640份、楓樹葉250-640份，所述樟莖枝為8年及8年以上樹齡的樟Cinnamomum camphora（L.）Presl的莖枝，並且直徑在3厘米以上。
該發明提供的藥物組合物是由下列重量份原料藥組成：地錦草660份、金毛耳草900份、樟莖枝660份、香薷330份、楓樹葉330份，所述樟莖枝為8年及8年以上樹齡的樟Cinnamomum camphora（L.）Presl的莖枝，並且直徑在3厘米以上。
該發明提供的藥物組合物的劑型可以是口服液、糖漿劑、片劑、膠囊劑、咀嚼片、丸劑或顆粒劑。
改善效果
該申請藥物組合物與腸炎寧糖漿比較都有一定的外周性鎮痛作用和止瀉作用，但該申請組合物止瀉作用更持久，並且具有一定的抗炎作用。
即該申請的組合物可用於治療急、慢性腸炎，且由於具有更顯著的效果，在臨床使用上更具有意義。
技術領域
《一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物》涉及中藥領域，特別涉及一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物。
權利要求
1.一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物，它是由下列重量份原料藥組成：地錦草500-1300份、金毛耳草650-1700份、樟莖枝500-1300份、香薷250-640份、楓樹葉250-640份，其特徵在於：所述樟莖枝為8年及8年以上樹齡的樟Cinnamomum camphora（L.）Presl的莖枝，並且直徑在3厘米以上。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於各原料藥重量份為：地錦草660份、金毛耳草900份、樟莖枝660份、香薷330份、楓樹葉330份。
4.如權利要求3所述的藥物組合物，其特徵在於所述片劑為咀嚼片。
實施方式
實驗案例
實驗例1：樟的根及莖枝成分對比研究
1、浸出物
取5年、8年、12年和30年樹齡樟各自的根及莖枝炮製品，照醇溶性浸出物測定法項下的熱浸法（中國藥典2010年版附錄XA）測定，用95％乙醇作溶劑，檢測結果見表1。
樣品 | 採樣部位 | 浸出物（%） | 樣品 | 採樣部位 | 浸出物（%） |
5年樹齡樣品 | 根 | 1.85 | 8年樹齡樣品 | 根 | 2.37 |
莖枝直徑1~2厘米 | 0.58 | 莖枝直徑1~2厘米 | 1.08 | ||
莖枝直徑2~3厘米 | 0.73 | 莖枝直徑2~3厘米 | 1.61 | ||
莖枝直徑3~4厘米 | 1.02 | 莖枝直徑3~4厘米 | 1.98 | ||
莖枝直徑4~5厘米 | 1.14 | 莖枝直徑4~5厘米 | 2.12 | ||
莖枝直徑5~6厘米 | 1.31 | 莖枝直徑5~6厘米 | 2.07 | ||
12年樹齡樣品 | 根 | 2.41 | 30年樹齡樣品 | 根 | 2.32 |
莖枝直徑1~2厘米 | 1.19 | 莖枝直徑1~2厘米 | 1.24 | ||
莖枝直徑2~3厘米 | 1.65 | 莖枝直徑2~3厘米 | 1.68 | ||
莖枝直徑3~4厘米 | 2.01 | 莖枝直徑3~4厘米 | 2.01 | ||
莖枝直徑4~5厘米 | 1.99 | 莖枝直徑4~5厘米 | 2.04 | ||
莖枝直徑5~6厘米 | 2.05 | 莖枝直徑5~6厘米 | 1.99 |
由表1可知，相同樹齡樟的根的浸出物量均高於莖枝；8年及8年以上樹齡且直徑在3厘米以上的莖枝的浸出物量相近。
2、揮髮油
取5年、8年、12年和30年樹齡樟各自的根及莖枝炮製品，每批取樣60克，切碎後，精密稱定，照揮髮油含量測定法甲法（2010年版中國藥典附錄XD）測定，測定結果見表2。
樣品 | 釆樣部位 | 揮髮油（%） | 樣品 | 採樣部位 | 揮髮油（%） |
5年樹齡樣品 | 根 | 1.98 | 8年樹齡樣品 | 根 | 2.62 |
莖枝直徑1~2厘米 | 0.32 | 莖枝直徑1~2厘米 | 0.61 | ||
莖枝直徑2~3厘米 | 0.55 | 莖枝直徑2~3厘米 | 1.25 | ||
莖枝直徑3-4厘米 | 0.73 | 莖枝直徑3-4厘米 | 1.52 | ||
莖枝直徑4~5厘米 | 0.89 | 莖枝直徑4~5厘米 | 1.56 | ||
莖枝直徑5~6厘米 | 1.08 | 莖枝直徑5~6厘米 | 1.59 | ||
12年樹齡樣品 | 根 | 2.56 | 30年樹齡樣品 | 根 | 2.60 |
莖枝直徑1~2厘米 | 0.57 | 莖枝直徑1~2厘米 | 0.65 | ||
莖枝直徑2~3厘米 | 1.29 | 莖枝直徑2~3厘米 | 1.26 | ||
莖枝直徑3~4厘米 | 1,51 | 莖枝直徑3~4厘米 | 1.50 | ||
