《La蛋白在鐵誘導C肝病毒蛋白翻譯中的作用及機制研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由劉一萍擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：La蛋白在鐵誘導C肝病毒蛋白翻譯中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉一萍
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
C型肝炎是一個嚴重的全球性健康問題，在我國C肝尚未為公眾廣泛認知，初始症狀不明顯，往往被患者忽略，易發展成為肝硬化和肝癌。La蛋白對HCV病毒蛋白翻譯起重要調控作用。臨床上C型肝炎患者大多存在肝臟組織鐵負荷過重的現象，並且對干擾素抗病毒治療應答率會顯著降低，但其確切的機制尚不清楚。本課題擬在細胞實驗的基礎上，套用細胞生物學、免疫細胞化學和分子生物學等方法研究：1、構建HCV IRES 表達載體；2、鐵對HCV病毒蛋白翻譯起始及ROS活性的影響；3、鐵對La蛋白表達/移位的影響；4、高鐵對IFN抑制HCV病毒蛋白翻譯的影響；5、抑制ROS和干擾La對高鐵狀態下IFN抑制細胞內HCV蛋白翻譯影響。本課題將深入認識鐵與HCV病毒翻譯的關係，在細胞和分子水平上進一步闡明鐵參與IFN抑制HCV病毒蛋白翻譯的分子機制，為C型肝炎的預防、治療及藥物的開發提供理論依據。
結題摘要
C型肝炎是一個嚴重的全球性健康問題，在我國C肝尚未為公眾廣泛認知，初始症狀不明顯，往往被患者忽略，易發展成為肝硬化和肝癌。La蛋白可能對HCV病毒蛋白翻譯起著一定的調節作用。臨床上C型肝炎患者大多存在肝臟組織鐵負荷過重的現象，並且對干擾素抗病毒治療應答率會顯著降低，但其確切的機制尚不清楚。本課題在細胞實驗的基礎上，我們進行了4個方面的研究工作：1、成功構建了HCV IRES 表達載體。2、開展了鐵對HCV病毒蛋白翻譯起始及ROS活性影響的研究。結果顯示，細胞內鐵水平與HCV IRES依賴的病毒蛋白翻譯以及胞內ROS活性呈正向變化。3、開展了鐵對HCV病毒蛋白翻譯起始因子影響的研究。結果顯示，鐵可以增加Huh-7細胞內的La、eIF3A mRNA和蛋白的表達，而加入鐵鰲合劑去鐵胺則可以特異性地降低La、eIF3A mRNA和蛋白的表達。4、開展了高鐵誘導HCV病毒蛋白翻譯可能機制的研究。結果顯示，過氧化物酶抑制劑DPI可以顯著抑制鐵誘導的ROS活性水平。在高鐵誘導下La蛋白可以從胞漿移位到胞核內，而DPI可以抑制La蛋白的胞核移位。鐵還可以顯著增加Nrf2蛋白的表達，而加入DPI可以顯著抑制鐵誘導的Nrf2蛋白的表達增加。總之，研究結果提示HCV可能藉助細胞內鐵調控機制增加了病毒蛋白的翻譯，其中鐵誘導的La蛋白表達變化可能在其中起著重要的調節作用。
