miR-15a-3p和miR-16-1-3p通過負調控Twist1抑制胃癌細胞浸潤和轉移

《miR-15a-3p和miR-16-1-3p通過負調控Twist1抑制胃癌細胞浸潤和轉移》是依託廈門大學，由王濤擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：miR-15a-3p和miR-16-1-3p通過負調控Twist1抑制胃癌細胞浸潤和轉移
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：王濤
• 依託單位：廈門大學

項目摘要

研究表明microRNAs(miRNAs)可以調控一系列腫瘤相關基因的表達影響腫瘤的發生髮展，但miRNAs在胃癌中的異常變化及其調控的分子機制依然缺乏了解。我們前期的研究發現，在胃癌中低表達的miR-15a-3p和miR-16-1-3p可以通過miRNA介導的基因沉默機制來對Twist1進行轉錄後調控，影響胃癌細胞EMT的發生髮展。在本項申請中，我們將利用一系列的細胞、分子生物學技術、實驗動物模型以及臨床組織樣品，研究miR-15a-3p和miR-16-1-3p在浸潤型胃癌中調控Twist1和參與胃癌的發生髮展機制。該項目的成功實施可望揭示胃癌發生髮展的一個新機制。該項研究將有可能找到新的胃癌臨床診斷的早期標記，相關機制的闡明也將為胃癌的預防和治療提供新的思路。

結題摘要

microRNAs（miRNAs）是一類新的基因調控因子，研究表明miRNAs可以調控一系列腫瘤相關基因的表達影響腫瘤的發生髮展，但miRNAs在胃癌中的異常變化及其調控的分子機制依然缺乏了解。在本項研究中，我們深入探究了miR-15a-3p和miR-16-1-3p對Twist1的表達調控以及對間質上皮轉化（EMT）進程的影響。生物信息學研究發現，Twist1基因的3’UTR上分別有一個miR-15a-3p和miR-16-1-3p的miRNA識別位點（MRE）。細胞轉染實驗顯示，miR-15a-3p和miR-16-1-3p過表達可以顯著抑制Twist1-3’UTR報告基因的螢光素酶活性和EMT信號通路相關蛋白如TWIST1，N-cadherin，α-SMA和Fibronectin的蛋白表達水平和基質水解蛋白酶MMP9和MMP2的活性進而抑制細胞遷移、侵襲、克隆形成能力和在裸鼠體內的成瘤能力。相反，抑制miR-15a-3p和miR-16-1-3p後顯著上調了TWIST1， N-cadherin，α-SMA和Fibronectin的蛋白表達水平。最後，qPCR和Western Blot分析顯示，miR-15a-3p和miR-16-1-3p在人胃癌組織中呈現很低的表達水平，而Twist1的mRNA和蛋白水平顯著升高表明miR-15a-3p和miR-16-1-3p的異常下調可能對Twist1和EMT進程的異常調控以及胃癌的發生髮展有重要貢獻。綜上所述，我們的結果表明Twist1是miR-15a-3p和miR-16-1-3p的直接靶基因，miR-15a-3p和miR-16-1-3p通過與Twist1-3’ UTR 上的MRE直接結合抑制Twist1及Twist1-EMT信號通路的表達。通過靶向Twist1，miR-15a-3p和miR-16-1-3p抑制胃癌細胞在體內和體外的生長及成瘤能力。總之，我們的研究揭示了miR-15a-3p和miR-16-1-3p在胃癌中Twist1的調控機制，miR-15a-3p，miR-16-1-3p和Twist1有可能可以被開發用於EMT相關的腫瘤和人類疾病的預防與治療。項目已正式發表2篇SCI研究論文；此外，項目延伸部分還獲得了一項國際PCT專利。培養碩士研究生2名；課題負責人晉升為助理教授。項目超額完成研究計畫，達到預期的研究目標。