MEM培養基

MEM培養基（minimum Eagle’s medium）是動物細胞培養中的常用的培養基，主要是貼壁細胞的培養，修改配方後也可用於其他類型細胞培養，例如如無鈣（Ca）MEM培養基可被用於懸浮細胞的培養，而Hank’s平衡鹽的MEM培養基可被用於二倍體細胞的培養。

基本介紹

• 中文名：MEM培養基
• 外文名：minimum Eagle’s medium
• 類型：培養基
• 使用說明：立即用膜濾過消毒
• 用於：二倍體細胞的培養

配方

1配置前準備：配置培養基新製備的milli water。調節pH值的酸鹼溶液也應該使用這種水配置。製備培養基的器皿清洗乾淨，並用milli water潤洗兩次。

2.溶解培養基：取5%終體積的milli water，加入到1L玻璃杯中，將乾粉培養基倒入燒杯，水洗包裝袋內面兩次，倒入培養液中。磁力攪拌助溶。

3.補加試劑：根據包裝袋說明加入NaHCO3(2.2g)，HEPES(2.383,10mmol)、非必需胺基酸(可不加，10ml)。

4.加抗生素：一般抗生素終濃度——青黴素100U/ml，鏈黴素100U/ml。1L加入10m儲備液。

5.調pH值：加水到1000ml，然後用HCL或者NaOH調節pH到7.2。

6.過濾除菌：採用0.22um濾膜。過濾後分裝於小瓶中(100或200ml)。過濾後pH值一般上升0.1-0.3。

7.加小牛血清：根據培養基配置的量將小牛血清分裝，冷凍保存(-20度)。臨用前將加入小牛血清10%。

使用說明

1、保存在2-8度乾燥環境，避光。

2、稱量出比最終容積小5%的蒸餾水，混合的容器儘可能接近最終容積。

3、將乾粉加入到室溫15到30度的水中，輕柔攪拌，勿用熱水。

4、沖洗出包裝袋內所有乾粉。

5、每升培養基加入2.2g碳酸氫鈉。

6、用水稀釋至最終的容積，攪拌直至溶解。不要過分混合。

7、調整pH值比最後的培養用的pH值要低0.2到0.3(過濾後pH值一般要升高0.1 到0.3)：用1N NaOH 和 1N HCl，邊攪拌邊緩慢添加。調整pH值完畢後，封閉容器，直至過濾。

8、立即用膜濾過消毒。