莖枝直徑4~5厘米 | 1.57 | 莖枝直徑4~5厘米 | 1.58 | ||
莖枝直徑5~6厘米 | 1.62 | 莖枝直徑5~6厘米 | 1.61 |
由表2可知，相同樹齡樟的根的揮髮油量均高於莖枝；8年及8年以上樹齡且直徑在3厘米以上的莖枝的揮髮油量相近。
3、酚酸性成分
取5年、8年、12年和30年樹齡樟各自的根及莖枝炮製品，利用酚性成分與鐵氰化鉀-三氯化鐵生成普魯士藍化合物的顯色反應測定其酚酸性成分的含量（以表兒茶素計），測定結果見表3。
樣品 | 釆樣部位 | 揮髮油（%） | 樣品 | 採樣部位 | 揮髮油（%） |
5年樹齡樣品 | 根 | 0.21 | 8年樹齡樣品 | 根 | 0.25 |
莖枝直徑 | 0.15 | 莖枝直徑 | 0.20 | ||
莖枝直徑2~3c厘米 | 0.22 | 莖枝直徑2~3厘米 | 0.25 | ||
莖枝直徑3~4厘米 | 0.25 | 莖枝直徑3-4厘米 | 0.33 | ||
莖枝直徑4~5厘米 | 0.27 | 莖枝直徑4~5厘米 | 0.35 | ||
莖枝直徑5-6厘米 | 0.29 | 莖枝直徑5-6厘米 | 0.36 | ||
12年樹齡樣品 | 根 | 0.24 | 30年樹齡樣品 | 根 | 0.25 |
莖枝直徑1~2厘米 | 0.19 | 莖枝宜徑1~2厘米 | 0.18 | ||
莖枝直徑2~3厘米 | 0.25 | 莖枝直徑2-3厘米 | 0.23 | ||
莖枝直徑3~4厘米 | 0.32 | 莖枝直徑3~4厘米 | 0.30 | ||
莖枝直徑4~5厘米 | 0.34 | 莖枝直徑4~5厘米 | 0.33 | ||
莖枝直徑5~6厘米 | 0.35 | 莖枝直徑5~6厘米 | 035 |
由表3可知，8年及8年以上樹齡且直徑在3厘米以上的莖枝的酚酸性成分含量相近，且比其它樣品的含量高。
綜上所述，樟的根與莖枝之間化學成分存在一定得差異，根浸出物、揮髮油含量較高，莖枝中酚酸性成分含量較高，8年及8年以上樹齡且直徑在3厘米以上莖枝成分相近。
實驗例2：樟的根及莖枝藥效對比研究
1.材料
1.1動物：KM小鼠18-22克，雄雌兼用，江西中醫學院試驗動物中心提供，合格證號：SCXK（贛）2005-0001；
1.2藥物
1.2.1受試藥：樟樹根及莖枝提取物（提取物製備方法如下：取藥材，加水煎煮兩次，每次2小時，第一次加15倍量水，第二次加12倍量水，合併煎液，濾過，濾液濃縮至每毫升溶液約相當於10克生藥，即得。）
樟莖枝A（8年及8年以上樹齡，直徑1-2厘米）劑量為3.96克生藥/千克，相當臨床用量9倍；樟莖枝B（8年及8年以上樹齡，直徑2-3厘米）劑量為3.96克生藥/千克，相當臨床用量9倍；樟莖枝C（8年及8年以上樹齡，直徑3厘米以上）劑量為3.96克生藥/千克，相當臨床用量9倍；樟樹根（8年及8年以上樹齡）劑量為3.96克生藥/千克，相當臨床用量9倍；
1.2.2陽性藥
複方乙醯水楊酸片（武漢遠大製藥集團有限公司，批號090306）劑量0.2克/千克，相當臨床用量9倍；鹽酸洛哌丁胺膠囊（西安楊森製藥有限公司，規格：2毫克/粒）劑量2.4毫克/千克和5.3毫克/千克，相當臨床用量9倍和20倍；
1.3試劑
醋酸：汕頭西隴化工有限公司，批號：081102；依文思藍：Sigma公司提供；墨汁：500毫升/瓶，廬山墨汁；蓖麻油：500毫升，USP級，上海晶純試劑有限公司，批號：1277；甲硫酸新斯的明注射液：1毫克:2毫升，上海信誼金朱藥業有限公司，批號：090301；
1.4儀器
紫外分光光度儀：津島UV-2550；代謝籠：ZHB6，淮北正華生物儀器設備有限公司。
2.方法
2.1毛細血管通透性抗炎試驗
取健康小鼠60隻，完全隨機分為6組，每組10隻，分別為對照組、樟樹根組、樟莖枝A組、樟莖枝B組、樟莖枝C組、陽性藥複方乙醯水楊酸片組。口服灌胃給藥，給藥容量為0.2毫升/10克，連續給藥4天，末次給藥前禁食不禁水16小時，給藥後1小時各組小鼠尾靜脈注射0.5％伊文思藍生理鹽水溶液0.1毫升/10克，隨即腹腔注射0.2毫升/只0.6％冰醋酸，20分鐘後脫頸椎處死，剪開腹部皮膚和肌肉，用6毫升生理鹽水分兩次洗滌腹腔，以吸管吸出洗滌液，合併後，3000轉/分離心15分鐘，取上清液於分光光度計590納米處測定OD值，進行方差檢驗。
2.2小鼠醋酸鎮痛試驗
取健康小鼠60隻，完全隨機分為6組，每組10隻，分別為對照組、樟樹根組、樟莖枝A組、樟莖枝B組、樟莖枝C組、陽性藥複方乙醯水楊酸片組。口服灌胃給藥，給藥容量為0.2毫升/10克，連續給藥4天，末次給藥前禁食不禁水16小時，給藥後1小時腹腔注射0.2毫升/只0.6％冰醋酸，觀察20分鐘內小鼠扭體次數。
2.3小鼠熱板法鎮痛試驗
