《骨髓源性細胞中促腫瘤血管新生細胞亞群的研究》是依託西安交通大學，由封衛毅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：骨髓源性細胞中促腫瘤血管新生細胞亞群的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：封衛毅
- 依託單位：西安交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
存在於腫瘤局部組織的骨髓源性細胞(bone marrow-derived cells,BMDCs)在促進腫瘤血管新生中扮演著關鍵角色，但對於發揮這一作用的細胞亞群及其作用機制目前尚不清楚。我們近期研究發現，beta3整合素陽性BMDCs在此過程中的作用尤為重要，對其中的相關細胞亞群值得深究。因此，我們擬採用骨髓移植方法以綠色螢光蛋白標記小鼠體內的BMDCs，通過分離荷瘤小鼠體內beta3整合素呈陽性的各BMDCs亞群，結合體內、外血管新生研究方法，篩選其中具有促腫瘤血管新生作用的關鍵性細胞亞群，利用現代生物技術初步探討該細胞亞群促進腫瘤血管新生的途徑和分子機制。通過此項研究，可望找到BMDCs中具有促腫瘤血管新生作用的關鍵性細胞亞群及其標誌物，並初步闡明其促進血管新生的機制和規律，為腫瘤及其它血管新生相關性疾病的研究開闢新的途徑，也為抗腫瘤藥物的作用靶點研究和建立新的藥物篩選模型奠定基礎。
結題摘要
骨髓源性細胞（bone marrow-derived cells,BMDCs）在促進腫瘤血管新生中的作用已被一些研究所證實。但由於BMDCs中的細胞亞型種類繁多，此前不同研究者對其中發揮作用細胞亞群的認定各不相同，因此確定BMDCs中促腫瘤血管新生的細胞亞型對於闡明血管新生發生機制具有重要意義。本研究首先通過分離骨髓細胞或分離血液白細胞中的細胞亞群並在體直接觀察確認了其對腫瘤及腫瘤血管新生的影響；然後觀察篩選能夠動員BMDCs釋放、具有促血管新生作用的藥物，選擇其中效果明顯、作用機制不同的多種藥物，分析研究這些藥物促進腫瘤生長及腫瘤血管新生作用與其促進血中多種細胞亞群水平升高之間的關係，並以此為線索，研究篩選BMDCs中具有促進腫瘤及腫瘤血管新生的主導性細胞亞群，並對其促進腫瘤血管新生的可能途徑進行探討。實驗結果顯示，骨髓細胞、血液白細胞以及從白細胞中分離的粒細胞亞群具有顯著促進腫瘤生長和增強血管新生的作用；研究結果也確認了具有夠動員骨髓釋放BMDCs的藥物G-CSF、GM-CSF、雌激素和多巴胺受體抑制劑依替必利具有明顯的促進腫瘤及腫瘤血管新生的作用。利用流式細胞技術觀察GM-CSF、雌激素等藥物對動物循環血液中CXCR4+、VEGFR2+、CXCR4+、β3+、SCa-1+、CD11b+ 等BMDCs細胞亞群水平的影響後發現，上述藥物促進腫瘤生長均與與血中CXCR4+β3+的BMDCs水平升高密切相關。結合在體動物骨髓移植等方法將GFP小鼠骨髓移植給C57小鼠，利用免疫組化方法證實了上述藥物引起的腫瘤生長加快與腫瘤組織局部的BMDCs招募增加有關。CXCR4+的特異性抑制劑AMD3100可以拮抗藥物引起的腫瘤生長增加，進一步表明CXCR4+ BMDCs是介導腫瘤生長加快的BMDCs亞群。採用體外研究方法，考察GM-CSF對腫瘤、BMDCs及內皮細胞的直接作用，確認GM-CSF通過BMDCs促進動脈環內皮細胞增殖增強血管新生。Westrn blot等方法進一步證實，上述引起腫瘤及腫瘤血管新生增加的藥物，同時也促進了腫瘤組織中的MMP9表達。因此上述結果表明，血液粒細胞亞群中的CXCR4+β3+BMDCs與BMDCs的促腫瘤及腫瘤血管新生作用密切相關，是BMDCs中發揮相關作用的重要細胞亞群。
