除草劑殘留量檢測方法

《中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準:除草劑殘留量檢測方法(第1部分):氣相色譜串聯質譜法測定 糧谷及油籽中醯胺類除草劑殘留量(SN/T 1737.1-2006)》為SN/T 1737的第1部分。本部分附錄A、附錄B和附錄C均為資料性附錄。本部分由國家認證認可監督管理委員會提出並歸口。本部分起草單位：中華人民共和國深圳出入境檢驗檢疫局。本部分主要起草人：謝麗琪、藍芳、林黎、蔡伊娜、吳衛東。本部分系首次發布的出入境檢驗檢疫行業標準。

基本介紹

• 中文名：除草劑殘留量檢測方法
• 外文名：Determination of Herbicide Residues-Part 1
• 書名：除草劑殘留量檢測方法
• 作者：質量監督檢驗檢疫總局
• 出版日期：2006年5月1日
• 語種：簡體中文
• ISBN：155066216837
• 出版社：中國標準出版社
• 頁數：22頁
• 開本：16

方法範圍

本標準規定了糧谷及油籽中醯胺除草劑殘留量檢驗的抽樣、制樣和氣相色譜-質譜聯用測定方法。 本標準適用於大米、大豆中醯胺除草劑殘留量的定量測定，其它食品可參照執行。

引用檔案

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GB 2763 食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法

原理

試樣中除草劑用丙酮和水提取，把提取液中丙酮減壓去除後，加入氯化鈉溶液，用正己烷反萃取，濃縮正己烷提取液，然後用乙腈提取，弗羅里矽土固相萃取柱淨化，樣液供氣相色譜-質譜測試，外標法定量。

試劑和材料

除另有規定外，所有試劑均為分析純，水為符合GB/T 6682中規定的一級水。

試劑

正己烷（C6H14）：色譜純。

乙腈（CH3CN）：色譜純。

丙酮(CH3COCH3)：色譜純。

乙醚((C2H5)2O)：色譜純。

無水硫酸鈉（Na2SO4）：經 650C 灼燒 4 h，冷卻後置於乾燥器中備用。

氯化鈉(NaCl)：分析純。

溶液配製

氯化鈉溶液：10 %（m/V）,將 100 g 氯化鈉溶於水中，並稀釋至 1000 mL。

提取劑 I：乙腈加入少量正己烷飽和，搖勻。

提取劑Ⅱ：正己烷加入少量乙腈飽和，搖勻。

正己烷-乙醚（85+15）：取 85 mL 正己烷和 15 mL 乙醚，混勻。

標準品

毒草胺、莠去津、乙草胺、二甲吩草胺、甲草胺、嗪草酮、異丙甲草胺、敵稗、丁草胺、丙草胺、敵草胺標準品，純度大於 98%。

標準溶液配製

分別準確稱取 25 ± 0.1 mg 標準品於 50 mL 容量瓶中，用丙酮溶解並定容，得到濃度為 500 g/mL單標儲備液，此溶液在 0～4 ℃中可保存 3 個月。根據需要再用丙酮稀釋儲備液，配製成適當濃度的混合標準工作液，此溶液在 0～4 ℃中可保存 1 個月。

材料

弗羅里矽土固相萃取柱：125 mg，3 mL，或相當者。使用前依次用 5 mL 正己烷-乙醚溶液和 5 mL正己烷預淋洗柱子，流速 1 d/sec。

儀器和設備

氣相色譜-質譜儀。

分析天平：感量0.01 g和0.0001 g。

旋轉蒸發儀。

固相萃取裝置。

吹氮濃縮儀。

旋渦混合器。

均質機。

離心機。

茄形瓶：100 mL，250 mL。

離心管：15 mL，50 mL。

微量注射器：10 µL。

試樣製備

試樣製備將樣品按四分法縮分至 1 kg，樣品取樣部位按GB 2763附錄A執行，全部磨碎並通過 40 目篩，混勻，均分成兩份，裝入潔淨的容器內，密封，標明標記。

試樣保存將試樣於-5 ℃以下避光保存。在抽樣和制樣過程中,必須防止樣品受到污染或發生殘留物含量的變化。

分析步驟

提取

稱取約 10 g（精確至 0.01 g）樣品於 50 mL 離心管中，加入 10 mL 水和 20 mL 丙酮，均質 3 min，於 4000 r/min 離心 4 min，將提取液移入 250 mL 茄形瓶中，離心管中殘渣再用 30 mL  2 丙酮提取，提取液併入茄形瓶中。在 38 ℃下，減壓蒸發去除丙酮，殘液（約 10 mL）轉移至另一 50 mL 離心管中。依次用 10 mL 10 %氯化鈉溶液和 15 mL 正己烷洗滌茄形瓶，洗滌液一併移入離心管中，振盪 3 min，於2500 r/min 離心 3 min，收集正己烷相。離心管中的水相中再用 15 mL  2 正己烷提取，合併正己烷相。

液-液分配淨化

正己烷相中加入適量無水硫酸鈉脫水，將正己烷相完全轉移至另一 250 mL 茄形瓶中，於 50oC，減壓蒸發至乾。殘餘物用 5 mL  2 提取液Ⅱ溶解，一併轉移至 50 mL 離心管中。加入 10 mL  3 提取液I，混勻、分層，乙腈相轉移至另一 50 mL 離心管中。加入 10 mL 提取液Ⅱ，混勻、分層後棄去正己烷相，乙腈相轉移至 100 mL 茄形瓶中，在 50 oC 下，減壓蒸發至乾，殘餘物用 5 mL 正己烷溶解。