篩選合格小鼠：每次1隻放在熱板上，出現疼痛反應舔後足時間小於9秒或大於24秒或跳躍者棄之，將合格小鼠隨機分為對照組、樟樹根水提取物組、樟樹莖枝A組、樟樹莖枝B組、樟樹莖枝C組、陽性藥羅通定組。測其正常痛閾值作為給藥前痛閾值，連續給藥3天，給藥量0.2毫升/10克，最後一次給藥前禁食不禁水12小時，分別測量給藥後30分鐘、60分鐘、90分鐘痛閾值。如60秒仍無反應，將小鼠取出，其痛閾值以60秒計算。
2.4蓖麻油致瀉試驗
取小鼠60隻，適應性飼養後隨機分對照組、陽性藥洛哌丁胺組、樟樹根組、樟莖枝A組）、樟莖枝B組、樟莖枝C組，每組10隻，連續給藥3天，0.2毫升/10克，末次給藥前禁食不禁水4小時，給藥後40分鐘每隻小鼠灌服蓖麻油0.3毫升/10克，於代謝籠中觀察6小時內小鼠排出爛便及瀉下便的點數。
2.5新斯的明致腸推進功能亢進的腸運動試驗
小鼠70隻隨機分對照組、新斯的明組、樟樹根組、樟莖枝A組、樟莖枝B組、樟莖枝C組、陽性藥洛哌丁胺組，每組10隻，連續給藥3天，末次給藥前禁食不禁水21小時，各組灌胃相應受試藥物，給藥30分鐘後，小鼠肌肉注射新斯的明0.1毫克/千克，立即灌胃給予20％墨汁生理鹽水0.1毫升/10克，15分鐘後處死動物，打開腹腔分離腸系膜，取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，將小腸擺成直線，測量腸管長度作為小腸總長度，從幽門至墨汁前沿距離作為“墨汁在腸內推進距離”計算墨汁推進百分率，並注意觀察各組小腸容積是否增大。
墨汁推進百分率％＝墨汁在腸內推進距離（厘米）/小腸全長（厘米）*100％。
3.結果
3.1毛細血管通透性抗炎試驗
表4顯示陽性藥複方乙醯水楊酸組、樟樹根組、樟莖枝B組、樟莖枝C組小鼠依文思藍滲出液OD值與對照組比較有顯著性差異P＜0.05和P＜0.01，能明顯降低依文思藍的滲出量。
表4：對依文思藍滲出液OD值的影響（MEAN±SD，N＝10）
組別 | 劑量 | OD值 |
對照組 | / | 0.131±0.036 |
莖枝A | 3.96克生藥/千克 | 0.125±0.044 |
莖枝B | 3.96克生藥/千克 | 0.098±0.031* |
莖枝C | 3.96克生藥/千克 | 0.087±0.029** |
樟樹根 | 3.96克生藥/千克 | 0.091±0.037* |
陽性組 | 0.2克/千克 | 0.091±0.031* |
註：與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01
3.2小鼠醋酸致痛試驗
結果表明，樟樹根及不同直徑的莖枝對醋酸致疼痛引起的小鼠扭體次數均無明顯影響，但3厘米以上的莖枝對小鼠的扭體次數有一定的減少趨勢，見表5。
組別 | 劑量 | 扭體次數 |
對照組 | \ | 18.2±10.0 |
莖枝A | 3.96克生藥/千克 | 16.2±8.7 |
莖枝B | 3.96克生藥/千克 | 15.8±9.1 |
莖枝C | 3.96克生藥/千克 | 11.0±7.0 |
梯樹根 | 3.96克生藥/千克 | 15.3±8.7 |
陽性組 | 0.15克/千克 | 4,3±4.4* |
註：與對照組比較*P＜0.05。
3.3小鼠熱板法鎮痛試驗
結果表明，陽性藥羅通定能顯著增加小鼠痛閾值與給藥前比較有明顯的差異，不同直徑的莖枝及樟樹根對各時間點的痛閾值均無明顯影響，見表6。
組別 | 劑量 | 痛閾值（sec） | |||
0分鐘 | 30分鐘 | 60分鐘 | 90分鐘 | ||
對照組 | \ | 16.37±3.05 | 15.83±2.48 | 11.47±3.19 | 13.34±5.77 |
陽性組 | 54毫克/千克 | 17.48±4.38 | 40.12±15.83** | 52.68±12.44** | 57.69±5.65** |
莖枝A | 3.96克生藥/千克 | 17.03±4.35 | 14.23±3.79 | 11.26±2.42 | 12.78±4.97 |
莖枝B | 3.96克生藥/千克 | 16.54±3.86 | 13.58±7.94 | 112.58±8.91 | 11.81±4.97 |
莖枝C | 3.96克生藥/千克 | 16.02±4.811 | 17.47±8.01 | 14.68±6.30 | 12.58±4.38 |
樟樹根 | 3.96克生藥千克 | 16.26±5.18 | 11.37±3.60 | 11.06±2.66 | 10.51±4.21 |
註：與對照組比較**P＜0.01
3.4蓖麻油致瀉試驗
表7顯示陽性藥鹽酸洛哌丁胺，在不同時間段對蓖麻油引起的小鼠腹瀉均有顯著的抑制作用，不同直徑莖枝及樟樹根對小鼠腹瀉均無明顯改善作用。
表7：對蓖麻油致小鼠腹瀉的影響（MEAN±SD，N＝10）
組別 | 劑量 | 腹瀉便家計粒數 | |||||
1小時 | 2小時 | 3小時 | 4小時 | 5小時 | 6小時 | ||
