GB/T 5009.37-2003《食用植物油衛生標準的分析方法》（Method for analysis of hygienic standard of edible oils）是有關食用植物油的一項國家標準。
基本介紹
- 中文名：食用植物油衛生標準的分析方法
- 外文名：Method for analysis of hygienic standard of edible oils
- 標準號：GB/T 5009.37-2003
- 發布日期：2003-8-11
範圍,引用檔案,感官檢查,色澤,氣味及滋味,理化檢驗,酸價,過氧化值,羰基價,游離棉酚,殘留溶劑,
範圍
本標準規定了食用植物油衛生指標的分析方法。
本標準適用於食用植物油衛生指標的分析。
本方法殘留溶劑的檢出限為0．10 mg/kg,過氧化值第二法的檢出限為0．003 meq/kg。
引用檔案
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GB/T 5009.11 食品中總砷及無機砷的測定
GB/T 5009.27 食品中苯並（a）花的測定
GB/T 5009.138 食品中鎳的測定
感官檢查
色澤
儀器
50 mm，杯高100 mm。
分析步驟
將試樣混勻並過濾於燒杯中，油層高度不得小於5 min,在室溫下先對著自然光觀察，然後再置於白色背景前借其反射光線觀察並按下列詞句描述：白色、灰白色、檸檬色、淡黃色、黃色、橙色、棕黃色、棕色、棕紅色、棕褐色等。
氣味及滋味
將試樣倒入150 mL燒杯中，置於水浴上，加熱至50℃，以玻璃棒迅速攪拌。嗅其氣味，並蘸取少許試樣，辨嘗其滋味，按正常、焦糊、酸敗、苦辣等詞句描述。
理化檢驗
酸價
原理
植物油中的游離脂肪酸用氫氧化鉀標準溶液滴定，每克植物油消耗氫氧化鉀的毫克數，稱為酸價。
試劑
乙醚-乙醇混合液：按乙醚-乙醇(2+1)混合。用氫氧化鉀溶液(3g/L)中和至酚酞指示液呈中性。
氫氧化鉀標準滴定溶液〔c(KOH)=0. 050 mol/L〕。
酚酞指示液：10g/L乙醇溶液。
分析步驟
稱取3.00g～5.00g混勻的試樣，置於錐形瓶中，加入50 mL中性乙醚-乙醇混合液，振搖使油溶解，必要時可置熱水中，溫熱促其溶解。冷至室溫，加入酚酞指示液2滴～3滴，以氫氧化鉀標準滴定溶液(0. 050mol/L)滴定，至初現微紅色，且0.5 min內不褪色為終點。
結果計算
試樣的酸價按式(1)進行計算。
X=V1/V2················································（1）
式中：
X——試樣的酸價（以氫氧化鉀計），單位為毫克每克（mg/g）；
V——試樣消耗氫氧化鉀標準滴定溶液體積，單位為毫升(mL)；
c——氫氧化鉀標準滴定的實際濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
m——試樣質量，單位為克（g）；
56.11——與1.0 mL氫氧化鉀標準滴定溶液[c(KOH)=1.000 mol/L]相當的氫氧化鉀毫克數。
計算結果保留兩位有效數字。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
過氧化值
第一法 滴定法
原理
油脂氧化過程中產生過氧化物，與碘化鉀作用，生成游離碘，以硫代硫酸鈉溶液滴定，計算含量。
試劑
飽和碘化鉀溶液：稱取14g碘化鉀，加10 mL水溶解，必要時微熱使其溶解，冷卻後貯於棕色瓶中。
三氯甲烷——冰乙酸混合液：量取40 ml三氯甲烷，加60 mL冰乙酸，混勻。
硫代硫酸鈉標準滴定溶液[c(Na2S203）=0.0020 mol/L]。
澱粉指示劑(10g/L)：稱取可溶性澱粉0．50g,加少許水，調成糊狀，倒入50 mL沸水中調勻，煮沸。臨用時現配。
分析步驟
稱取2.00 g～3. 00 g混勻（必要時過濾）的試樣，置於250 mL碘瓶中，加30 mL三氯甲烷-冰乙酸混合液，使試樣完全溶解。加入1.00 mL飽和碘化鉀溶液，緊密塞好瓶蓋，並輕輕振搖0．5 min,然後在暗處放置3 min。取出加100 mL水，搖勻，立即用硫代硫酸鈉標準滴定溶液(0.0020 mol/L)滴定，至淡黃色時，加1 mL澱粉指示液，繼續滴定至藍色消失為終點，取相同量三氯甲烷-冰乙酸溶液、碘化鉀溶液、水，按同一方法，做試劑空白試驗。
