《抑癌基因LKB1及其新靶標INPP4B在宮頸癌細胞中的功能與調控》是依託山東大學，由趙蔚明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：抑癌基因LKB1及其新靶標INPP4B在宮頸癌細胞中的功能與調控
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：趙蔚明
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
人乳頭瘤病毒感染是宮頸癌的首要致病因素，在宮頸癌發生髮展過程中，許多細胞信號通路異常推進了細胞惡性轉化。抑癌蛋白LKB1在宮頸癌組織中表達缺失率較高，目前宮頸癌中LKB1抑癌的分子機制尚不完全清楚。我們首次發現LKB1可上調宮頸癌細胞中新型抑癌蛋白INPP4B的表達，而LKB1對INPP4B的調控以及INPP4B在宮頸癌中的功能尚未見報導。本項目將在細胞和組織水平系統研究LKB1及其新靶標INPP4B在宮頸癌中的功能與調控：①在細胞水平探究LKB1對INPP4B表達的調控機制、兩者對PI3K/Akt/mTOR信號通路的調節及對細胞增殖的抑制作用。②在組織層面確定臨床宮頸癌組織中LKB1、INPP4B的表達狀況及兩者的相關性、HPV癌蛋白E6、E7與LKB1、INPP4B蛋白表達的相關性；探討LKB1蛋白表達缺失和啟動子高甲基化的關係。通過上述工作為宮頸癌的治療干預提供新的靶點與理論依據。
結題摘要
HPV相關宮頸癌中 LKB1 抑癌的分子機制目前尚不清楚，本項目在前期工作基礎上系統研究了 LKB1 及其新靶標 INPP4B 在宮頸癌中的功能與調控。 我們的研究發現： 1、在HPV陽性宮頸癌細胞中，LKB1通過抑制細胞增殖、促進細胞自噬發揮其抑癌活性；採用siRNA 干擾HPV16 E6、E7癌蛋白表達，可上調宮頸癌細胞中LKB1、pAMPK表達、降低p-mTOR活性，說明 HPV16 E6、E7對 LKB1及其下游通路具有負調控作用；發現INPP4B是抑癌蛋白LKB1的調控新靶點，LKB1可通過上調INPP4B參與PI3K/Akt通路的負調控，從而抑制宮頸癌細胞的生長增殖。2、採用過表達或siRNA干擾實驗證實，INPP4B抑制宮頸癌細胞的生長增殖以及遷移和侵襲。INPP4B抑癌的分子機制與其抑制PI3K/AKT/SGK途徑關鍵分子（PDK1、p-AKT、p-SGK3、p-mTOR）的表達有關。進一步建立了宮頸癌細胞裸鼠移植瘤模型，結果表明，過表達INPP4B可抑制裸鼠體內宮頸癌細胞移植瘤的生長。3、臨床組織標本的研究表明，與正常宮頸組織相比，宮頸癌組織中 LKB1 、INPP4B蛋白表達缺失或低表達；LKB1 低表達與宮頸癌患者的腫瘤大小、淋巴結轉移等臨床病理特徵相關；宮頸組織中E6、E7 mRNA的表達與抑癌因子LKB1低表達相關。4、發現LKB1基因是 miR-106a下游的新靶點，雙螢光素酶實驗證明，miR-106a直接靶向 LKB1基因 3’-UTR；過表達miR-106a可降低LKB1表達。 進一步實驗證明，miR-106a 通過靶向LKB1促進細胞增殖、抑制細胞自噬，進而激活mTOR 信號通路發揮促癌作用。 綜上，我們的研究證實，INPP4B 是抑癌基因 LKB1 作用的新靶點，LKB1 通過上調宮頸癌細胞 INPP4B表達參與調控 Akt/mTOR 通路。INPP4B可降低PI3K/AKT/SGK途徑關鍵分子的表達，抑制宮頸癌細胞的生長增殖以及遷移侵襲，發揮抑癌作用。 LKB1基因是 miR-106a下游的新靶點， miR-106a 通過靶向LKB1調控宮頸癌細胞的增殖與自噬，發揮其促癌作用。 以上研究為HPV相關宮頸癌的治療干預提供了新的理論基礎和實驗依據。
