《LKB1調節AKT信號傳導的分子機制及在EGFR抑制劑耐藥中的套用》是依託天津醫科大學，由鐘殿勝擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：LKB1調節AKT信號傳導的分子機制及在EGFR抑制劑耐藥中的套用
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：鐘殿勝
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
LKB1 是一個典型的腫瘤抑制基因。在非小細胞肺癌(NSCLC)，LKB1失活性突變可達30%，而在其它腫瘤中則罕見。LKB1在抑制腫瘤的發生、分化和轉移中起著重要作用。在前期研究中，我們發現，LKB1可參與AKT對其下游促進細胞凋亡的靶蛋白（如FOXO3a、BAD、GSK3β等）磷酸化抑制作用，具有保護腫瘤細胞的功能。在表皮生長因子受體（EGFR）突變導致AKT活化的NSCLC細胞系中，將LKB1 knockdown可引起細胞生長速度的明顯減慢和細胞凋亡。我們認為，LKB1在肺癌的發生和發展過程中，扮演雙重角色。一方面，具有腫瘤抑制功能；另一方面，在特定的情況下具有癌基因的特性。本課題將進一步研究LKB1是如何對AKT信號傳導途徑進行調控，深入了解其確切的分子機制和信號途徑。並在解決EGFR抑制劑耐藥性的問題上進行新的嘗試，為其今後臨床個體化靶向治療提供分子理論依據。
結題摘要
本課題基本上按照預定計畫進行，根據研究領域的進展適時地增加了一些新的內容，並進行了一些探討，研究成果如下： 一：LKB1和P53之間的相關性研究：在NSCLC，LKB1突變可達到30%，P53基因的突變可達到50%以上。有報導，LKB1誘導細胞凋亡的功能與P53蛋白功能狀態有關。我們的實驗結果表明，在NSCLC中，P53突變或缺失並未影響到LKBl對AMPK的磷酸化作用，即LKB1-AMPK信號傳導途徑與P53基因狀態無關。 二：在NSCLC中，LKB1/AMPK/mTOR信號傳導途徑的研究：通過一系列實驗表明，在NSCLC中，LKB1對AMPK的調節中是存在的，LKB1-AMPK可以負向調控mTOR的活性，LKB1功能的失活以及AMPK活性抑制均會影響對mTOR的調節，喪失對mTOR的負向調控機制，導致細胞對2-DG細胞毒性耐受性的明顯增加。 三：LKB1參與AKT對其下游靶蛋白調節的研究：研究結果表明，不僅FOXO3a Thr32的磷酸化需要LKB1的存在外，其他AKT下游靶蛋白，如GSK3β(Ser9)，BAD (Ser136) 等，它們的磷酸化依然需要LKB1的存在，即：LKB1可參與AKT對其下游靶蛋白的調節。 四：AMPK對AKT信號傳導途徑作用的研究：我們採用免疫共沉澱技術未能證明AMPK和AKT之間形成複合體。此外，亦未能證實存在AMPK 的Priming 磷酸化作用。 五：對EGFR抑制劑耐藥的NSCLC分子靶向治療新思路的分子機理探討：我們成功地製備了HCC827 Gefitinib耐藥（HCC827-GR）細胞系；通過一系列實驗證實，EGFR突變細胞系H1650對Erlotinib相對耐藥可能與PTEN缺失導致AKT信號傳導通路異常活化有關；並進一步證明，在AKT高度活化的NSCLC中，通過打斷LKB1和AKT的協同作用，可促進癌細胞的死亡，從而有助於解決EGFR-TKI耐藥性的問題。
