《Ref-1介導的MAPK信號通路參與卵巢癌鉑類耐藥的機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由張穎擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Ref-1介導的MAPK信號通路參與卵巢癌鉑類耐藥的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張穎
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
卵巢癌是常見惡性腫瘤，鉑類耐藥是臨床面臨主要問題。前期發現①順鉑誘導卵巢癌細胞Ref-1表達升高，Ref-1 siRNA增加順鉑誘導的細胞凋亡；②順鉑誘導卵巢癌細胞p38磷酸化，Ref-1過表達降低順鉑誘導的p38磷酸化並減少細胞凋亡。結果提示Ref-1介導MAPK信號通路參與調控順鉑誘導的細胞凋亡。本課題擬通過RT-PCR、western blot、TUNEL、FCM等技術觀察順鉑誘導凋亡與Ref-1、MAPK信號通路的關係；構建Ref-1質粒、Ref-1Cys65突變質粒和Ref-1 siRNA，從體內和體外實驗觀察Ref-1對MAPK信號通路及順鉑誘導凋亡的影響；通過檢測MAPK通路相關分子表達及活性和下游凋亡蛋白表達探討Ref-1介導MAPK通路對順鉑誘導凋亡的調控機制。本課題將闡明Ref-1介導的MAPK通路在腫瘤細胞對鉑類藥物應激中的作用機制，為腫瘤細胞鉑類耐藥機制提供新依據。
結題摘要
卵巢癌是常見惡性腫瘤，鉑類耐藥是臨床面臨主要問題。本課題在前期工作基礎上發現：（1）卵巢癌細胞順鉑耐藥性與ROS水平、MAPK通路活化相關；（2）體內試驗和體外實驗均證實Ref-1過表達可顯著提高卵巢癌細胞增殖、遷移和侵襲能力，降低卵巢癌細胞對鉑類的敏感性，其中Ref-1氧化還原功能對於促進細胞增殖、侵襲遷移、鉑類耐藥形成過程中發揮主導作用；（3）mRNA晶片、microRNA晶片篩選獲得Ref-1WT組、Ref-1Cys65組之間的差異基因，根據晶片篩選結果在卵巢癌細胞中初步驗證Ref-1通過氧化還原調控RAP1A/MAPK/ERK信號通路，從而參與了卵巢癌細胞鉑類耐藥性的形成；（4）miRNA晶片結果顯示與Ref-1氧化還原功能相關的miRNA靶基因主要富集在腫瘤通路、細胞骨架調控、MAPK通路、粘附連線、ECM受體通路等方面。
