UPLC

超高效液相色譜（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）色譜理論認為提高色譜柱的效能（efficiency）就能增加儀器的解析度（resolution），而運用粒徑低於2μm的小顆粒無疑是增加效能的好方法。但減小固定相的粒度以增加色譜柱效能一直是色譜儀器科學的瓶頸，因為小顆粒不僅要求系統能承受高於目前極限壓力（比如6000psi/400bar），需要更小的系統體積（死體積），並且需要能適應可能只有幾秒峰寬的高速檢測器。

基本介紹

• 中文名：超高效液相色譜
• 外文名：Ultra Performance Liquid Chromatography
• 簡寫：UPLC
• 公司：Waters公司

簡介

Waters公司在傳統HPLC系統基礎上開發的超高效液相色譜（ACQUITY Ultra PerformanceLC）系統突破了色譜科學的瓶頸，充分利用了傳統HPLC望塵莫及的小粒度色譜柱的優勢，使色譜分離的解析度達到新的高度。

優勢

與傳統的高效液相色譜（HPLC）相比，UPLC具有以下優勢：

1.高分離度（ultra resolution）

根據液相色譜分離的解析度方程，解析度正比於柱效能的平方根

而根據范迪姆特（Van Deemter）色譜理論，柱效反比於系統固定相粒度大小。UPLC系統運用的固定相粒度能達到1.7μm，根據上述方程，該系統達到的效能將比5μm粒度系統高70%，而比3.5μm高40%。

2. 高速度（ultra speed）

在保證得到同樣質量數據的前提下，UPLC能提供單位時間內更多的信息量。在不影響解析度的的情況下，小粒度能提供更高的分析速度，同樣也能使柱長減少，根據Van Deemter色譜理論，最優流速反比於粒度大小。

例如，運用1.7μm的顆粒，相對於5μm顆粒，在不影響柱效的情況下，柱長將可以立方級的減少，而且可以在3倍的流速下運行，相同的解析度情況下，分離速度提高了9倍。

3. 靈敏度（sensitivity）

過去對於提高靈敏度的研究大都集中於檢測器上，不論是光學檢測器還是質量檢測器。但是，其實運用UPLC也能提高分析的靈敏度。

UPLC能提高柱效N，從而使峰寬w變的更窄，而峰高卻增加了，同時，由於UPLC運用了更短的柱子（柱長L更小），進一步增加了峰高。因此，在提高柱效的同時，運用1.7μm的UPLC系統比5μm和3.5μm的系統靈敏度分別提高了70%和40%，而在柱效下相同情況下，能分別提供3倍和2倍的靈敏度。

在儀器工藝方面，Waters ACQUITY UPLC™採用了新型的色譜填料及裝填技術，配備了優秀的超高壓液相色譜泵、自動進樣器、高速檢測器，並最佳化了系統的綜合設計，使儀器分析能力大大增強。

由於UPLC是一個新興的領域，Waters ACQUITY UPLC™系統也出現不久，目前已發表的套用資料還很不足。與傳統的HPLC相比，UPLC的速度、靈敏度及分離度分別是HPLC的9倍、3倍及1.7倍。目前，UPLC多套用於代謝組學分析及其他一些生化領域，在天然產物的分析方面運用也逐漸興起，因為在這些領域深入研究需要更高的分析精度。使用UPLC與Q-Tof-MS或trap-tof-MS等質譜檢測器連線，對天然產物分析，特別是中藥研究領域的發展將是一個極大的促進。