對照組 | \ | 0.00±0.00 | 2.13±1.64 | 3.38±2.00 | 3.63±1.92 | 4.00±2.00 | 4.50±2.5` |
陽性組 | 5.3毫克/千克 | 0.00±0.00 | 0.10±0.32** | 0.10±0.32** | 0.60±0.84** | 0.90±1.10** | 2.00±1.94* |
莖枝A | 3.96克生藥/千克 | 0.33±1.00 | 1.11±1.45 | 2.78±`.79 | 3.44±2.55 | 4.00±2.92 | 4.44±3.`7 |
莖枝B | 3.96克生藥/千克 | 0.00±0.00 | 1.78±1.56 | 2.89±1.45 | 3.00±1.50 | 3.56±1.74 | 3.89±2.03 |
莖枝C | 3.96克生藥/千克 | 0.00*0.00 | 2.75*1.39 | 4.25±1.98 | 5.50*2.87 | 5.63±2.78 | 5.63±2.73 |
樟樹根 | 3.96克生藥/千克 | 0.60±1.26 | 2.50±2.01 | 4.20*2.04 | 5.00±2.16 | 5.50±2.55 | 5.50±2.55 |
註：**與對照組比較P＜0.01，*與對照組比較P＜0.05
3.5新斯的明致腸推進功能亢進腸運動試驗
表8顯示新斯的明組動物墨汁推進率明顯大於對照組，比較有顯著性差異P＜0.01，樟樹根、1-2厘米的莖枝及洛哌丁胺能明顯抑制新斯的明引起的腸推進功能亢進作用，與新斯的明比較有顯著性差異P＜0.05。
表8：對新斯的明引起小鼠腸推進功能亢進的影響（Mean±SD）
組別 | 劑量 | 推進率（％） |
對照組 | \ | 48.91±6.18 |
新斯的明 | \ | 77.54±14.90## |
陽性組 | 2.4毫克/千克 | 61.70±10.64* |
樟樹根 | 3.96克生藥/千克 | 61.21±13.98* |
莖枝A | 3.96克生藥/千克 | 61.60±8.80* |
莖枝B | 3.96克生藥/千克 | 69.9±11.86 |
莖枝C | 3.96克生藥/千克 | 74.24±10.49 |
註：與對照組比較##P＜0.01，與新斯的明組比較*P＜0.05。
4.結論
4.1毛細血管通透性實驗結果表明樟樹根、樟莖枝B、樟莖枝C均可減少炎症滲出量達到抗炎的效果，其中樟莖枝C的作用較強，而樟樹莖枝A並未表現出一定的抗炎作用；
4.2醋酸致小鼠扭體的鎮痛實驗顯示樟樹根及不同直徑的樟莖枝對小鼠扭體次數均無明顯影響，無明顯鎮痛作用，直徑3厘米以上的樟莖枝對小鼠扭體次數有一定的減少趨勢；
4.3樟樹根及不同直徑的樟莖枝對各時間點的痛閾值均無明顯影響，無明顯鎮痛作用；
4.4樟樹根及不同直徑樟莖枝對不同時間段小鼠腹瀉均無明顯改善作用，提示無明顯止瀉作用；
4.5新斯的明通過抑制膽鹼酯酶活性發揮完全擬膽鹼作用，對胃腸道平滑肌能促進胃收縮和增加胃酸分泌，並促進小、大腸，尤其是結腸的蠕動。結果顯示樟樹根、樟莖枝A能明顯抑制新斯的明引起的腸功能亢進作用，減少胃腸蠕動，樟莖枝B和樟莖枝C無明顯抑制腸蠕動作用。
實驗例3：複方製劑藥效對比研究
1.材料
1.1動物：KM小鼠18-22克，雄雌兼用，江西中醫學院試驗動物中心提供，合格證號：SCXK（贛）2005-0001；SD大鼠，220-280克，上海西普爾必凱實驗動物中心提供，合格證號：SCXK（滬）2008-0016。
1.2藥物
1.2.1受試藥：腸炎寧糖漿及採用等重量份樟莖枝替代樟樹根製得的腸炎寧製劑（處方、製法參見《中華人民共和國藥典》2010年版一部第771頁，其中樟莖枝A腸炎寧組、樟莖枝B腸炎寧組、樟莖枝C腸炎寧組分別是指用上述的樟莖枝A、B、C代替腸炎寧糖漿中的樟樹根後按相同方法分別製備得到的製劑）。
小鼠劑量：腸炎寧糖漿組劑量17.28克生藥/千克，為臨床用量9倍；樟莖枝A腸炎寧組劑量17.28克生藥/千克，為臨床用量9倍；樟莖枝B腸炎寧組劑量17.28克生藥/千克，為臨床用量9倍；樟莖枝C腸炎寧組劑量17.28克生藥/千克，為臨床用量9倍；
大鼠劑量：腸炎寧糖漿組劑量11.52克生藥/千克，為臨床用量6倍；樟莖枝A腸炎寧組劑量11.52克生藥/千克，為臨床用量6倍；樟莖枝B腸炎寧組劑量11.52克生藥/千克，為臨床用量6倍；樟莖枝C腸炎寧組劑量11.52克生藥/千克，為臨床用量6倍；
1.2.2陽性藥：醋酸地塞米松片（浙江仙琚製藥股份有限公司，批號：080219）劑量1.2毫克/千克，相當臨床用量9倍；複方乙醯水楊酸片（武漢遠大製藥集團有限公司，批號：090306）劑量0.2克/千克，相當臨床用量9倍；羅通定（成都市湔江製藥廠，規格30毫克/片，批號：081001）劑量54毫克/千克，相當臨床用量9倍；鹽酸洛哌丁胺膠囊（西安楊森製藥有限公司，規格：2毫克/粒）劑量2.4毫克/千克和5.3毫克/千克，相當臨床用量9倍和20倍；
