《調節性B細胞在尋常型天皰瘡發病機制中的研究》是依託上海交通大學，由潘萌擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：調節性B細胞在尋常型天皰瘡發病機制中的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：潘萌
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
尋常型天皰瘡（PV）是危及人類生命的大皰性皮膚黏膜疾病。本課題組在該領域的研究過程中發現除了自身抗體的致病作用外，T細胞及其細胞因子也參與了疾病的發生和發展，多種免疫活性細胞和細胞因子構成的調控網路在疾病中發揮重要的作用。令人感興趣的是我們在以往的研究中發現IL-10在患者外周血單個核細胞和血清中的表達相反，這種同一細胞因子在同一疾病中的表達不同引起了我們的重視。目前國際上有研究發現B細胞除了通過產生自身抗體在自身免疫病中發揮正向致病作用外，還存在一群以分泌IL-10為主的調節性B細胞（Breg），在免疫應答中發揮負向調節功能，維持免疫系統內環境的穩定，是機體自身調節的一種補償。Breg在PV中的功能如何？是否通過產生IL-10發揮作用？其與效應性T細胞、致病性抗體產生之間有何聯繫？本研究擬在前期工作的基礎上在此方面進行序貫性研究，豐富和完善Breg的作用機制，尋找疾病治療的新靶點。
結題摘要
背景：天皰瘡是一危重的自身免疫性大皰性皮膚、黏膜疾病。其中B細胞在自身免疫性疾病中除了正向致病作用外，其負向調節功能被越來越多的揭示。為了更好地探討調節性B細胞（Breg）在天皰瘡發病中可能的調節機制，本研究對天皰瘡患者外周血CD19+CD24hiCD38hiBreg的數量和功能進行研究，以揭示了CD19+CD24hiCD38hiBreg在天皰瘡發病中的可能作用。 方法：臨床上收集天皰瘡患者的外周血，採用ELISA法檢測患者血清中特異性抗Dsg1、Dsg3抗體滴度、亞型，分析其與疾病活動的相關性；明確Breg的免疫表型，流式檢測天皰瘡患者及正常對照外周血中Breg的比例及產生IL-10的能力；PBMCs中去除CD19+CD24hiCD38hiBreg後檢測細胞上清中免疫球蛋白的產生；FACS分選出CD19+CD24hiCD38hiBreg，將其與CD4+T細胞共培養，檢測CD4+T細胞產生細胞因子的情況。另外，通過動物實驗進一步驗證CD4+ T細胞在B細胞的活化、抗體產生過程中的重要作用。 結果：天皰瘡患者特異性抗體滴度和疾病的嚴重度相平行，急性期患者以IgG4亞型抗體為主；天皰瘡患者外周血中CD19+CD24hiCD38hiBreg的比例顯著高於正常對照；CD19+CD24hiCD38hiBreg對B細胞產生免疫球蛋白無影響；正常人中外周血分選出的CD19+CD24hiCD38hiBreg能有效抑制CD4+T細胞分泌Th1型細胞因子，而患者的CD19+CD24hiCD38hiBreg則無明顯的抑制作用。在動物實驗中發現，經重組的天皰瘡抗原蛋白免疫小鼠後產生的反應性CD4+ T細胞轉移至TCR b-/-的小鼠後，可直接活化B細胞，產生IgG1亞型的致病性抗體。 結論：天皰瘡患者外周血CD19+CD24hiCD38hi Breg比例顯著增加，但其功能上對Th1型CD4+T細胞的抑制作用喪失。另外，天皰瘡致病性抗體的產生可以直接通過CD4+ T細胞的輔助。
