Coombs試驗

Coombs試驗即抗人球蛋白試驗，是檢測血液中溫反應性抗體的一種方法，也是診斷自身免疫性溶血性貧血的重要指標。溫抗體中50%以上由IgG介導，其次為IgM，IgA和C3d等，因此本試驗應分選各種單克隆抗體同時測定。Coombs試驗分為直接試驗（直接反應）和間接試驗（間接反應）：直接試驗的目的是檢查紅細胞表面的不完全抗體；間接試驗的目的是檢查血清中存在游離的不完全抗體。

基本介紹

• 中文名：Coombs試驗
• 別稱：抗人球蛋白試驗
• 用於：檢測血液中溫反應性抗體
• 首次時間：1945年

簡介

1945年，英國免疫學家Coombs等人發明了能檢測紅細胞表面抗體的一種新試驗，故稱之，亦即抗人球蛋白試驗。這是診斷免疫溶血性貧血的主要方法。 最早和現在常用的抗人球蛋白試劑是廣譜抗血清，即抗IgG+抗補體。國外研究發現，如採用特異的抗IgG、IgM或抗補體的試劑，紅細胞表面的抗體是IgG和補體約占40%，單純IgG占35%，單純補體占10%，極少數病例是IgA或IgM。補體幾乎都是C3d，即未激活的C 3 。 Coombs直接試驗：將洗滌過的紅細胞2%混懸液加入Coombs試劑，混和後離心一分鐘促進凝集。如果肉眼或顯微鏡下能見到紅細胞凝集，即為陽性，說明紅細胞表面有不完全抗體或補體。陽性結果可見於自體免疫溶血性貧血、輸血反應、某些藥物或疾病引起的免疫溶血性貧血。 Coombs間接試驗：先將受試的血清加入等量5%適當的正常紅細胞(Rh陽性的O型紅細胞)，在37℃溫育30～60分鐘，以促使血清中的半抗體結合於紅細胞上(致敏)，將紅細胞充分洗滌，以後同直接試驗。如果紅細胞發生凝集而正常對照(未經與受檢血清溫育的正常紅細胞)不凝集，即為陽性，表明受試的血清中存在不完全抗體。

項目相關

[項目名稱] 抗人球蛋白試驗

此項化驗分直接試驗和間接試驗，主要用於自身免疫性溶血性貧血(AIHA)的篩選和分型。

[別名] Coombs’試驗(庫姆試驗)

[英文縮寫] Coombs

原理

[試驗原理]

抗球蛋白試驗是抗球蛋白參與的一種間接血凝試驗，1945年由Coombs建立。用於檢測抗紅細胞不完全抗體。

不完全抗體多半是7S的IgG類抗體，是一類單價抗體，體積短小，因此雖能與相應抗原牢固結合，但在一般條件下不出現可見反應。

抗人球蛋白試驗利用抗球蛋白抗體作為第二抗體起到橋樑的作用，連線與紅細胞表面抗原結合的特異性抗體，使紅細胞凝集，故又稱橋樑凝集反應。

方法

[方法]

（1）直接coombs試驗 用於檢測已粘附在紅細胞表面的不完全抗體。即將受檢紅細胞充分洗滌後，將抗球蛋白試劑加入已結合有抗體的受檢紅細胞懸液中，即可見細胞凝集。可用玻片法做定性試驗，也可用試管法或微量法做半定量測定。用於檢測新生兒溶血症、自身免疫性貧血和醫源性溶血性疾病等。

（2）間接coombs試驗用於檢測游離在血清中的不完全抗體。即將待測血清標本加入具有特異抗原的紅細胞懸液中，如果抗原抗體相應則發生結合，再加入抗球蛋白抗體，則出現紅細胞凝集。本法多用於檢測母體Rh（D）抗體以及因紅細胞不相容的輸血而產生的血型抗體。此外也可用專一特異性的抗球蛋白血清，如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗補體血清等，分析與紅細胞表面結合的不完全抗體的Ig亞類。

[參考值]直接和間接Coombs’試驗均為陰性

意義

[臨床意義]

(1)陽性見於AIHA，直接Coombs’試驗較間接試驗對AIHA更有診斷價值。用特異性單價抗血清可將AIHA分為三型：IgG/C3陽性，占67%；單獨IgG性，占20%；單獨C3性，占13%；

(2)藥物免疫性溶血性貧血及同種免疫性溶血性貧血也可陽性。

(3)Coombs’試驗陰性有時並不能排除AIHA。

（4）10%的coombs陽性者可見於慢性淋巴細胞白血病。

[要求]用肝素或EDTA抗凝血做直接Coombs’試驗，血清做間接Coombs’試驗。

[注意事項] 受檢血標本必須新鮮；洗滌後的紅細胞和器材都不能殘留有血漿蛋白，以免出現假陰性。