血平板培養基

血平板培養基

血平板培養基,通用名稱是血瓊脂平板培養基,用於鏈球菌、金黃色葡萄球菌及其他苛氧菌的分離、培養及溶血活性的檢測。

基本介紹

  • 中文名:血平板培養基
  • 外文名:Blood Agar
  • 通用名稱:血瓊脂平板培養基
  • 要求:量在抗菌藥物使用前採集標本
培養基,檢驗原理,主要成分,樣本要求,檢驗方法,檢驗結果,局限性,性能指標,注意事項,常用培養基,

培養基

通用名稱:血瓊脂平板培養基
血平板培養基
商品名稱:血平板培養基
英文名稱:Blood Agar
血平板培養基又叫做血平板、血瓊脂平板培養基,主要用於鏈球菌及其他苛養菌的分離、培養及溶血活性的檢測。可用於臨床標本的分離、培養。

檢驗原理

其中的蛋白腖和牛肉粉主要提供細菌生長所需要的碳源、氮源、胺基酸及維生素。氯化鈉維持培養基中的滲透壓瓊脂用做凝固劑。脫纖維羊血一方面提供一些特殊的生長因子,另一方面用於觀察溶血反應

主要成分

10g
牛肉粉
3g
氯化鈉
5g
脫纖維羊血
50mL
15g
1000mL

樣本要求

1、儘量在抗菌藥物使用前採集標本。
2、標本採集時應嚴格執行無菌操作,減少或者避免機體正常菌群及其他雜菌污染。
3、標本採集後應立即送至實驗室,床邊接種可提高病原菌檢出率。
4、以棉拭子採集的標本如咽拭、肛拭或傷口拭子,宜採用插入運送培養基送檢。
5、混有正常菌群的標本如咳痰、尿液、傷口拭子,不可置肉湯培養基內送檢。
6、盛標本容器須經滅菌處理,但不得使用消毒劑。
7、送檢標本應註明來源和檢驗目的,使實驗室能正確選用相應的培養基和適宜的培養環境。

檢驗方法

1、復溫:取出培養基復溫至室溫;
2、接種:將取好的標本或菌株,採用劃線、塗布或者其他方法接種於培養基;
3、培養:將接種好的培養基作好標識,置於37±2℃培養箱中避光培養18~24小時,觀察結果;臨床標本應置於含有3~10%CO2的培養箱中培養18~24小時,觀察結果。

檢驗結果

1、溶血性鏈球菌通常呈現透明或半透明的灰白色小菌落(直徑1mm左右),或是較大的、粗糙的、黏液樣菌落(直徑2~4mm)。菌落周圍環繞這溶血環,α-溶血的鏈球菌呈現半透明草綠色溶血環,β-溶血的鏈球菌呈現透明溶血環。為了確認是否為鏈球菌,還應進行革蘭氏染色觀察,因為一些非鏈球菌也可在血平板培養基上形成溶血環(如大腸桿菌、銅綠假單胞菌、李斯特氏菌和溶血性葡萄球菌等)。血平板培養基上溶血性鏈球菌的菌落數量對臨床診斷有一定參考價值。
2、葡萄球菌通常呈現不透明的白色或金黃色菌落,周圍環繞透明溶血環(β-溶血)或沒有溶血環。
3、李斯特氏菌可產生較小的β-溶血環,但是可通過革蘭氏染色和動力試驗與鏈球菌區分。
4、血平板培養基為非選擇性培養基,大多數非苛養菌都可生長。

局限性

由於血平板培養基採用的是脫纖維羊血,其中缺乏嘧啶核苷酸,不支持流感嗜血桿菌及某些奈瑟氏菌的生長。

性能指標

外觀:血平板培養基應為半透明固體,表面平整,不得有裂痕。且培養基不得有肉眼可見氣泡及肉眼可見物(但允許有少量肉眼可見血纖維)。
pH:7.2±0.2
無菌要求:將血平板置於37±2℃培養箱中培養7天,不得有菌生長。
質控菌檢查:
菌株
生長情況
生長良好,白色菌落,不溶血
化膿鏈球菌(ATCC 19615)
生長良好,白色菌落,β-溶血
肺炎鏈球菌(ATCC 49619)
生長良好,透明菌落,α-溶血

