《CD147與integrin相互作用多向調控肝癌細胞凋亡的機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由蔣建利擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CD147與integrin相互作用多向調控肝癌細胞凋亡的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：蔣建利
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
CD147是高表達於肝癌等癌細胞表面的粘附分子，具有促進癌的發生髮展的功能。我們的研究證實其發揮功能的信號通路為integrin-FAK-PI3K-Ca2+。但是CD147與integrin相互作用的位點並未明確,參與肝癌細胞周期調控、促進肝癌細胞存活的機制並不清楚。已知細胞內Ca2+穩態的改變可以引發內質網應激，影響細胞周期，拮抗凋亡過程，促進腫瘤生長，本項目擬套用我們自主構建的CD147過表達、siRNA干涉、CD147-Knockout等肝癌細胞模型，採用免疫共沉澱、免疫螢光共定位及哺乳動物細胞蛋白-蛋白相互作用陷阱(MAPPIT)系統明確CD147與integrin相互作用位點，套用siRNA、RGD短肽阻斷、細胞內Ca2+測定、流式細胞術等方法，探討CD147在肝癌細胞凋亡過程多向調控中的作用，揭示肝癌發生髮展的分子機制，為肝癌的臨床診治提供新的思路。
結題摘要
CD147是高表達於肝癌等癌細胞表面的粘附分子，具有促進癌的發生髮展的功能。我們以往的研究證實其發揮功能的信號通路為integrin-FAK-PI3K-Ca2+。但是CD147與integrin相互作用的位點並未明確，參與肝癌細胞周期調控、促進肝癌細胞存活的機制並不清楚。已知Ca2+穩態的改變可以引發內質網應激，影響細胞周期，拮抗凋亡過程，促進腫瘤生長。本項目進一步探討了CD147通過誘發內質網應激，在肝癌細胞凋亡過程中發揮多向調控作用。通過構建哺乳動物細胞蛋白質相互作用（MAPPIT）系統，並利用該系統明確了HAB18G/CD147胞外段和integrin 1亞基的A結構域相互作用，位點為A結構域的MIDAS位點，而且證實了CD147的I domain的ASP179胺基酸殘基位點對二者的相互作用至關重要，二者的相互作用活化下游FAK信號通路，進而促進肝癌細胞的侵襲轉移能力。隨後我們建立了Tg誘導及模擬缺氧條件下肝癌細胞內質網應激模型，套用該模型來明確CD147表達水平與內質網應激的關係以及人肝癌細胞內質網應激與凋亡調控的具體通路。結果顯示，HAb18G/CD147在內質網應激條件下抑制了肝癌細胞的凋亡。HAb18G/CD147在內質網應激條件下通過激活FAK，活化c-Src, 進而活化TFⅡ-Ⅰ，並促進TFⅡ-Ⅰ入核發揮作用，從而增強內質網應激標誌性分子Bip的表達水平。HAb18G/CD147通過促進Bip的表達抑制了caspase4的活性，從而抑制了肝癌細胞的凋亡。本項目共發表SCI論文6篇（均標註本項目號），參見學術會議並大會發言2次，培養博士研究生2名，碩士研究生2名。