計算結果
試樣的過氧化值按式(2)和式(3)進行計算。
X1 = 1000/(m*1000)·········································(2)
X2 = X1×78.8························································(3)
式中：
X1——試樣的過氧化值，單位為克每百克(g/100 g)；
X2——試樣的過氧化值，單位為毫克當量每千克(meq/kg)；
V1——試樣消耗硫代硫酸鈉標準滴定溶液體積，單位為毫升(mL)；
V2——試劑空白消耗硫代硫酸鈉標準滴定溶液體積，單位為毫升(mL）；
c ——硫代硫酸鈉標準滴定溶液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
m ——試樣質量，單位為克(g)；
0.126 9——與1.00 mL硫代硫酸鈉標準滴定溶液[c(Na2S203）=1.000 mol/L]相當的碘的質量，單位為克(g)；
78.8——換算因子。
計算結果保留兩位有效數字。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
第二法 比色法
原理
試樣用三氯甲烷——甲醇混合溶劑溶解，試樣中的過氧化物將二價鐵離子氧化成三價鐵離子，三價鐵離子與硫氰酸鹽反應生成橙紅色硫氰酸鐵配合物，在波長500 nm處測定吸光度，與標準系列比較定量。
試劑
鹽酸溶液(10 mol/L)：準確量取83.3 mL濃鹽酸，加水稀釋至100 mL,混勻。
過氧化氫（30%）。
三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶劑：量取70 mL三氯甲烷和30 mL甲醇混合。
氯化亞鐵溶液(3.5 g/L)：準確稱取0．35 g氯化亞鐵(FeCl2·4H20)於100 mL棕色容量瓶中，加水溶解後，加2 mL鹽酸溶液(10 mol/L)，用水稀釋至刻度（該溶液在10℃下冰櫃內貯存可穩定1年以上）。
硫氰酸鉀溶液(300 g/L)：稱取30 g硫氰酸鉀，加水溶解至100 mL(該溶液在10℃下冰櫃內貯存可穩定1年以上）。
鐵標準儲備溶液(1.0 g/L)：稱取0．1000 g還原鐵粉於100 mL燒杯中，加10 mL鹽酸(10 mol/L)、0．5 mL～1 mL過氧化氫(30%）溶解後，於電爐上煮沸5 min以除去過量的過氧化氫。冷卻至室溫後移入100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻，此溶液每毫升相當於1. 0 mg鐵。
鐵標準使用溶液(0.01 g/L)：用移液管吸取1. 0 mL鐵標準儲備溶液(1．0 mg/mL)於100 mL容量瓶中，加三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶劑稀釋至刻度，混勻，此溶液每毫升相當於10.0μg鐵。
儀器
分光光度計。
10 mL具塞玻璃比色管。
分析步驟
試樣溶液的製備
精密稱取約0.01 g～1. 0 g試樣（準確至刻度0．0001 g)於10 mL容量瓶內，加三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶劑溶解並稀釋至刻度，混勻。
分別精密吸取鐵標準使用溶液(10.0μg/mL)0,0.2,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0 mL(各自相當於鐵濃度0,2.0,5.0,10.0,20.0,30.0,40.0μg)於乾燥的10 mL比色管中，用三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶劑稀釋至刻度，混勻。加1滴（約0.05mL)硫氰酸鉀溶液(300 g/L)，混勻。室溫（10℃～35℃）下準確放置5 min後，移入1 cm比色皿中，以三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶劑為參比，于波長500 nm處測定吸光度，以標準各點吸光度減去零管吸光度後繪製標準曲線或計算直線回歸方程。