注意事項

1、使用前如發現平板內培養基已經乾裂或染菌,請勿使用。
2、用於細菌純化、接種或計數時,請在潔淨的環境下操作,避免雜菌干擾。
3、開封后未使用完的培養基要及時放到冰櫃冷藏儲存,避免乾裂。
4、在冰櫃儲存較久的培養基容易出現較多的冷凝水,請在潔淨環境下將水傾出,然後在培養箱放置一段時間,待其表面乾燥之後再接種。
5、棄物處理:使用後應焚燒或高壓滅菌後按一般垃圾處理
6、僅用於體外診斷。
7、僅用於專業人員。
8、本培養基含有動物來源的產品,產品和動物均已經過檢驗,但是不能保證無致病因子存在,應與潛在感染物同等對待本產品,採取正常安全措施處理本產品(不要肌膚接觸或攝入)。

常用培養基

1、哥倫比亞血瓊脂+5%綿羊血(Columbia agar + 5% sheep blood)
用途:用於分離難養細菌(fastidious bacteria)並鑑定溶血特性
簡介:哥倫比亞培養基是專為營養要求苛刻的微生物而設計的分離培養基,添加羊血後,其豐富的營養可以供絕大多數的具有不同代謝類型的微生物生長。
2、哥倫比亞CNA瓊脂+5%綿羊血(Columbia CNA agar + 5% sheep blood)
用途:用於分離難養細菌並鑑定溶血特性的選擇性培養基
簡介:哥倫比亞CNA瓊脂用於選擇性培養臨床樣本中遇到的絕大多數革蘭氏陽性細菌,培養基中所包含的萘啶酸(nalidixic acid)和柯利黴素(colimycin )將抑制絕大多數的革蘭氏陰性菌和芽孢桿菌的生長。
3、哥倫比亞血瓊脂+5%馬血(Columbia agar + 5% horse blood)
用途:用於分離難養細菌並鑑定溶血特性
簡介:哥倫比亞馬血培養基常用於分離培養對營養要求苛刻的微生物。
4、胰酶大豆瓊脂+5%綿羊血(Trypcase Soy Agar + 5% sheep blood)
用途:用於分離細菌並鑑定溶血特性
簡介:TSA綿羊血培養基適用於分離臨床常見的多種微生物。
5、朱古力培養基+複合纖維素X(Chocolate agar + PolyViteX)
用途:用於分離難養細菌
簡介:添加複合維生素X(PVX)的朱古力瓊脂常用於分離對營養要求較高的細菌,尤其是針對臨床樣本中的奈瑟氏菌屬(Neisseria)、嗜血桿菌(Haemophilus)、肺炎雙球菌Streptococcuspneumoniae)有較好的分離效果。該培養基中富含由血紅蛋白提供的X因子(factors X;血晶素 hemin)和由複合維生素提供的V因子(NAD),該培養基常用於已純化菌株的繼代培養
6、朱古力瓊脂+複合纖維素X VCAT3 瓊脂(Chocolate agar + PolyViteX VCAT3 agar)
用途:選擇性分離淋病奈瑟氏菌腦炎奈瑟氏菌
簡介:該培養基中添加的特殊抗生素和抗真菌劑可以實現選擇性分離複雜臨床樣本中的淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae)和腦炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitidis)。
7、嗜血桿菌朱古力瓊脂(Haemophilus Chocolate 2 agar)
用途:選擇性分離培養嗜血桿菌
簡介:由於人的臨床樣本中常含有大量的其他種類的細菌,因此對嗜血桿菌的分離造成了很大困難,而該培養基由於含有選擇性的抗生素和抗真菌素因此適合用於分離複雜樣本中的嗜血桿菌。

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