《雙功能酶APE1參與卵巢癌鉑類耐藥的機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由辛曉燕擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：雙功能酶APE1參與卵巢癌鉑類耐藥的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：辛曉燕
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
化療耐藥是卵巢癌復發轉移的主要原因，尋求有效耐藥逆轉策略是提高卵巢癌療效的關鍵。前期研究發現，①雙功能酶APE1與卵巢癌發生髮展及預後有關；②在鉑類耐藥的卵巢癌組織和細胞中均出現APE1高表達；③APE1siRNA顯著提高卵巢癌細胞對順鉑的敏感性，而APE1重組質粒顯著降低卵巢癌細胞對順鉑的敏感性，提示APE1參與卵巢癌鉑類耐藥形成。但APE1參與卵巢癌鉑類耐藥的機制未見報導。本課題擬在前期工作基礎上，著眼於雙功能酶APE1的細胞定位與其DNA修復和氧化還原兩大功能的聯繫，構建不同APE1功能的重組質粒，通過RT-PCR、western blot、雷射共聚焦及凋亡檢測等技術，觀察APE1不同功能對卵巢癌細胞鉑類敏感性的影響，探討APE1參與腫瘤細胞鉑類耐藥的機制，並以亞硝基化為切入點，探索APE1亞硝基化狀態對其細胞定位和兩大功能的調控。從而為以APE1為靶點逆轉腫瘤細胞耐藥提供依據。
結題摘要
化療耐藥是卵巢癌復發轉移的主要原因，尋求有效耐藥逆轉策略是提高卵巢癌療效的關鍵。本課題在前期工作基礎上，從體內、體外實驗兩方面進一步探討雙功能酶APE1/Ref-1的DNA修復和氧化還原兩大功能對卵巢癌細胞生物學行為及鉑類耐藥的影響，並初步探討APE1/Ref-1的作用機制。我們首先用免疫組化檢測了120例卵巢癌組織中APE1/Ref-1的表達情況，統計分析表明APE1/Ref-1胞漿表達與卵巢癌組織病理類型、FIGO分期、細胞分化程度、鉑類耐藥及不良預後有關。體內實驗和體外實驗均證實，APE1/Ref-1過表達可顯著促進卵巢癌細胞增殖和侵襲能力，並降低卵巢癌細胞順鉑敏感性，其中APE1/Ref-1的氧化還原功能發揮主要作用。進一步研究我們發現APE1/Ref-1過表達可通過上調增殖相關因子（Akt、cyclinD1）和侵襲相關因子（MMP2、E-cadherin）表達水平促進卵巢癌細胞增殖能力和侵襲能力，並使卵巢癌細胞S期比例顯著增加。APE1過表達可降低卵巢癌細胞對順鉑的敏感性，其機制可能為：（1）APE1過表達可一定程度抑制 Caspase-3 的活化及降低 Bax 蛋白的表達，增加 Bcl-2 蛋白的表達；（2）APE1過表達可一定程度抑制順鉑誘導的卵巢癌細胞凋亡過程中細胞色素C從線粒體向胞質釋放。利用基因晶片技術，我們發現APE1/Ref-1調控的信號通路主要涉及MAPK信號通路、細胞粘附、細胞吞噬、阿米巴運動等方面並與TP53、HIF1α、PCNA等基因存在調控關係。