試樣測定
精密吸取1.0 mL試樣溶液於乾燥的10 mL比色管內，加1滴（約0．05 mL)氯化亞鐵(3.5 g/L)溶液，用三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶劑稀釋至刻度，混勻。以下按4.2.2.4.1自“加1滴（約0．05 mL)硫氰酸鉀溶液(30Vg/L)······ ”起依法操作。試樣吸光度減去零管吸光度後與曲線比較或代入回歸方程求得含量。
結果計算
試樣中過氧化值的含量按式(4)進行計算。
X = V1/V2···········································（4）
式中：
X——試樣中過氧化值的含量，單位為毫克當量每千克(meq/kg)；
c——由標準曲線上查得試樣中的鐵的質量，單位為微克（P9）；
c。——由標準曲線上查得零管鐵的質量，單位為微克（Kg）；
V1 ——試樣稀釋總體積，單位為毫升(mL)；
V2——測定時取樣體積，單位為毫升（mL)；
m——試樣質量，單位為克(g)；
55.84——Fe的原子量；
2——換算因子。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
羰基價
原理
羰基化合物和2，4-二硝基苯肼的反應產物，在鹼性溶液中形成褐紅色或酒紅色，在440 nm下，測定吸光度，計算羰基價。
試劑
精製乙醇：取1 000 mL無水乙醇，置於2 000 mL圓底燒瓶中，加入5g鋁粉,10 g氫氧化鉀，接好標準磨口的回流冷凝管，水浴中加熱回流1 h,然後用全玻璃蒸餾裝置，蒸餾收集餾液。
精製苯：取500 mL苯，置於1000 mL分液漏斗中，加入50 mL硫酸，小心振搖5 min,開始振搖時注意放氣。靜置分層，棄除硫酸層，再加50 mL硫酸重複處理一次，將苯層移入另一分液漏斗，用水洗滌三次，然後經無水硫酸鈉脫水，用全玻璃蒸餾裝置蒸餾收集餾液。
二硝基苯肼溶液：稱取50 mg 2,4-二硝基苯肼，溶於100 mL精製苯中。
乙酸溶液：稱取4.3 g固體三氯乙酸、加100 mL精製苯溶解。
氫氧化鉀-乙醇溶液：稱取4g氫氧化鉀，加100 mL精製乙醇使其溶解，置冷暗處過夜，取上部澄清液使用。溶液變黃褐色則應重新配製。
儀器
分光光度計。
分析步驟
精密稱取約0．025 g～0. 5 g試樣，置於25 mL容量瓶中，加苯溶解試樣並稀釋至刻度。吸取5．0 ml，置於25 mL具塞試管中，加3 mL三氯乙酸溶液及5 mL2,4-二硝基苯腆溶液，仔細振搖混勻，在60℃水浴中加熱30 min，冷卻後，沿試管壁慢慢加入10 mL氫氧化鉀-乙醇溶液，使成為二液層，塞好，劇烈振搖混勻，放置10 min。以1 cm比色杯，用試劑空白調節零點，于波長440 nm處測吸光度。
結果計算
試樣的羰基價按式(5)進行計算。
X = 1/m······································（5）
式中：
X——試樣的羰基價，單位為毫克當量每千克(meq/kg)；
A——測定時樣液吸光度；
m2——試樣質量，單位為克(g)；
V1——試樣稀釋後的總體積，單位為毫升(mL)；
V2——測定用試樣稀釋液的體積，單位為毫升(mL)；
854——各種醛的毫克當量吸光係數的平均值。
結果保留三位有效數字。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的5%。
游離棉酚
紫外分光光度法
原理
試樣中游離棉酚經用丙酮提取後，在378 nm有最大吸收，其吸收值與棉酚量在一定範圍內成正比，與標準系列比較定量。
儀器
紫外分光光計。
試劑
丙酮(70%）：將350 mL丙酮加水稀釋至500 mL。
棉酚標準溶液；準確稱取0．1000 g棉酚，置於100mL容量瓶中，加丙酮(70%）溶解並稀釋至刻度。此溶液每毫升相當於1.0 mg棉酚。
棉酚標準使用液：吸取棉酚標準溶液5.0 mL,置於100 mL容量瓶中，加丙酮(70%）稀釋至刻度。此溶液每毫升相當於50.0μg棉酚。
