《雷公藤甲素治療結直腸癌靶點篩選》是宋新強(信陽師範學院)、張牧(信陽師範學院)、楊寧寧(信陽師範學院)、杜宏濤(信陽師範學院)、張玉(信陽師範學院)編制的最終報告。
基本介紹
- 中文名：雷公藤甲素治療結直腸癌靶點篩選
- 報告類型：最終報告
- 公開範圍： 公開
- 編制時間： 2020年12月11日
- 中文摘要
目的：基於點擊化學和蛋白質組學篩選和鑑定雷公藤甲素治療結直腸癌的潛在靶點。方法：套用流式細胞術檢測雷公藤甲素對HCT116細胞周期與凋亡的影響。通過蛋白質組學對雷公藤甲素治療人結腸癌HCT116細胞的整體水平蛋白譜進行分析。利用iTRAQ定量標記方法評估了加入雷公藤甲素和不加雷公藤甲素處理的HCT 116細胞中發生顯著變化的蛋白。使用Western Blot SDS-PAGE對蛋白質組學數據進行驗證。套用點擊化學方法合成雷公藤甲素探針，在癌細胞和正常細胞中驗證了探針的有效性，與HCT 116細胞共同孵育，進行免疫螢光觀察。通過MS/MS識別雷公藤甲素結合位點。結果：雷公藤甲素對人正常結腸上皮細胞CCD 841的增殖無影響，但其可以誘導人結直腸癌HCT 116細胞有效凋亡並抑制細胞生長。在48小時時發現雷公藤甲素在HCT 116細胞上的IC50為10 nM，非常接近60個癌細胞系的平均水平(12 nM)。同時也發現了一些顯著調控的蛋白，如RNA聚合酶II、TAB1、BRD4等。比較雷公藤甲素處理後的正常細胞CCD 841和癌細胞HCT 116的BRD4和β-catenin水平發現，在正常細胞中，這兩種蛋白質的水平沒有變化。但在HCT 116細胞中，BRD4、β-catenin的表達被抑制，Western blot以及定量免疫細胞化學分析進一步驗證了這一結果。結論：雷公藤甲素可能針對HCT 116細胞中某些特異性或高表達的蛋白發揮作用。BRD4被鑑定為雷公藤甲素治療結直腸癌細胞的靶點之一。同時，雷公藤甲素可能幹預了Wnt-β-catenin 信號通路，通過降低β-catenin的表達來影響細胞遷移。