1.3試劑：
醋酸，汕頭西隴化工有限公司，批號：081102；依文思藍：Sigma公司提供；墨汁：500毫升/瓶，廬山墨汁；蓖麻油：500毫升，USP級，上海晶純試劑有限公司，批號：1277；甲硫酸新斯的明注射液，1毫克:2毫升，上海信誼金朱藥業有限公司，批號：090301；牛肉膏，BR，北京奧博星生物技術有限責任公司，批號：20100202；氯化鈉，AR，汕頭市西隴化工廠有限公司，批號：080124；蛋白腖，BR，北京奧博星生物技術有限責任公司，批號：20091208；瓊脂粉，北京索萊寶科技有限公司；痢疾桿菌，大腸桿菌各菌株均來源於省臨檢中心試劑站；
1.4儀器：
足容積測量儀，YLS-7B，安徽淮北正華生物儀器設備有限公司；熱板儀，YLS-6B，安徽淮北正華生物儀器設備有限公司；紫外分光光度儀，津島UV-2550；代謝籠，ZHB6，淮北正華生物儀器設備有限公司；超淨工作檯，MCV-B161S（T）日本SANYO；多功能培養箱MIR-162，日本SANYO；CO2培養箱，MCO-17AIC日本SANYO；高壓鍋，LDZX-30KBS，安徽淮北正華生物儀器設備有限公司。
2.方法
2.1抗炎實驗
2.1.1醋酸致小鼠毛細血管通透性實驗
取健康小鼠60隻，完全隨機分為6組，每組10隻，分別為對照組、腸炎寧糖漿組、樟莖枝A腸炎寧組、樟莖枝B腸炎寧組、樟莖枝C腸炎寧組、陽性藥複方乙醯水楊酸片組。口服灌胃給藥，給藥容量為0.2毫升/10克，連續給藥4天，末次給藥前禁食不禁水16小時，給藥後1小時各組小鼠尾靜脈注射0.5％伊文思藍生理鹽水溶液0.1毫升/10克，隨即腹腔注射0.8％冰醋酸0.2毫升/只，記錄20分鐘，20分鐘後脫頸椎處死，剪開腹部皮膚和肌肉，用6毫升生理鹽水分兩次洗滌腹腔，合併洗滌液，3500轉/分離心10分鐘，取上清液於分光光度計590納米處測定OD值，進行方差檢驗。
2.1.2蛋清致大鼠足腫脹實驗
將36隻大鼠隨機分為6組，即：模型對照組、陽性藥地塞米松組、腸炎寧糖漿組、樟莖枝A腸炎寧組、樟莖枝B腸炎寧組、樟莖枝C腸炎寧組。模型對照組大鼠灌予生理鹽水，其餘給藥組大鼠按1毫升/100克體重灌胃給予相應的藥物，1次/天，連續5天，第5天用記號筆在大鼠左後肢踝關節周圍做一標記，用足容積測量儀測定每隻大鼠左後肢正常足跖容積，之後給藥，給藥後30分鐘大鼠左後肢足跖皮下注射蛋清0.1毫升/只致炎。測量致炎後30分鐘、1小時、2小時、4小時、6小時足跖腫脹容積，計算足趾腫脹度和抑制率（％）。
足趾腫脹度＝致炎後的足容積-致炎前的足容積。
抑制率（％）＝（對照組平均足腫脹度-給藥組平均足腫脹度）/對照組平均足腫脹度*100％。
2.2鎮痛實驗
2.2.1小鼠熱板法鎮痛實驗
篩選合格小鼠：每次1隻放在熱板上，出現疼痛反應舔後足時間小於9秒或大於24秒或跳躍者棄之，將合格小鼠隨機分為對照組、腸炎寧糖漿組、樟莖枝A腸炎寧組、樟莖枝B腸炎寧組、樟莖枝C腸炎寧組、陽性藥羅通定組，每組10隻，測其正常痛閾值作為給藥前痛閾值，連續給藥3天，給藥量0.2毫升/10克，最後一次給藥前禁食不禁水12小時，分別測量給藥後30分鐘、60分鐘、90分鐘痛閾值。如60秒仍無反應，將小鼠取出，其痛閾值以60秒計算。
2.2.2小鼠醋酸鎮痛實驗
取健康小鼠60隻，完全隨機分為6組，每組10隻，分別為對照組、腸炎寧糖漿組、樟莖枝A腸炎寧組、樟莖枝B腸炎寧組、樟莖枝C腸炎寧組、陽性藥複方乙醯水楊酸片組。口服灌胃各藥，給藥容量為0.2毫升/10克，連續給藥4天，末次給藥前禁食不禁水16小時，給藥後1小時各組小鼠尾靜脈注射0.5％伊文思藍生理鹽水溶液0.1毫升/10克，隨即腹腔注射0.8％冰醋酸0.2毫升/只，記錄20分鐘內小鼠扭體次數。
2.3腸功能實驗
2.3.1正常小腸推進運動試驗
雄性小鼠50隻隨機分為空白對照組、腸炎寧糖漿組、樟莖枝A腸炎寧組、樟莖枝B腸炎寧組、樟莖枝C腸炎寧組，每組10隻，連續給藥3天，一天一次0.2毫升/10克，最後一次給藥前禁食不禁水22小時，各組灌胃相應受試藥物，給藥約1小時後，再灌胃給予20％墨汁生理鹽水0.1毫升/10克，15分鐘後處死動物，打開腹腔分離腸系膜，取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，將小腸擺成直線，測量腸管長度作為小腸總長度，從幽門至墨汁前沿距離作為“墨汁在腸內推進距離”計算墨汁推進百分率，並注意觀察各組小腸容積是否增大。
墨汁推進百分率％＝墨汁在腸內推進距離（厘米）/小腸全長（厘米）*100％。
2.3.2新斯的明致推進機能亢進的小腸運動試驗