分析步驟
稱取1. 00 g精製棉油或0.20 g粗棉油，置於100 mL具塞錐形瓶中，加入20.0 mL丙酮(70%），並加入玻璃珠3粒～5粒，在電動振盪器上振盪30 min,然後在冰櫃中放置過夜。取此提取液之上清液，過濾。濾液供測定用。
吸取0、0. 10、0.20、0.40、0.80、1.6、2.4 mL棉酚標準使用液（相當於0、5、10、20、40、80、120μg棉酚），分別置於10 mL具塞試管中。各加入丙酮（70%）至10 mL，混勻，靜置10 min。取試樣濾液及標準液於1 cm石英比色杯中，以丙酮(70%）調節零點於378 nm波長處測吸光度，繪製標準曲線比較。
結果計算
試樣中游離棉酚的含量按式(6)進行計算。
X = m1/(m2*1000*1000)*100*2·····································（6）
式中：
X——試樣中游離棉酚的含量，單位為克每百克(g/100 g）；
m1——測定用樣液中游離棉酚的質量．單位為微克(μg)；
m2——試樣質量，單位為克(g)。
計算結果保留三位有效數字。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
苯胺法
原理
試樣中游離棉酚經提取後，在乙醇溶液中與苯胺形成黃色化合物，與標準系列比較定量。
試劑
丙酮(70%）：量取70 mL丙酮，加水至100 mL。
乙醇(95%）。
苯胺：應為無色或淡黃，若色深則重蒸餾。
棉酚標準溶液：同4.4.1.3.2和4.4.1.3.3。
分析步驟
稱取約1.00 g試樣，置於150 mL具塞錐形瓶中，加入20.0 mL丙酮(70%）、玻璃珠3粒～5粒，劇烈振搖1 h,在冰櫃中過夜，過濾，濾液備用。
在兩支25 mL具塞比色管中，各加入2.0 mL上述濾液，以甲管為試樣管，乙管為對照管。另吸取0、0.10、0.20、0.40、0.80、1.00 mL棉酚標準使用液（相當0、5.0、10.0、20.0、40.0、50.0μg棉酚）各兩份，分別置於甲、乙兩組25 mL具塞比色管中，各管均加入丙酮(70%）至2 mL，甲組標準管與試樣管甲管各加入3 mL苯胺，在80℃水浴中加熱15 min,取出冷至室溫，各加入乙醇至25 mL；乙組標準管與試樣管乙管各加乙醇至25 mL。兩組溶液在加乙醇後均放置15 min,以甲組標準的零管為試劑空白，以乙組的零管為溶劑空白，用1 cm比色杯，以各組標準零管調節零點，在波長445 nm處，測定兩組的吸光度，以兩組對應的吸光度之差，以及相應標準濃度繪製標準曲線，以試樣管甲管與乙管的吸光度之差從標準曲線查出棉酚含量。
結果計算
試樣中游離棉酚的含量按式(7)進行計算。
X = m1/(m2*1000*1000*2/20)*100····································（7）
式中：
X——試樣中游離棉酚的含量，單位為克每百克(g/100g）；
m1——測定用樣液中游離棉酚的質量，單位為微克(μg)；
m2——試樣質量，單位為克(g)。
計算結果保留三位有效數字。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
砷
按GB/T 5009.11操作。
黃麴黴毒素B1
按GB/T 5009. 22操作。
苯並(a)花
按GB/T 5009. 27操作。
殘留溶劑
原理
將植物油試樣放入密封的平衡瓶中，在一定溫度下，使殘留溶劑氣化達到平衡時，取液上氣體注入氣相色譜中測定，與標準曲線比較定量。
試劑
N–N-二甲基乙醯胺（簡稱DMA)：吸取1. 0 mL放入100 ML～150 ML頂空瓶中，在50℃放置0．5h，取液上氣0．10 mL注入氣相色譜儀在0min～4 min內無干擾即可使用。如有干擾可用超音波處理30 min或通入氮氣用曝氣法蒸去干擾。
六號溶劑標準溶液：稱取洗淨乾燥的具塞20 mL～25 mL氣化瓶的質量為m1，瓶中放入比氣化瓶體積少1 mL的DMA密塞後稱量為m2，用1 mL的注射器取約0．5 mL六號溶劑標準溶液通過塞注入瓶中（不要與溶液接觸），混勻，準確稱量為m3。用式（8）計算六號溶劑油的濃度：
