Smad4在小鼠胃癌發生過程中的調控作用及相關機制

《Smad4在小鼠胃癌發生過程中的調控作用及相關機制》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由孫彥洵擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：Smad4在小鼠胃癌發生過程中的調控作用及相關機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：孫彥洵
• 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院

中文摘要

本研究利用基於Cre-LoxP系統的條件基因剔除技術在小鼠胃上皮細胞中特異性地剔除Smad4基因，通過在生物整體水平、組織細胞水平和分子水平對胃組織特異性Smad4基因剔除小鼠的表型進行系統的分析。同時利用高通路晶片，染色質免疫沉澱(CHIP)等方法檢測組蛋白修飾因子對靶基因的選擇性和表達的影響，研究組蛋白修飾異常是否在Smad4剔除小鼠胃癌發生過程中發揮作用，從表觀遺傳學水平深入研究Smad4介導的TGF-beta信號調節小鼠胃癌發生的作用及其可能機制。

結題摘要

胃癌是一種常見的惡性腫瘤。Smad4作為抑癌基因在胃癌中常出現缺失，突變或者表達下降。以前的研究發現微環境如T細胞Smad4對於維持胃腸道上皮穩態至關重要。但上皮細胞Smad4在胃癌發生髮展中的功能未見報導。在本研究中我們利用Cre-loxp系統介導的組織特異性基因敲除技術在小鼠腺胃上皮細胞特異性敲除Smad4基因，並研究Smad4基因敲除對胃癌發生髮展的影響。首先我們研製了一種新的胃上皮細胞特異性Cre重組酶轉基因小鼠，該小鼠利用腫瘤蛋白52（Tumor protein D52，TPD52）的啟動子指導Cre重組酶在胃上皮細胞特異性表達。利用TPD52-Cre小鼠與Smad4條件基因敲除小鼠雜交獲得了胃上皮細胞特異性Smad4基因敲除小鼠。Smad4敲除小鼠出生時表現正常，但3月齡後逐漸出現衰弱、體重下降，並在出生後12個月內全部死亡。組織形態學研究表明Smad4敲除小鼠出生後逐漸出現胃上皮過度增生、腺瘤和浸潤性腺癌。BrdU標記實驗表明Smad4敲除導致胃上皮細胞增殖旺盛。在分子水平上，我們發現Smad4敲除導致其下游靶分子cyclin D1和Spp1表達上升以及其他分子如CD44和p-Smad2的改變。綜上所述，我們研製出了一種新的胃癌小鼠模型，該小鼠模型能夠模擬人類胃癌發生髮展的病理和分子改變。此外，我們研製了一種新的胃上皮細胞特異性的Cre重組酶轉基因小鼠，為研究其他基因在胃癌的發生髮展機制提供了理想工具。