《蛋白質O-GlcNAc糖基化修飾對血管損傷的保護及其分子機制》是依託揚州大學，由張振剛擔任項目負責人的專項基金項目。
基本介紹
- 中文名：蛋白質O-GlcNAc糖基化修飾對血管損傷的保護及其分子機制
- 項目類別：專項基金項目
- 項目負責人：張振剛
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
炎症激活是血管損傷後期血管壁異常重構的一個重要病理機制，目前尚無特異性的有效治療藥物。近來發現增加局部O-GlcNAc修飾水平可有效減輕損傷血管炎症激活及內膜增生，但其分子機制不清楚。為測試假說：增加血管關鍵效應細胞內IκBα的O-GlcNAc修飾，通過反饋抑制轉錄因子NFκB的激活而發揮抗炎及血管保護效應，本研究將通過使用新培育的細胞特異性O-GlcNAc修飾催化酶OGT基因敲除小鼠，分別探討血管平滑肌細胞及巨噬細胞內O-GlcNAc修飾與血管損傷反應之間的關係，明確增加O-GlcNAc修飾發揮血管保護作用的細胞靶標。在體外細胞培養模型探討增加O-糖基化修飾對上述效應細胞炎性應答反應的調節機制，證實IκBα的O-GlcNAc修飾對抑制NFκB通路激活的作用環節，從而在整體、細胞及分子水平闡明蛋白質O-GlcNAc修飾的抗炎及血管保護作用機制，為研發新型血管保護藥物提供新的分子藥物干預靶標
結題摘要
炎症激活是血管損傷後期血管壁異常重構的一個重要病理機制，目前尚無特異性的有效治療藥物。我們近來發現增加局部O-GlcNAc修飾水平可有效減輕損傷血管炎症激活及內膜增生，但其分子機制不清楚。本項目研究在前期工作基礎上，我們旨在測試假說：增加血管平滑肌細胞內IkBα的O-GlcNAc修飾可通過反饋抑制轉錄因子NF-kB的活化來發揮抗炎及血管保護效應。為此，本項目研究利用分離培養的大鼠主動脈平滑肌細胞（VSMC），採用攜帶O-GlcNAc轉移酶（OGT）的腺病毒感染VSMC來增加細胞內O-GlcNAc修飾水平後，我們發現它可顯著抑制腫瘤壞死因子-α（TNF-α）誘導的促炎細胞因子MCP-1及VCAM-1的表達；相反，感染O-GlcNAc水解酶（OGA）腺病毒通過水解GlcNAc來降低蛋白質的O-GlcNAc修飾水平後，則可進一步增強TNF-α誘導的MCP-1及VCAM-1的表達。相似的是，我們還證實，通過使用選擇性OGA抑制劑PUGNAc或Thiemet G預處理來增加細胞內O-GlcNAc修飾水平也可顯著抑制VSMC的遷移。隨後採用免疫共沉澱等方法初步證實IkBα確實存在O-GlcNAc修飾，並且kBα O-GlcNAc修飾在一定程度上可有效抑制其磷酸化，從而有助於抑制NF-kB通路的進一步活化。這些研究結果是對蛋白質O-GlcNAc修飾的抗炎及血管保護作用機制的一個全新認識。