X = (m3-m2)/((m2-m1)/0.935)*1000····································(8)
式中：
X——六號溶劑的濃度，單位為毫克每毫升(mg/mL）；
m1——瓶和塞的質量，單位為克（g）；
m2——瓶、塞和DMA的質量，單位為克(g)；
m3——m2加六號溶劑的質量，單位為克(g)；
0.9351——為DMA在20℃時密度，單位為克每毫升(g/mL)。
儀器
氣化瓶（頂空瓶）：體積為100 mL～150 mL具塞。
氣密性試驗：把1 mL己烷放入瓶中，密塞後放入60℃熱水中30 min(密封處無氣泡外漏）。
氣相色譜儀：帶氫火焰離子化檢測器。
分析步驟
氣相色譜參考條件
色譜柱：不鏽鋼柱，內徑3 mm，長3 m，內裝塗有5%EGS的白色擔體102(60～80)目。
檢測器：氫火焰離子化檢測器。
柱溫：60℃。
汽化室溫度：140℃。
載氣(N2）：30 mL/min。
氫氣：50 mL/min。
空氣：500 mL/min。
測定
稱取25.00 g的食用油樣，密塞後於50℃恆溫箱中加熱30 min,取出後立即用微量注射器或注射器吸取0．10 mL～0．15 mL液上氣體（與標準曲線進樣體積一致）注入氣相色譜，記錄單組分或多組分（用歸一化法）測量峰高或峰面積，與標準曲線比較，求出液上氣體六號溶劑的含量。
標準曲線的繪製
取預先在氣相色譜儀上測試管六號溶劑量較低的油為曲線製備的體底油（或經70℃開放式趕掉大部分殘留溶劑的食用油或壓榨油），分別稱取25.00 g放入6支氣化瓶中，密塞。通過塞子注入六號溶劑標準液(4.8.2.2)0、20、40、60、80、100 μL(含量分別為0，0.02×X，·····，0.1O×X μg,其中X為六號溶劑的濃度）。放入50℃烘箱中，平衡30 min,分別取液上氣體注入色譜，各回響值扣除空白值後，繪製標準曲線（多個色譜峰用歸一化法計算）。
結果計算
油樣中六號溶劑的含量按式(9)進行計算。
X = (m1*1000)/(m2*1000)····················································（9）
式中：
X——油樣中六號溶劑的含量，單位為毫克每千克(mg/kg)；
m1——測定氣化瓶中六號溶劑的質量，單位為微克（μg)；
m2——試樣質量，單位為克(g)。
計算結果保留三位有效數字。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的15%。
鎳（適用於人造奶油）
按GB/T 5009. 138操作。
油中非食用油的鑑別
對常見的三類非食用油進行定性鑑別。
桐油
三氯化銻-三氯甲烷界面法：取油樣1 mL移入試管中，沿試管壁加1 mL三氯化銻-三氯甲烷溶液(10g/L)，使試管內溶液分成兩層，然後在水浴中加熱約10 min。如有桐油存在，則溶液兩層分界面上出現紫紅色至深咖啡色環。
亞硝酸法：適用於豆油、棉油等深色油中桐油的檢出，但不適用於梓油或芝麻油中桐油的檢出。取試樣5滴～10滴於試管中，加2 mL石油醚，使油溶解，有沉澱物時，過濾一次，然後加入結晶亞硝酸鈉少許，並加入1 mL硫酸(1+1)搖勻，靜置，如有桐油存在，油液混濁，並有絮狀沉澱物，開始呈白色，放置後變黃色。
硫酸法：取試樣數滴，置白瓷板之上，加硫酸1滴～2滴，如有桐油存在，則出現深紅色並且凝成固體，顏色漸加深，最後成炭黑色。
礦物油
取1 mL試樣，置於錐形瓶中，加入1 mL氫氧化鉀溶液(600 g/L)及25 mL乙醇，接空氣冷凝管回流皂化約5 min,皂化時應振搖使加熱均勻。皂化後加25 mL沸水，搖勻，如渾濁或有油狀物析出，表示有不能皂化的礦物油存在。
大麻油
取試樣和對照大麻油各10μL,點樣於矽膠G薄層板，此薄層板厚0．25 mm～0．3mm，105℃下活化30 min。油太粘稠則用5倍苯稀釋，再進行點樣，點樣量稍多一點約10μL～20μL。展開劑用苯，顯色劑為牢固藍鹽B溶液(1.5 g/L) (臨用配製）。當斑點和對照顏色及比移值相當時表示有大麻油。胡麻油、芝麻油和牢固藍鹽B也呈紅色，但在薄層板上比移值較小。
黃麴黴毒素
GB/T 5009. 22操作。