固相萃取淨化

將上述正己烷溶液移入弗羅里矽土固相萃取柱中，液體過柱流速保持 0.5 d/sec，用 15 mL 正己烷-乙醚溶液潤洗茄形瓶並轉移至柱中進行洗脫，流速為 1 d/sec，收集全部洗脫液於定量試管中，於 40 oC，在氮氣流下吹至近乾，加入正己烷溶解殘渣並定容至 1.0 mL，供 GC-MS 測定。

測定

氣相色譜參考條件

a）色譜柱：HP-1701 MS, 30 m  0.25 mm (內徑)  0.25 m（膜厚），或相當者；

b）載氣：氦氣(純度大於 99.999%)，流量:1.0 mL/min。

c）色譜柱程式升溫條件：初始溫度：70 ℃（保持 1 min）；15 ℃/min，升溫至 160 ℃（保持 1 min）；2 ℃/min 的速度，升溫至 200 ℃（保持 2 min）；20 ℃/min，升溫至 280 ℃（保持 8 min）。

d）進樣口溫度：270 ℃。

e）進樣方式：不分流進樣，1 min 後打開分流閥，分流比 100：1。

f）進樣量：1 µL；

質譜參考條件

a）離子源溫度：230 °C

b）傳輸線溫度：280 ℃

c）離子化模式：EI

d）掃描範圍：50 - 400 amuGB 23200.1—20163

e）電子倍增管電壓：自動調諧電壓 200 V；

f）測試方式：選擇離子監測。

色譜測定與確證

定量測定根據樣液中除草劑含量情況，選定峰面積相近的標準工作溶液，標準工作溶液和樣液中除草劑的回響值均應在儀器檢測的線性範圍內。以單點或多點外標法定量，標準工作液和樣液應等體積參插進樣測定。

定性測定定性測定的兩個依據為：（1）被測樣品峰與標準樣品峰的色譜保留時間相同；（2）被測樣品與標準樣品的質譜圖相似，被測樣品的監測離子的相對豐度應與標準樣品一致，二者之差不大於 10 %（EI模式）。各除草劑的監測離子及定量離子參見附錄 A。在上述色譜、質譜條件下，毒草胺、莠去津、乙草胺、二甲吩草胺、甲草胺、嗪草酮、異丙甲草胺、敵稗、丁草胺、丙草胺、敵草胺的保留時間分別為 11.2 min、13.2 min、13.8 min、14.9 min、15.3 min、15.7 min、15.9 min、16.9 min、19.3 min、20.6 min、21.9 min。選擇離子色譜圖參見附錄 B，質譜圖參見附錄 C 中 C1 至 C4。7.5 空白實驗除不加試樣外，均按上述測定步驟進行。

計算和表述

用色譜工作站或按下式（1）計算試樣中除草劑的含量，計算結果須扣除空白值。x= A*C*V/(A_S*M)（1） AS * m式中:

X —試樣中除草劑含量，mg/kg；

A －試樣中除草劑峰面積；

AS－標準溶液中除草劑峰面積；

c －標準溶液濃度,mg/L；

V －樣品溶液最終定容體積，mL；

m －樣品稱重，g。

註：計算結果須扣除空白值，測定結果用平行測定的算術平均值表示，保留兩位有效數字。

精密度

在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值與其算術平均值的比值（百分率），應符合附錄D的要求。

在再現性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值與其算術平均值的比值（百分率），應符合附錄 E 的要求。

定量限

定量限毒草胺、莠去津、乙草胺、異丙甲草胺、丙草胺、敵草胺、二甲吩草胺、嗪草酮、敵稗的定量限為0.02 mg/kg; 甲草胺、丁草胺的定量限為 0.05 mg/kg。

回收率

大米中除草劑添加濃度及其回收率的實驗數據：

毒草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 90.3 % - 94.5 %;

莠去津添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 89.8 % - 95.5 %;

乙草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 84.5 % - 93.5 %;GB 23200.1—20164

二甲吩草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 84.5 % - 93.8 %;

甲草胺添加濃度為 0.05 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 83.7%- 93.9 %;

嗪草酮添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 88.3 %– 95.6 %;

異丙甲草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 88.1 % - 93.8 %;

敵稗添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 83.7 % - 95.8 %;

丁草胺添加濃度為 0.05 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 76.8 % - 89.5 %;

丙草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 86.9 % - 97.5 %;

敵草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 94.2 % - 101.9 %。

大豆中除草劑添加濃度及其回收率的實驗數據：

毒草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 78.1 % - 92.0 %;

莠去津添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 80.8 % - 92.8 %;

乙草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 80.8 % - 88.6 %;

二甲吩草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 78.7 % - 90.9 %;

甲草胺添加濃度為 0.05 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 76.1 % - 86.4 %;

嗪草酮添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 81.7 %–91.5 %;

異丙甲草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 81.6 %–90.3 %;

敵稗添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 82.9 % - 92.5 %;

丁草胺添加濃度為 0.05 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 72.8 % - 83.6 %;

丙草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 86.4 % - 92.7 %;

敵草胺添加濃度為 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 範圍內，回收率為 88.4 % - 96.0 %。