將KM雌性小鼠70隻隨機分為空白對照組、新斯的明組、腸炎寧糖漿組、樟莖枝A腸炎寧組、樟莖枝B腸炎寧組、樟莖枝C腸炎寧組、陽性藥洛哌丁胺組，每組10隻，陽性藥洛哌丁胺組連續給藥3天，末次給藥前禁食不禁水22小時，各組灌胃相應受試藥物，給藥約1小時後，小鼠肌肉注射新斯的明0.1毫克/千克，立即灌胃給予20％墨汁生理鹽水0.1毫升/10克，15分鐘後處死動物，打開腹腔分離腸系膜，取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，將小腸擺成直線，測量腸管長度作為小腸總長度，從幽門至墨汁前沿距離作為“墨汁在腸內推進距離”計算墨汁推進百分率，並注意觀察各組小腸容積是否增大。
墨汁推進百分率％＝墨汁在腸內推進距離（厘米）/小腸全長（厘米）*100％。
2.4小鼠蓖麻油的止瀉實驗
取小鼠48隻，適應性飼養後隨機分對照組、陽性洛哌丁胺組、腸炎寧糖漿組、樟莖枝A腸炎寧組、樟莖枝B腸炎寧組、樟莖枝C腸炎寧組，每組8隻，連續給藥4天，0.2毫升/10克，末次給藥前禁食不禁水4小時，給藥後1小時每隻小鼠灌服蓖麻油0.3毫升/10克，於代謝籠中觀察6小時內小鼠排出爛便及瀉下便的點數。
3.結果
3.1抗炎作用
3.1.1毛細血管通透性實驗
結果表明，陽性藥複方乙醯水楊酸和樟莖枝C腸炎寧能明顯降低依文思藍的滲出量與對照組比較有顯著性差異P＜0.01、P＜0.05，其餘各組對依文思藍的滲出量無明顯降低作用，見表9。
表9：對小鼠依文思藍滲出量OD值的影響（MEAN±SD，N＝10）
組別 | 劑量 | OD值 |
對照組 | / | 0.457±0.140 |
陽性組 | 0.2克/千克 | 0.270±0.115** |
樟莖枝A腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 0.480±0.221 |
樟莖枝B腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 0.446±0.108 |
樟莖枝C腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 0.345±0.163* |
腸炎寧糖漿 | 17.28克生藥/千克 | 0.428±0.217 |
註：與對照組比較**P＜0.01；*P＜0.05
3.1.2蛋清足趾腫脹實驗
結果表明，陽性藥組能明顯降低大鼠足趾腫脹程度與對照組比較有顯著性差異分別為P＜0.01、P＜0.05，腸炎寧糖漿及莖枝腸炎寧各組對大鼠足腫脹無明顯抑制作用，見表10。
組別 | 劑量 （克生藥/千克） | 體重 | 致炎後各時間點腫脹度 | ||||
0.5小時 | 1小時 | 2小時 | 4小時 | 6小時 | |||
對照組 | 233±21 | 0.84±0.17 | 0.94±0.16 | 0.90±0.16 | 0.77±0.23 | 0.46±0.12 | |
陽性組 | 1,2毫克/千克 | 181±11* | 0.28±0.10** | 0.29±0.09** | 0.32±0.10** | 0.40±0.06** | 0.21±0.06** |
樟莖枝A腸炎寧 | 11.52 | 221±11 | 0.81±0.33 | 1.05±0.38 | 1.03±0.28 | 0.85±0.23 | 0.53±0.18 |
棒莖枝B腸炎寧 | 11.52 | 219±19 | 0.81±0.23 | 0.95±0.30 | 0.82±1.30 | 0.79±0.16 | 0.54±0.20 |
樟莖枝C腸炎寧 | 11.52 | 217±22 | 0.72±0.30 | 0.75±0.33 | 0.82±0.27 | 0.73±0.23 | 0.44±0.20 |
腸炎寧糖漿 | 11.52 | 208±7 | 0.86±0.05 | 1.02±0.11 | 0.96±0.07 | 0.76±0.06 | 0.46±0.07 |
註：與對照組比較**P＜0.01，*P＜0.05
3.2鎮痛作用
3.2.1熱板法鎮痛實驗
陽性藥羅通定組給藥後的痛閾值與給藥前比較有明顯增加，腸炎寧糖漿及莖枝腸炎寧各組給藥前與給藥後各時間點比較均無顯著性差異，見表11。
表11：對小鼠的鎮痛作用的影響（熱板法）（Mean±SD，N＝10）
\ | 給藥前 | 給藥後30分鐘 | 給藥後60分鐘 | 給藥後90分鐘 | |
對照組 | \ | 13.84±3.61 | 12.44*2.76 | 12.87±2.25 | 12.62*1.90 |
用性組 | 54毫克/千克 | 12.04±2.41 | 30.34±6.76** | 54.08±10.10** | 56.87±7.37** |
樟莖枝A腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 13.20±3.13 | 12.59±3.46 | 9.90±1.31 | 11.97±3.03 |
樟莖枝B腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 12.57±2.41 | 13.45±3.28 | 11.40±3.23 | 13.59±3.96 |
