螢光顯微鏡技術

螢光顯微鏡技術（fluorescence microscopy）是在光鏡水平對特異蛋白質等生物大分子定性定位研究的最有力工具之一。

基本介紹

• 中文名：螢光顯微鏡技術
• 外文名：fluorescence microscopy
• 作用：生物大分子定性定位研究
• 包括：免疫螢光技術

螢光顯微鏡技術主要是用於檢測細胞上的特異螢光材料，與普通光學顯微鏡不同的是螢光顯微鏡增加了兩套濾光片。第一套稱為激發光濾片，裝在光源和樣品之間，只有那些能激發螢光材料發光的特定波長的光才能通過。第二套稱為阻斷濾片，裝在物鏡和目鏡之間，只讓燃料所發出的螢光通過。在黑暗背景的襯托下，發出螢光的樣品很容易被觀察。

螢光顯微鏡技術包括免疫螢光技術和螢光素直接標記技術。例如，將標記螢光素的純化肌動蛋白顯微注射入培養細胞中，可以看到肌動蛋白分子組裝成肌動蛋白纖維。可將產生螢光的綠色螢光蛋白（green fluorescent，GFP）基因與某種蛋白質基因融合，在表達這種融合蛋白的細胞中，便可直接在活體狀態下觀察到該蛋白在活細胞內的動態變化。不同螢光素的激發波長範圍不同，所以同一樣品可以用兩種以上的螢光素標記，同時顯示不同成分在細胞中的定位。