《Twist-1相關miRNAs在肝細胞肝癌發生髮展中的作用及機制》是依託天津醫科大學，由趙楠擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Twist-1相關miRNAs在肝細胞肝癌發生髮展中的作用及機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：趙楠
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
Twist-1在腫瘤血管生成及上皮間充質轉變中都發揮著重要的作用，從而也影響著腫瘤的發生和發展，但其作用的分子機制有待深入研究闡明。前期共篩選出11個Twist-1可能直接調控的miRNAs，確定2個血管生成擬態(VM)相關和5個上皮間充質轉變（EMT）相關。本項目擬通過細胞增殖、遷移、侵襲、管腔形成和小鼠移植瘤模型等功能實驗首先探索明確Twist-1相關miRNAs調控的VM及EMT的具體環節、靶基因及其作用機制，與腫瘤血管生成及腫瘤生長和轉移的關係，然後選擇臨床病理標本驗證Twist-1、相關miRNAs、靶基因構成的VM及EMT調控網路與臨床腫瘤表現的關係，探討該網路各節點在臨床診斷、治療和預後中的意義。本項目將從miRNAs及其功能通路角度闡明Twist-1對VM及EMT的調控機制，為發展基於血管生成及上皮間充質轉變的腫瘤分子診斷、治療和預後新策略奠定基礎。
結題摘要
Twist-1在腫瘤血管生成及上皮間充質轉變中都發揮著重要的作用，從而也影響著腫瘤的發生和發展，但其作用的分子機制有待深入研究闡明。Twist-1 和 microRNAs (miRNAs) 均被報導與腫瘤轉移、侵襲和血管生成有關，而Twist-1 與miRNAs的關係及其在肝細胞肝癌(HCC) 中的作用尚未報導。本研究的目的在於明確Twist-1相關miRNA表達譜並分析Twist-1在肝細胞肝癌（HCC）轉移和血管生成擬態（VM）形成中的作用是否通過調控miRNA的表達來實現。通過miRNAs 表達譜晶片及Chip-seq技術，篩選出Twist-1 相關miRNAs，並通過qRT-PCR驗證差異表達miRNAs；檢測人體HCC冰凍組織中miR-27a-3p、miR-26b-5p和Twist-1的表達情況，並分析二者的關係及其與病人臨床病理資料之間的關係；通過wound healing遷移、Transwell侵襲、粘附、管道形成及明膠酶譜等功能實驗分析miR-27a-3p和miR-26b-5p在HCC中的作用；進一步通過體內和體外實驗分析Twist-1 和miR-27a-3p及miR-26b-5p發揮作用的分子機制。miR-27a-3p、miR-26b-5p 與 Twist-1在肝癌細胞系和肝癌冰凍組織中的表達均呈負相關。Gain- 和 loss-功分析均證實了miR-27a-3p和miR-26b-5p對腫瘤的抑制作用；miR-27a-3p及miR-26b-5p表達低與HCC 早期轉移相關；miR-27a-3p和miR-26b-5p均可抑制上皮間充質轉變（EMT）相關分子的表達，並抑制腫瘤侵襲和轉移；雙螢光素酶報告基因實驗結果證實miR-27a-3p可直接作用於VE-cadherin，miR-26b-5p可以直接作用於SMAD1，並抑制VM形成。結論：18 miRNAs 在Twist-1上調的HCC細胞系中呈現有統計學意義的差異表達。其中miR-27a-3p和miR-26b-5p可以抑制VM形成和腫瘤轉移。miR-27a-3、miR-26b-5p分別下調VE-cadherin和SMAD1的 表達和抑制EMT 的作用揭示了 Twist-1 在腫瘤中的作用的潛在分子機制。本研究為開展針對Twist-1及其相關分子生物學事件的腫瘤分子診斷、治療和/或預後策略奠定基礎。