樟莖枝C腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 12.33±1.97 | 11.92±3.34 | 12.34±2.34 | 11.34±2.52 |
腸炎寧糖漿 | 17.28克生藥/千克 | 13.37±2.70 | 12.45±3.22 | 12.71±2.46 | 12.98±178 |
註：與對照組比較**P＜0.01
3.2.2小鼠醋酸鎮痛實驗
從下表得出腸炎寧糖漿和樟莖枝C腸炎寧能減少小鼠的扭體次數，與對照組比較有顯著性差異；樟莖枝B腸炎寧對扭體次數有一定的減少趨勢，見表12。
組別 | 劑量 | 扭體次數 |
對照組 | / | 28.2±11.0 |
陽性組 | 0.2克/千克 | 9.4±11.9** |
樟莖枝A腸炎寧 | 17.28克生匆/千克 | 26.3±15.4 |
樟莖枝B腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 18.4±13.2 |
樟莖枝C腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 15.4±9.5* |
腸炎寧糖漿 | 17.28克生藥/千克 | 16.4±11.1* |
註：與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01
3.3腸功能作用
3.3.1正常小腸推進運動試驗
下表可知，腸炎寧糖漿及莖枝腸炎寧各組對小鼠腸運動無明顯抑制或推進作用，見表13。
組別 | 劑量 | 體重 | 推進率（％） |
對照組 | \ | 20.5±2.0 | 68.1±10.6 |
樟莖枝A腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 20.2±1.8 | 64.5±9.6 |
樟莖枝B腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 21.1±1.3 | 63.2±14.6 |
樟莖枝C腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 20.4±1.6 | 61.4±14.4 |
腸炎寧糖漿 | 17.28克生藥/千克 | 20.2±1.9 | 62.8±16 |
3.3.2新斯的明致推進機能亢進的小腸運動試驗
腸炎寧糖漿及莖枝腸炎寧各組對新斯的明致腸推進功能亢進小腸運動均無明顯抑制作用，見表14。
表14：對腸推進功能亢進小腸運動的影響（Mean±SD，n＝10）
組別 | 劑量 | 體重 | 推進率（%） |
對照組 | \ | 23.2±1.4 | 54±10.9 |
新斯的明組 | \ | 23.5±1.5 | 73.6±17.4# |
陽性組 | 0.2克/千克 | 22.7±1.6 | 57±10.1* |
樟莖枝A腸炎寧 | 17.28克生匆/千克 | 23.3±1.4 | 84.4±4.6 |
樟莖枝B腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 23.1±0.8 | 77.7±17 |
樟莖枝C腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 23±0.9 | 72.3±13.2 |
腸炎寧糖漿 | 17.28克生藥/千克 | 23.6±1.1 | 76.9±8.9 |
註：與空白對照組比較#P＜0.05；與新斯的明組比較*P＜0.05
3.4小鼠蓖麻油的止瀉實驗
表15顯示陽性藥鹽酸洛哌丁胺，樟莖枝C腸炎寧在不同時間段對蓖麻油引起的小鼠腹瀉均有顯著的抑制作用，腸炎寧糖漿於致瀉後1-4小時有明顯止瀉作用，樟莖枝B腸炎寧於致瀉後1-2小時有明顯止瀉作用，樟莖枝A腸炎寧作用效果在不同時間段均不明顯。
組別 | 劑量 | 累計稀便粒數 | |||||
1小時 | 2小時 | 3小時 | 4小時 | 5小時 | 6小時 | ||
對照組 | \ | 3.6±2.4 | 5.1±2.4 | 6.0±2.2 | 6.7±1.8 | 6.9±1.8 | 7.0±1.8 |
陽性組 | 5.3毫克/千克 | 0.1±0.4** | 1.4±1.6** | 3.0±1.8** | 3.5±2.1** | 4.01±1.5** | 4.1±1.3** |
樟莖枝A腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 1.3±2.3 | 3.1±2.8 | 3.9±2.5 | 4.5±2.5 | 5.1±3.6 | 5.5±3.5 |
