PHA淋巴細胞轉化試驗 是 T淋巴細胞與有絲分裂原在體外共同培養時，受到後者的刺激可發生形態學和生物化學的變化，部分小淋巴細胞轉化為不成熟的母細胞，並進行有絲分裂的試驗方法。
基本介紹
- 名稱：PHA淋巴細胞轉化試驗
- 所屬分類：免疫學
正常值,臨床意義,注意事項,檢查過程,相關疾病,相關症狀,
正常值
計數淋巴細胞200個，識別淋巴母細胞(超過正常淋巴細胞2-4倍，核膜清晰，核染質疏鬆而成細網狀，核仁明顯，胞漿豐富，呈嗜鹼性)、過渡型淋巴細胞(體積變化不大，僅為上述明顯核變化)、小淋巴細胞(體積稍大於紅細胞，核染質緻密，無核仁)，統計其轉化率。皮膚科轉化率正常值大於58%。
臨床意義
PHA淋巴細胞轉化率下降，是細胞免疫功能降低的反應。此項檢查，皮膚科多用於疾病分型(如麻風)、病情判斷(如皮膚惡性腫瘤)、藥物療效觀察，以及某些免疫缺陷性和變態反應性皮膚病的研究。 異常結果： 免疫功能降低引發的各種症狀 需要檢查的人群： 疑似麻風、皮膚惡性腫瘤症狀的病人
注意事項
1.培養基成分對轉化率影響較大，注意其有效期。 2.小牛血清用前需滅活。 3.培養時要保證有足夠的氣體，一般10ml培養瓶內液體總量不要超過2ml。 4.PHA劑量過大對細胞有毒性，太小不足以刺激淋巴細胞轉化，試驗前應先測定PHA轉化反應劑量。 5.實驗中要嚴格無菌操作，防止污染。 不合宜人群： 暫時不明 檢查前禁忌：注意健康的飲食，保持良好的心情 檢查時要求：積極配合醫生
檢查過程
操作方法： 1.取無菌肝素抗凝血0.lml，加入1.8ml細胞培養液中，同時加入1 000μg/m1 PHA 0.1m1，對照管不加PHA，將細胞置37℃、5%CO2培養3d，每天搖動1次。 2.培養結束時吸棄大部分上清液，加入8.5g/L NH4Cl 4ml混勻，置37℃水浴10min。 3.2500r/min離心10min，棄上清液，沉澱加5ml固定液，室溫作用5min。 4.2500r/min離心10min，棄上清液，留0.2ml沉澱細胞製片，迅速吹乾。 5.吉姆薩染液染色 10-20min，水洗，乾燥。 6.油鏡計數200個淋巴細胞中轉化的細胞數，計算轉化率。 結果判斷： 1.淋巴母細胞的形態學標準 細胞核的大小、核與胞漿的比例、胞漿染色性及核的構造與核仁的有無。 ⑴成熟的小淋巴細胞：與未經培養的小淋巴細胞大小一樣，為6-8μm，核染色緻密，無核仁，核與胞漿比例大，胞漿染色為輕度嗜鹼性。 ⑵過渡型淋巴細胞：比小淋巴細胞大，約10-20μm，核染色緻密，但出現核仁，此為與成熟小淋巴細胞鑑別要點。 ⑶淋巴母細胞：細胞體積增大，約20-30μm，形態不整齊，常有小突出，核變大，核質染色疏鬆，有核仁1-2個，胞漿變寬，常出現胞漿空泡。 ⑷其它細胞：如中性粒細胞在培養72h後，絕大部分衰變或死亡呈碎片。 2.淋巴細胞轉化率的計算 按上述分類檢查推片頭、體、尾三部分，計數200個淋巴細胞，算出百分率。轉化的淋巴細胞包括淋巴母細胞和過渡型淋巴細胞，未轉化的淋巴細胞指的是成熟的小淋巴細胞。在正常情況下，PHA誘導的淋巴細胞轉化率為60-80%，如為50-60%則偏低，50%以下則為降低。 再根據結果得出正確的判斷。
相關疾病
咽部麻風，麻風病
相關症狀
麻風恐怖
