臍帶間充質幹細胞

概念

臍帶間充質幹細胞是以人臍帶血血清為主體的培養體系的臍帶間充質幹細胞培養擴增的方法：流式細胞儀檢測結果顯示，貼壁細胞均表達CD44、CD29，低表達CD106，不表達造血細胞表型 CD14、CD34、CD45和內皮細胞表型CD31，也不表達HLA-DR：細胞倍增時間為30h，細胞周期分析表明，G0～G1期和+G2+M期所占比例分別為78.84%和11.16%。

優勢

臍帶間充質幹細胞（MSCs）具有較高的分化潛能，可向多個方向進行分化。它在骨、軟骨、肌肉、肌腱、韌帶、神經、肝、內皮和心肌等組織工程方面具有廣闊的臨床套用前景。有報導從人臍帶中分離出MSCs，且細胞含量、增殖能力優於骨髓MSCs，免疫原性比骨髓MSCs低，並且具有取材方便，無倫理學爭議等優點，因此越來越受到研究工作者們的關注。幹細胞的培養體系主要套用含動物血清（如胎牛血清）的培養基，在此種環境下生長的幹細胞，其內部結構會發生何種變化尚未可知，為避免含動物血清培養中病毒等病原體污染和異種血清所致的過敏反應，課題組進行了以人臍帶血血清為主體的培養體系體外培養擴增臍帶間充質幹細胞的實驗研究。以探討人臍帶血血清替代動物血清用於培養臨床組織工程用幹細胞的可行性。同時研究臍帶間充質幹細胞形態學、生長特性、細胞周期、免疫表型等特性，旨在建立臍帶間充質幹細胞的富集方法，為建立臍帶間充質幹細胞庫和臨床套用提供有力的理論依據。

分離培養

取新鮮健康臍帶，用PBS沖洗乾淨後，用剪刀鑷子剔去血管，剝出裡面的華氏膠組織，將所得組織充分剪碎至1 mm³大小，加入α-MEM培養液置於37℃，5%的CO₂培養箱培養，培養液中含10% FBS，100U/ml青黴素，100U/ml鏈黴素。臍帶組織培養5-7天后，可見有部分細胞從組織塊周圍爬出，形態呈細小的梭形，一周后，細胞開始迅速增殖，形成大小不等的細胞集落，待細胞長滿後，用0.25%胰蛋白酶消化傳代。