樟莖枝B腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 0.6±1.1 | 2.4±1.3* | 3.6±2.2 | 4.2±2.8 | 5.1±3.1 | 5.8±3.7 |
樟莖枝C腸炎寧 | 17.28克生藥/千克 | 0.4±0.4** | 1.0±1.0* | 2.0±1.5** | 3.0±1.5** | 3.6±1.8* | 4.1±1.8* |
腸炎寧柚漿 | 17.28克生藥/千克 | 1.3±1.0* | 1.9±2.4* | 2.3±2.3* | 3.8±2.3* | 4.4±2.7 | 5.1±3.4 |
註：**與對照組比較P＜0.01；*與對照組比較P＜0.05
4.結論
4.1樟莖枝C腸炎寧有一定的抗炎作用，腸炎寧糖漿及其餘莖枝腸炎寧各組均無明顯抗炎作用；
4.2腸炎寧糖漿和樟莖枝C腸炎寧有一定的外周性鎮痛作用，其餘莖枝腸炎寧各組均無明顯鎮痛作用；
4.3腸炎寧糖漿和樟莖枝腸炎寧各組對腸功能均無影響；
4.4腸炎寧糖漿、樟莖枝B腸炎寧和樟莖枝C腸炎寧有顯著的止瀉作用，其中樟莖枝C腸炎寧的止瀉作用最持久。
綜上所述，樟莖枝C腸炎寧與腸炎寧糖漿都具有一定的外周性鎮痛作用和止瀉作用，其中樟莖枝C腸炎寧止瀉作用更持久，樟莖枝C腸炎寧還具有一定的抗炎作用。由此可見，樟莖枝C用於製備治療腸炎藥物組合物具有藥效學基礎，相對於2011年6月前技術而言產生了不可預料的更顯著的效果，該申請組合物用於治療急慢性腸炎具有重要意義。
實施案例
實施例1：糖漿劑
地錦草660克、金毛耳草900克、樟莖枝660克、香薷330克、楓樹葉330克。
以上五味，加水煎煮二次，每次2小時，合併濾液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20（80℃）的清膏，加乙醇2倍量，攪拌，靜置，濾過，濾液濃縮至適量，趁熱加入蔗糖600克使溶解，濾過，濾液加尼泊金乙酯、香料適量，攪勻，加水調整總量至1000毫升，即得。
實施例2：片劑
地錦草660克、金毛耳草900克、樟莖枝660克、香薷330克、楓樹葉330克。
以上五味，取部分地錦草、香薷，分別粉碎成細粉，過80-120目篩，地錦草粉用文火炒至淡棕色至棕褐色，與香薷粉混勻；另取上述二味藥物剩餘部分和金毛耳草、樟莖枝、楓樹葉，加水提取2-3次，每次2-3小時，濾過，合併濾液，減壓濃縮至在80℃時測相對密度115-1.30，放冷，與上述藥粉混合，乾燥，粉碎成細粉，以0.1％樟腦油乙醇溶液潤濕製成顆粒，乾燥，加入適量輔料，壓片，包衣，即得。
實施例3：膠囊劑
地錦草660克、金毛耳草900克、樟莖枝660克、香薷330克、楓樹葉330克。
以上五味，加水煎煮二次，每次2小時，合併濾液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20（80℃）的清膏，加乙醇2倍量，攪拌，靜置，濾過，濾液濃縮成稠膏，加入適量輔料，混勻，制粒，乾燥，裝入膠囊，即得。
實施例4：丸劑
地錦草660克、金毛耳草900克、樟莖枝660克、香薷330克、楓樹葉330克。
以上五味，加水煎煮二次，每次2小時，合併濾液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20（80℃）的清膏，加乙醇2倍量，攪拌，靜置，濾過，濾液濃縮成稠膏，加入適量輔料，混勻，制丸，乾燥，打光，即得。
實施例5：服液
地錦草660克、金毛耳草900克、樟莖枝660克、香薷330克、楓樹葉330克。
以上五味，加水煎煮二次，每次2小時，合併濾液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20（80℃）的清膏，加乙醇2倍量，攪拌，靜置，濾過，濾液濃縮至適量，濾過，濾液加輔料適量，加水調整總量至1000毫升，攪勻，濾過，即得。
實施例6：顆粒劑
地錦草660克、金毛耳草900克、樟莖枝660克、香薷330克、楓樹葉330克。
以上五味，加水煎煮二次，每次2小時，合併濾液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20（80℃）的清膏，加乙醇2倍量，攪拌，靜置，濾過，濾液濃縮成清膏，噴霧乾燥成細粉，加入適量輔料，混勻，製成顆粒，乾燥，即得。
實施例7：咀嚼片
地錦草660克、金毛耳草900克、樟莖枝660克、香薷330克、楓樹葉330克。
以上五味，加水煎煮二次，每次2小時，合併濾液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20（80℃）的清膏，加乙醇2倍量，攪拌，靜置，濾過，濾液濃縮成清膏，噴霧乾燥成細粉，加入適量輔料，混勻，制粒，乾燥，壓片，即得。
榮譽表彰
2016年12月7日，《一種治療急、慢性腸炎的藥物組合物》獲得第十八屆中國專利優秀獎。
